so微生物检查操作规程

伐颁发纤部门师微生商物限硬度检槐查操火作规耍程袜接收敲部门止生效谎日期户操作皂标准仆--籍-质雀量幅制定秒人替制定直日期仅文件概编号码审核脱人阶审核尺日期煌文件暮页数粪共6邮页闻批准侨人劈批准庄日期亦分发中部门1目的建立微生物限度检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。2范围适用于本厂质监科化验室对本厂生产的固体制剂及物料进行微生物限度的检查。3责任化验员有责任按照本操作规程进行检验、判定,并对检验结果负责。4定义微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。5内容5.1总则：5.1.1供试品应随机抽样。一般抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。悲5华.冲1饰.请2萍供试抬品在吓检查涝前不捡得开菊启，套检查呼全过列程均杜应严屋格遵闹守无扁菌操县作规肆程，喉严防延再污惕染。绑5论.挤1牧.逗3与控制凡菌的必污染垂检查绿应做竖相应蜻的已横知菌亲对照喂试验锅，对虎照菌谎株为虏大肠眼杆菌锣[C杜MC敞C（雄B）垒44秩10汁2]摘，每修批试密验已佳知菌污加入放量为劲50授-1宽00国个。泪5腔.探1棋.咸4济染菌味量的斥检查箱或控配制菌球的检楚查均采应做蒙空白帜对照士试验辰。孕5羡.辫1裹.托5慧供试潮品稀廉释成辫稀释匙液后畜应在陵均匀晌状态厕下取安样，艺凡有处抑菌粱成份昏或防肿腐剂钳的供笛试品胃应做昌特殊伙处理蓝后进垦行检垮验。耀5针.兼1姜.锡6店直供试煤品稀鼻释后充应在产1小抵时内幸操作辟完毕芬。恭玉虽爬晌益牧杜竟唤省急湾缴成硬竭夕滨熄第怎2页散/共眨6页斥5捆.收1注.奖7盟除另今有规遣定外怨，细伙菌培致养温证度为栋30课-3态5丧℃兴，霉丝菌、灾酵母汁菌培管养温凤度为城25奋-2盼8颠℃离，控刺制菌刘培养绵温度亩为3妥6挣℃±住1谢℃歌。阵5使.约1仰.嘱8最细菌魂、霉活菌检策验结铁果的拿报告恒以1沃g嘱、1碗ml吃或1幻0柄cm搭2补为单尾位听；边控制剧菌检肉验报链告以色每1埋g来、每暗1岸ml叨或每顺10您cm现2雅为单忽位报西告保“鄙检出秋”链或凭“狮未检袍出珠”效。蝶5派.丢2厦仪器垦、用休具友恒温职培养坏箱、狼隔水地式生茫化培仇养箱碑、电宅子天总平，张移液雕管(液1m尖l六、兽10轻ml糟)疏、试舍管、售离心眼管、予双碟密、镊栏子、墨剪刀终、不畅锈钢蝇吸管里筒、去酒精化灯、写取样阴勺、很称量地纸、庙研钵蹲一个怖、不渴锈钢榜双碟干筒。鸽5割.某2黎.丛1榜用具掘的包消扎荒岩移液左管：涂用纱首布包刷住移螺液管洋，然这后放岗入不哄锈钢闸灭菌拨筒内配。意膊试管菊、双功碟：能试管例在管宪口塞就上纱温布棉辨塞、青双碟心放入为不锈恨钢双盖碟筒朽内。养忽无菌障衣、姥裤、庄帽、绕口罩好：用祥布口笋袋将怠洗净汉的衣辆裤、耍帽子叙、口校罩配熄套后订装入溜，扎递紧袋乒口，衬再用找牛皮灾纸包剑好。谢5找.热2包.鹊2信用具祸的灭混菌福将包盘扎好弹的用阳具，由在旬12泪1窄±例0.呼5暴℃仅蒸汽帆灭菌券柜中陵灭菌职30溜晒分钟事，物寇品取厌出时碎切勿川立即敢置冷戴处，盘以免在急速饺冷却毯灭菌削物品纠内蒸炭汽凝惰造成虹负压初，易骡致染墓菌，鸣应置井烘箱总烘干引。移5需.殖3古培养枕基、号试剂妖5崭.垄3匪.厕1营盟养葛琼脂臭培养苏基毯称取龟本品怖36风克，稼加1弟升蒸蠢馏水逼，加效热溶靠解后让，按吊需要处进行屠分装炸，经最12拨1痰℃肠15创分钟柱灭菌录备用池。紫5造.企3供.敬2挡虎红醒培养糕基念忘称奇本品四30成克，容加巩1匪升蒸番馏水切，加觉热溶冠解，密分装夕，高茶压灭样菌旋11宵6霜℃立20槽分钟厅。遭5般.踢3发.童3阳胆盐虹乳糖秤培养模菌（触BL宵）役称本号品李36台克，坦加法1优升蒸惹馏水猛，加零热溶社解，蔬分装渣，高治压灭氏菌雕11嘴6万℃孙20丙分钟艘。臭5酷.景3煎.徒4胁曙红作亚甲月蓝琼古脂培远养基忧（E站MB勉）窃称本衔品4魔2克胖，加悲1担升蒸滑馏水灯，加专热溶败解，经分装甚，高豪压灭手菌优11职6幼℃佳20惧分钟功。膀5塞.晶3辟.艰5南生理酒盐水慰称取凭9灭g煌氯化发钠，桌加水察10批00愁m州l锻溶解麦，分以装后茎于爪12平1姑℃±妈0.日5泡℃唱湿热必灭菌横30保分钟方，供违作稀专释剂雁用。连5缝.员3严.棍6者7耐5%抽酒精租棉迁量取令无水降乙醇隙75符ml叉，加造水稀糕释至护10享0m拣l俭，摇烤匀，起将脱劲脂棉随与璃75扬%占酒精石混合碑即得舍。暑5强.部3罪.捕7丘0匆.1成%捡新洁届而灭吓哗券贸替唯哪册扮酒暗妹坡锅割牙禾锈辽巴第3装页/御共6孟页技量取促5%嗽新洁庙而灭都20解ml眯，加喘水稀僚释至姑约兴10循00历ml滴，摇顺匀，挺即得报。贴5雪.爆4痛进入沃无菌根室的傅操作颂要点月用肥锈皂水挪洗手垃，换蝶消毒阁鞋，忧关闭求缓冲脚间紫剃外灯委，将姐用具嫁物品旗搬入贿传递栽窗口卖内，稠用紫努外灯最灭菌源15鞋分钟纹，关点闭第勿一层估门，半用普1%岁新洁茫而灭遇洗涤挖双手郊，用鹊消毒韵毛巾格擦干稠，换院上无技菌衣络、裤辆、帽旅子、婚口罩爷及消舱毒鞋育。关彼闭无浙菌室扶内紫队外灯零，进秘入第笔二层晌门并娘将用熊具搬饱至无直菌室蛾内，众关闭叼无菌翼室门蜂。劫凡进悦入无算菌室正后不夹应再础外出田取物溪品，律因此丰，在鸽每次尿试验莲中所恨用物暮品必彩须计返划好北，并懂准备槽好备墨用物磨品。现从进抚入第坡一层我门直辟至无渐菌室毯内，勤随工伟作人叔员的考进入说就喷径雾静0.定1%集新洁合而灭红溶液傅。址5业.5棕检查朋法：萌5眉.5白.杨1感细菌付、霉阔菌的在染菌皮量，胶采用妥培养受皿菌看落计榨数法屑。窄5缠.5尚.1夸.1航艇供试潜液的富制备攀：明赤稀固体能供试傻品以造无菌谅操作纷称取传10承g短，置殊含禁0.腿9%向氯化捏钠的宿生理浸盐水灶10伯0m台l青中，劳振摇枣溶解雪，使亮成轧1:趴10羡稀释和度的肉供试去液。童然后乞吸取担1:且10茧的供德试液话1肤ml扇，置豆含饼0.凶9%饭氯化森钠的城生理她盐水网9垂ml臂中，月稀释淘成节1:蝶10垫0匆稀释绣度的男供试弓液。肉依次烫可制掀成捕1:锤10踪00失的供柴试液蛛。弓5将.启5鸭.1波.2葵即吸样优：薄电捷分别拼吸取溜1:俗10败、跃1:罚10辜0徒、电1:司10采00摧的供唐试液曾1帮ml税分别骑注入辆2-乐3旺个平怠皿中牌。喉5旧.5游.1李.摸3修注皿毙：算三通将事占先融衡化并扯置像45浆℃樱水浴大中保服温备兔用的袜细菌新、霉梦菌培兴养基帐分别嫩倾注膊入平春皿，善每皿会约荡15记ml绞，随爆即转观动平镇面，身使供它试液扩与培狂养基照混匀和，分皮别作已上标膀记，腿置睬水平州台上璃待凝极。同庄时作建空白倾对照隆（不设加样乏品，竿将两塑个双出碟分餐别加仇入虎唇红培叨养基芒和营绕养琼插脂培隶养基纽，操锯作同阔上）摔。鹅5绩.5敬.1丙.4影喘培养驾：丽迫另将凝潮固好棋的平裕皿按钢规定购温度且倒置痛于培歇养箱赤中培塞养。影细菌骗培养杯48聚小时来；霉困菌执培养撒72枕小时恨。恼5甩.捷5疏.1咱.5街菌落请形态判厉浅细菌码菌落峡是一乞个菌敌细胞亿或菌榴细胞杯团在都局限押位置漆上，旬经一锋定条嚷件下怕繁殖赠成肉摸眼可杯见的考细菌护群体记，外牧观湿弯润或吹干燥矛，表张面光削滑或抗折皱宪，外械缘整输齐或渣缺陷益。中骆泻具有怪放射拐或树病枝样漆分枝脖的菌剃丝是拐霉菌仇菌落狡的特烛征。谦初形谈成时理多无牧色透读明，验有明狼显的陵折光看性，逼成熟锄的霉毅菌菌孔落有甘各种御颜色督的孢板子形惹成。睛在较辛暗的谅背景低下以固透射并光观幅察，秘易于饰识别午。鲜5.蚁5.败1.渠6菌黄落计坊数法涉：丽淹饶先用灭肉眼茶观察荷，标专记并跑计数矿，然夏后用赏5-盐10袜倍放幕大镜汤检查误有无蝴遗漏饥。巾脏晒伸川嘱轨枣剑套叹烟脂纵帅材撞也质第4站页/上共6佛页眠察盘如有没片状哄菌落务或花盆斑样趣菌落跃蔓延恐生长障的以恩及平敬板受筋到污欠染的挤情况筹，则允该平慧板计每数无贿效。早若平针板上巧有2种个或赴者2捷个以灾上的惧菌落待重叠光，如谱可分味辩，葵仍以瞎2个宽或是功2个豆以上骗菌落雷计数泄。当叼一个毕稀释蜜级用凤2个炕平板星时，茫应采厌用2糊个平馒板菌屠落数溪的平喂均值故。计独算各性稀释价级的匆平均施菌落即数按嫩菌数剪报告式规则酒报告缎菌数旅。魔兵础如各筑稀释舅级平扇板均帜无菌戏落生腰长，樱或仅妨最低侵稀释轻级平餐均菌悲落数洪小于逆1时裕，则弓报告馋菌数峰为小弹于1信0个殊。奉昆菌数特报告谁规则辫：猴细蛾菌宜盖选取屋平均蹲菌落杯数在硬30唐～3幅00疾之间招的稀仁释级手，霉爹菌宜区选取滑平均添菌落左数在嘴30日～1泻00昨之间监的稀谨释级址作为咐报告闹菌数福计算策的依狂据。眨如有拥1个骂稀释扎级在梨30非～3黎00镰（3团0～摊10妖0）帽之间奖时，虚将该医稀释当级的迟菌落蓄数乘贸以稀乔释倍赶数报闷告；高如同恋时有耽2个恨稀释苍级在雪30突～3此00讽（3乎0～拴10坦0）画之间耕时，并按下述式计钟算两觉级比燥值。耳听平键龟饱片汇英膊察柿高稀钳释级枣的平译均菌稍落数驴×年稀释姥倍数宴锡摇烟偷血诸比贩值击=矛——旨——临——渴——爆——挠——瞧——四——者—盏旋贺秩尿磁荒哀男绳派蹲低稀尼释级匆的平会均菌详落数香×指稀释伶倍数迷师塑当比纯值剧≤掏2时屑，以忍两稀恐释级旺的均殿值报咸告，解当比膜值>抚2时撕，以昏低稀覆释级什的平叮均菌重落数铁乘以历稀释硬倍数造报告乎；如盆同时载有3零个稀述释级金的平显均菌坝落数杯均在帆30各～3炭00刮之间团时，劈以后纯2个兴稀释炼级计路算级抗间比串值报蚁告；抗如各债稀释滔级的协平均棒菌落遥数均吴不在考30难～3现00金以最绢接近焦30润或3糕0竿0的讨稀释杆级平共均菌患落数侍乘以岁稀释蛮倍数强报告姿；如搂各稀鲜释级抱平均笋菌落灶数均奔在3企00没（1截00仿）以费上，凯按最指高稀租释级鸭平均稳菌落啄数乘尿以稀干释倍若数报愈告；磁如各溪稀释留级平铸均菌策落数坊均小昏于3浓0时兔，一贪般按会最低佛稀释换级平变均菌看落数合乘以阔稀释赞倍数抹报告崇。甜5凶.5屯.紫2育控制定菌的太检查惠：毁腥忌除另肃有规番定外慈，取络供试续液1太0匪ml谋（相挡当于坟供试躺品1恼g磨、舌1m膀l花、1营0弊cm登2织），症直接贫或祸处理垫后接秧种，浸经增叙菌、哄分离腊培养胆后，坝进行伪革兰摔染色监、生破化试徐验与为血清蛇凝集叮试验明等项其检查亮。览5.巨5.使2.登1大角肠杆矿菌检妨查法刘：音令馒取胆端盐乳与糖培遗养基般3份金，每绝份1妖00危ml鞠，2割份分箱别加室入规杯定量躺的供腾试液屿，其钢中1客份加势入对尸照菌拴50盏-1抛00期个作棒阳性购对照斯，第跃3份洗加入醒与供塞试液扑等量茧的稀增释液宁作鲁阴性救对照亲。培稳养1缘8-密24刺小时油（必局要时往可延馆至4撤8小题时）革。阴删性对翁照应牌无菌客生长裹。值取上刘述3抽份的沟培养衡物各仰0.括2m狐l描，分棉别接妄种至筛5矿ml烂MU兔G培俱养基末管内针培养千，分岩别于孔5川小时寄与2忧4小蝇时时场，取峡未接侮种的抹MU蜻G培凉养基乖管作开本底垮对照踪，将哑各管其置3喘65木nm鞋紫外锹光下巡观察松。阳永性对麦照管庭呈现妈荧光症，M鄙UG夏阳性煌。供子试液候的M殊UG屋管呈存现荧敌光，酸MU锦G阳枪性；副无荧社光，纷MU染G阴掘性。歼然后拢加数辟滴靛妄基质皆试液何于M危UG嘴管内胞，液横面呈宾玫瑰辱红色练为阳宫性，赛呈试塌剂本庸色为别阴性腹。挂耳完当阴稼性对脊照呈沸阴性敲，阳轰性对华照正购常生敏长，雁供试侨液胆宏盐乳跌糖培偏养基下培养段液澄炼洪遥谅津兆虾旧泡停章守瞒垫援脉壳遥兰米第5些页/荷共6司页缺明，稿并证膀明无盛菌生沃长，凯判未僻检出例大肠拆杆菌帝。敞伏直如M闻UG航阳性陕、靛冲基质绸阴性矿，或哭MU植G阴捡性、道靛基溜质阳纷性，且均应稿取供尊试液宝胆盐按乳糖遥培养拍基培莲养物镰划线将于曙左红亚护甲蓝鹊（E稳MB猪）琼禁脂平普板或凤麦康耽凯琼诵脂平栋板，寄培养碎18网-2进4小达时，室如上霉述供窝试液构培养撑物的曲分离隆平板州无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