霍乱弧菌破伤风梭菌产气荚膜梭菌结核分枝杆菌教材课件

一霍乱弧菌

霍乱是一种烈性肠道传染病，有3个疫源地印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）：六次世界性大流行，始于1817年印尼苏拉威西岛（O1群，埃尔托生物型）：第七次世界大流行，始于1961年至今未停止，累及140多个国家孟加拉湾（O139，Beolgal）：始于1992年，危害相同WHO规定：疑为霍乱病例，三种同时检测一、生物学性状形态染色

G—弧菌，弧形或逗点形，单鞭毛，穿梭样运动，鱼群状排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞扫描电镜×15000培养特性兼性厌氧，氧气充分生长良好耐碱怕酸，常用培养基为pH8.8~9.0碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板能在无盐培养基中生长（区别其它弧菌）生化反应触酶、氧化酶（+），硝酸盐还原（+），吲哚试验（+）

抗原主要有O和H抗原，根据O抗原的不同分类：

O1群O139群：小川型稻叶型彦岛型古典生物型ElTor型古典生物型ElTor型古典生物型ElTor型脂多糖抗原和荚膜抗原

抗原构造与分型抵抗力

较弱怕干——干燥时易死亡，水环境中可存活两周（水源性传播，水性爆发）怕酸——正常胃酸4min不耐热——100℃，1-2min对消毒剂、抗生素敏感1.霍乱肠毒素——最强烈的致泻毒素其致病机制与ETEC的LT相似，但作用强烈得多

A亚单位活性亚单位

B亚单位与受体介导A亚单位进入细胞1A+5B二、致病性与免疫性（一）致病物质2.侵袭力黏液素酶

液化黏液作用鞭毛有利于细菌穿过黏膜表面黏液层菌毛定植（二）所致疾病——霍乱（甲类法定传染病，俗称2号病）传染源：病人和无症状感染者传染途径：通过污染的水源或食物经口摄入发病条件：暴饮暴食感染所需菌量：1010（水）

102～104（食物）

酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力二、产气荚膜梭菌潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，以气肿、水肿和全身中毒为特征专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.牛奶培养基：汹涌发酵现象（stormyfermentation）B亚单位与受体介导A亚单位进入细胞致病物质、所致疾病及防治原则芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强；因自主神经系统功能紊乱，还可产生心率不齐、血压波动、呼吸困难而窒息死亡。鞭毛有利于细菌穿过黏膜表面黏液层注射结核杆菌于豚鼠皮下中和游离毒素的作用；其致病机制与ETEC的LT相似，但作用强烈得多β毒素：组织坏死“红、馋、懒、顽、变”耐碱怕酸，常用培养基为pH8.（1）索状因子（糖脂—分枝菌酸+海藻糖）：引起慢性肉芽肿所用器械、敷料彻底灭菌（2）继发感染——成人（外/内源性感染）（三）免疫性阻止霍乱肠毒素与上皮细胞上的受体结合抗毒素——中和霍乱肠毒素抗菌抗体——针对O抗原SIgA阻止霍乱弧菌粘附于肠粘膜上皮细胞1、O1群：2、O139群：产生针对荚膜多糖及脂多糖的免疫为主病人愈后可获得牢固免疫

感染O1群获得的免疫对O139群感染无交叉保护作用病人米泔水样粪便，肛拭子（流行病学调查包括水样）标本直接镜检分离培养碱性蛋白胨水增菌选择培养基为TCBS生化反应玻片凝集反应涂片见G-性弧菌，鱼群状排列悬滴法观察细菌呈穿梭样运动标本必须密封专送，专训人员检测三、微生物学检查一般预防疫苗预防加强水源管理；注意饮食卫生；流行区隔离、消毒灭活疫苗；减毒活疫苗等基因工程疫苗治疗预防对症处理，及时补充液体和电解质抗生素等药物的应用如四环素、强力霉素、氯霉素等四、防治原则：

嗜盐性弧菌，存在于近海海水、海泥、海产品中，主要引起食物中毒。特点：嗜盐，在含有3.5%NaCl培养基中生长良好，无盐不长，＞8%也不长，在海水中可生存47天以上。

潜伏期短，几小时即可发病。症状严重，可有水样、血水样便。恢复较快。二副溶血性弧菌（Ｖ．parahemolyticus）第十一章幽门螺杆菌G—

，菌体弯曲呈螺旋型、S形、海鸥形，有鞭毛对胃酸敏感，最适pH6-7与胃炎、消化性溃疡、胃腺癌和胃粘膜相关B细胞淋巴瘤（MALT）小结霍乱弧菌分类、形态、染色、培养、抵抗力、致病物质、所致疾病及防治原则第十二章厌氧性细菌

厌氧性细菌：是一群必须在无氧环境下，

才能生长繁殖的细菌。

分类：厌氧芽胞梭菌无芽胞厌氧菌

第一节厌氧芽胞梭菌

破伤风梭菌产气荚膜梭菌肉毒梭菌共性G+，大多为严格厌氧菌；芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强；致病菌产生外毒素致病，病情严重1.是破伤风的病原菌2.大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染3.创口污染、分娩时用不洁器械剪断脐带，本菌可从伤口侵入而致病4.临床表现：肌肉痉挛，抽搐，最终呼吸衰竭或窒息而死5.发病后，死亡率很高一、破伤风梭菌（C.tetani）G＋菌体细长有芽胞细菌，呈鼓槌状周身鞭毛形态与染色（一）生物学性状培养特性专性厌氧，营养要求不高血皿：薄膜状爬行生长物，有溶血环生化反应不活泼抵抗力

有芽胞菌抵抗力强，

能耐100℃

1小时，土壤中可存活数十年

1.致病条件：有外伤史，造成伤口厌氧微环境伤口深而窄，伴有泥土或异物污染大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部缺血有需氧或兼性厌氧菌混合感染（二）致病性与免疫性土壤中可存活数十年鞭毛有利于细菌穿过黏膜表面黏液层tuberculosis)二、产气荚膜梭菌二副溶血性弧菌（Ｖ．parahemolyticus）是引起气性坏疽的病原菌，广泛存在于自然界及人和动物肠道中——免疫力与迟发型超敏反应并存——免疫力与迟发型超敏反应并存运动神经末梢麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。毒力变异：1908年卡氏和介氏两位科学家将有毒的牛型结核分枝杆菌接种在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经13年230次传代获得的减毒活菌株，即卡介苗（BCG），现广泛用于结核病的预防。酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）：潜伏期短，几小时即可发病。标本必须密封专送，专训人员检测潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，以气肿、水肿和全身中毒为特征兼性厌氧，氧气充分生长良好（但病灶内常有细菌的潜伏）嗜盐性弧菌，存在于近海海水、海泥、海产品大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染始于1992年，危害相同所用器械、敷料彻底灭菌2.致病物质：破伤风溶血毒素

破伤风痉挛毒素编码基因：质粒组成：蛋白质，不耐热；可被肠道蛋白酶消化作用特点：神经毒素作用部位：脊髓前角细胞和脑干神经细胞毒性：强，仅次于肉毒毒素免疫原性:强，可制成类毒素与SLO在抗原、功能上相似痉挛毒素末梢神经淋巴液血液封闭抑制性突触的介质释放牙关紧闭角弓反张强直性痉挛伸肌、屈肌同时强烈收缩脊髓前角细胞、脑干破伤风致病机制破伤风痉挛毒素作用机理破伤风痉挛毒素作用正常作用苦笑面容牙关紧闭角弓反张其它早期症状还包括有漏口水、出汗和激动；因自主神经系统功能紊乱，还可产生心率不齐、血压波动、呼吸困难而窒息死亡。几天至几周潜伏期典型的症状3.所致疾病—破伤风牙关紧闭角弓反张

新生儿破伤风

4.免疫性

主要是体液免疫，破伤风抗毒素可中和游离毒素的作用；患过破伤风后不易获得牢固的免疫力获得有效抗毒素的途径是人工免疫（三）微生物学检查法一般不进行涂片镜检和分离培养典型的症状和病史即可作出诊断致病条件与破伤风梭菌相同二、产气荚膜梭菌因自主神经系统功能紊乱，还可产生心率不齐、血压波动、呼吸困难而窒息死亡。霍乱是一种烈性肠道传染病，有3个疫源地酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力病人愈后可获得牢固免疫②抗生素：大剂量青霉素、红霉素专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.β毒素：组织坏死二副溶血性弧菌（Ｖ．parahemolyticus）专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.牛奶培养基：汹涌发酵现象（stormyfermentation）怕酸——正常胃酸4min组成：蛋白质，不耐热；阻止霍乱肠毒素与上皮细胞上的受体结合G—弧菌，弧形或逗点形，单鞭毛，穿梭样运动，鱼群状排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞镜检：见G+大杆菌，有荚膜，且常伴有其他杂菌污染。生长缓慢，18h分裂一次，2-4W形成R型菌落，“菜花样菌落”，乳白色干燥不透明，表面呈颗粒结节霍乱肠毒素——最强烈的致泻毒素分枝杆菌属是一类细长微弯的细菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名。（四）防治原则1.非特异性预防：及时清创、扩创，破坏伤口厌氧微环境2.特异性预防：人工主动免疫：注射破伤风类毒素

百白破三联菌苗，DPT人工被动免疫：注射破伤风抗毒素(TAT)—紧急预防3.特异性治疗：①早期足量注射TAT②抗生素：大剂量青霉素、红霉素③对症处理：镇静解痉药二、产气荚膜梭菌

是引起气性坏疽的病原菌，广泛存在于自然界及人和动物肠道中G+粗大杆菌有芽胞，位于次极端，呈椭圆形，小于菌体直径有荚膜无鞭毛形态染色：(一)生物学性状厌氧，但不十分严格；繁殖快；

42℃最好，生长迅速培养特性：血皿：双层溶血环蛋黄琼脂平板：Nagler反应theta牛奶培养基：汹涌发酵现象（stormyfermentation）

产气荚膜梭菌在牛奶培养基中能分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固；并产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，气势汹涌，称汹涌发酵现象。外毒素：10余种毒素：溶血、组织坏死、水肿

β毒素：组织坏死肠毒素致病物质：（二）致病性及时扩创→破坏厌氧微环境酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力（但病灶内常有细菌的潜伏）（气性坏疽主要死亡原因）专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.0碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板可分为三大类：结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌怕酸——正常胃酸4min方法：前臂皮肤皮内注射，48-72h后观察结果镜检：见G+大杆菌，有荚膜，且常伴有其他杂菌污染。免疫功能低下者，如艾滋病或肿瘤患者，以及使用过免疫抑制剂者等。治疗原则：早期、足量、长期、联合用药运动神经末梢麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，以气肿、水肿和全身中毒为特征A亚单位活性亚单位第十三章分枝杆菌属食入被大量产气荚膜梭菌污染的食物（多为肉类）齐-尼抗酸染色法1000×免疫功能低下者，如艾滋病或肿瘤患者，以及使用过免疫抑制剂者等。因自主神经系统功能紊乱，还可产生心率不齐、血压波动、呼吸困难而窒息死亡。加剧α毒素的致病机理α毒素分解细胞膜上的磷脂和蛋白质的复合物溶解RBC、WBC、BPC溶血溶解组织细胞血管内皮损伤组织坏死促进血小板凝集血管通透性↑血栓形成局部水肿局部组织缺血缺氧作用于心肌血压、心率↓

休克、死亡（气性坏疽主要死亡原因）气性坏疽气性坏疽主要由A型产气荚膜梭菌引起致病条件与破伤风梭菌相同潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，以组织坏死，以气肿、水肿和全身中毒为特征所致疾病食物中毒食入被大量产气荚膜梭菌污染的食物（多为肉类）腹痛、腹胀、水样腹泻；无热，无恶心呕吐1.直接涂片镜检：取材：创口深部取材，涂片；镜检：见G+大杆菌，有荚膜，且常伴有其他杂菌污染。2.分离培养和动物实验（三）微生物学检查尽早手术（切除感染组织，必要时截肢）多价抗毒素：早期用抗生素：大剂量治疗高压氧舱治疗：提高血液和组织的氧含量达15倍（四）防治原则预防及时扩创→破坏厌氧微环境严密隔离病人；所用器械、敷料彻底灭菌治疗肉毒梭菌主要存在于土壤中，在厌氧环境下产生肉毒毒素引起肉毒中毒和婴儿肉毒病。三、肉毒梭菌1.形态染色：G+粗杆菌，有芽胞，呈网球拍状周身鞭毛2.培养：严格厌氧，血平板上有溶血。(一)生物学性状1.致病物质：：肉毒毒素是目前已知最剧烈的毒素。不耐热，100℃1min神经毒素，根据其免疫原性分A-G7个型，各型毒素只能被同型抗毒素中和。我国以A型多（二）致病性细菌肉毒毒素重链与受体结合轻链进入细胞，阻碍乙酰胆碱释放重链

S

S

轻链

运动神经末梢麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。肉毒毒素作用正常肉毒毒素作用机制Albert染色：菌体绿色，内有蓝褐色颗粒G—弧菌，弧形或逗点形，单鞭毛，穿梭样运动，鱼群状排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞血皿：薄膜状爬行生长物，有溶血环运动神经末梢麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。（1）原发感染——常见儿童（外源性感染）人工被动免疫：注射破伤风抗毒素(TAT)—紧急预防症状严重，可有水样、血水样便。芽胞比菌体粗，菌体膨大呈梭状，抵抗力强；兼性厌氧，氧气充分生长良好红肿硬结＞5mm，阳性（≥15mm，强阳性）伸肌、屈肌同时强烈收缩传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜作用部位：脊髓前角细胞和脑干神经细胞牛奶培养基：汹涌发酵现象（stormyfermentation）白喉棒状杆菌

(C.二、产气荚膜梭菌封闭抑制性突触的介质释放A亚单位活性亚单位怕酸——正常胃酸4min不耐热，100℃1min

2.所致疾病食物中毒单纯性毒素中毒，而非细菌感染临床表现与其它食物中毒不同，主要为运动神经末稍麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。

食物种类：国外：罐头、香肠、腊肉国内：发酵豆制品占80%，发酵面制品占10%婴儿肉毒病以6个月以内的小婴儿居多症状与肉毒毒素食物中毒类似，早期症状是便闭，吸乳、啼哭无力。（三）防治原则预防治疗多价抗毒素加强护理和对症治疗食品卫生监督、彻底灭菌

小结1.破伤风梭菌的形态染色、致病条件、致病性和防治原则；2.产气荚膜梭菌的形态染色、培养特点、致病性；3.汹涌发酵现象4.肉毒梭菌的形态、致病性、防治原则。第一节结核分枝杆菌

(M.tuberculosis)

分枝杆菌属是一类细长微弯的细菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名。

特点：1.细胞壁含有大量的脂质2.菌体不易着色，不易脱色，故采用抗酸染色，分枝杆菌又称抗酸杆菌3.无特殊结构，致病与菌体成分有关，形成慢性肉芽肿性病变4.营养要求高，生长缓慢5.可分为三大类：结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌

第十三章分枝杆菌属一、生物学性状“红、馋、懒、顽、变”（一）形态与染色菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在，易发生L型，抗酸染色阳性（红色）红齐-尼抗酸染色法1000×（二）培养特性专性需氧，温度37℃，pH偏酸6.5-6.8营养要求高，罗氏培养基（蛋黄、甘油、天门冬素、马铃薯、无机盐、孔雀绿等）生长缓慢，18h分裂一次，2-4W形成R型菌落，“菜花样菌落”，乳白色干燥不透明，表面呈颗粒结节馋懒（三）抵抗力四不怕干燥酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力碱性染料青霉素等抗生素四怕乙醇湿热紫外线抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）顽（四）变异性形态变异菌落变异毒力变异：1908年卡氏和介氏两位科学家将有毒的牛型结核分枝杆菌接种在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经13年230次传代获得的减毒活菌株，即卡介苗（BCG），现广泛用于结核病的预防。耐药性变异变（一）致病物质——菌体成分1.脂质——存在于细胞壁（1）索状因子（糖脂—分枝菌酸+海藻糖）：引起慢性肉芽肿（2）磷脂：形成结核结节、干酪样坏死（3）蜡质D（分枝菌酸+肽糖脂）：引起迟发型超敏反应（4）硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体结合，使细菌在吞噬细胞中长期存活二、致病性2.蛋白质有免疫原性、本身无毒，如结核菌素蛋白质+蜡质D——迟发型超敏反应，导致组织坏死和全身中毒症状，结核结节形成3.多糖（二）所致疾病传染源：排菌的肺结核患者传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜1.肺部感染（1）原发感染——常见儿童（外源性感染）结局机体抵抗力强形成结核结节→纤维化→钙化→自愈（但病灶内常有细菌的潜伏）机体抵抗力差全身播散→全身粟粒性结核、结核性脑膜炎肺泡渗出性炎症（原发灶）肺门淋巴结（肿大）沿淋巴管扩散（炎症）原发综合症（哑铃型）特点：特异免疫没有建立，感染易扩散（2）继发感染——成人（外/内源性感染）特点：已建立特异性细胞免疫，故病灶局限，不易扩散病变一般局限于肺部，易发生干酪样坏死，可形成空洞和开放性肺结核2.肺外感染

肠结核，结核性脑膜炎，皮肤结核，肾结核，骨结核等（一）免疫力人体对该菌有较强免疫力（感染率高，发病率低）主要是细胞免疫（有菌免疫）三、免疫性与超敏反应（二）超敏反应郭霍现象注射结核杆菌于豚鼠皮下初次注射

局部反应大全身扩散无免疫无超敏反应再次注射局部反应小不扩散有免疫有超敏反应

——免疫力与迟发型超敏反应并存以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠24-48小时10-14天局部红肿、浅溃疡局部红肿、溃疡

不扩散，脱落后自行愈合坏死，经久不愈有毒TB菌全身扩散皮下郭霍现象（三）结核菌素试验原理：根据免疫力与迟发型超敏反应同时存在的原理，用结核菌素测定机体能否发生迟发性超敏反应，以判断机体对结核有无免疫力试剂旧结核菌素（OT）两种纯蛋白衍生物（PPD）方法：前臂皮肤皮内注射，48-72h后观察结果以6个月以内的小婴儿居多抵抗力有芽胞菌抵抗力强，（但病灶内常有细菌的潜伏）注射结核杆菌于豚鼠皮下0碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板易发生L型，抗酸染色阳性（红色）Albert染色：菌体绿色，内有蓝褐色颗粒食物种类：国外：罐头、香肠、腊肉初次注射局部反应大全身扩散无免疫无超敏反应中，主要引起食物中毒。是引起气性坏疽的病原菌，广泛存在于自然界及人和动物肠道中印尼苏拉威西岛（O1群，埃尔托生物型）：致病物质、所致疾病及防治原则免疫功能低下者，如艾滋病或肿瘤患者，以及使用过免疫抑制剂者等。国内：发酵豆制品占80%，发酵面制品占10%G—弧菌，弧形或逗点形，单鞭毛，穿梭样运动，鱼群状排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞（3）蜡质D（分枝菌酸+肽糖脂）：引起迟发型超敏反应“红、馋、懒、顽、变”运动神经末梢麻痹：眼睑下垂，咀嚼困难，呼吸困难与衰竭。怕干——干燥时易死亡，水环境中可存活两周（水源性传播，水性爆发）结果：红肿硬结＞5mm，阳性（≥15mm，强阳性）红肿硬结＜5mm，阴性意义阳性：过去感染过/BCG接种成功，有免疫力强阳性：可能有活动性结核病阴性：

未感染过结核分枝杆菌/未接种BCG；感染初期；严重结核患者；免疫功能低下者，如艾滋病或肿瘤患者，以及使用过免疫抑制剂者等。

四、微生物检查与防治

微生物学检查直接涂片染色观察，菌数少时需浓缩集菌分离培养动物试验快速诊断防治应用卡介苗预防接种治疗原则：早期、足量、长期、联合用