生物安全培训试题实用文档

检验科生物安全培训考核试题姓名：（职务/职称：）得分：一、填空题（2分/空）共计30分1.运送医疗废物应当使用防渗漏、防遗撒、无锐利边角、易于装卸和清洁的专用运送工具。2.在盛装医疗废物前，应当对医疗废物包装物或者容器进行认真检查，确保无破损、渗漏和其他缺陷。3.Ⅰ级生物安全柜至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，安全柜上部为观察窗，下部为操作窗口，工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证试验对象不受污染。4.三级和四级生物安全防护实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关检测，以后定期复检。5.根据《医疗废物管理条例》，卫生部将医疗废物分为感染性废物、病理性废物、损伤性废物、药物性废物、化学性废物。二、选择题（单项）每题4分，共计20分1、高致病性病原微生物是指（）A、第一类病原微生物B、第二类病原微生物C、第三类病原微生物D、第四类病原微生物2、运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当由不少于（）的专人护送，并采取相应的防护措施。A、1人B、2人C、3人D、4人3、三级、四级实验室应当通过实验室国家认可，颁发相应级别的生物安全实验室证书，证书有效期为（）年。A、3年B、4年C、5年D、6年4、从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有（）以上的工作人员共同进行。A、1名B、2名C、3名D、4名5、实验室从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验档案保存期，不得少于（）年。A、10B、20C、30D、40答案：1、AB2、B3、C4、B5、B三、问答题（每题10分，共计50分）1、何为消毒杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。2、何为灭菌杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。3、影响化学消毒剂消毒效果的因素（１）消毒剂的浓度与作用时间；（２）环境温度与相对湿度；（３）pＨ值；（４）有机物；（５）表面活性剂和金属离子；（６）微生物的数量。4、影响消毒灭菌效果的因素（1）生物膜：细菌可粘附于利于生长的物体表面形成生物膜。生物膜中细菌比浮生菌对抗药物的敏感性降低。（2）微生物的数量和环境（3）温度：一般来说，温度升高消毒因子的杀菌能力增强，杀菌速度加快（4）湿度：相对湿度最适宜时才能发挥消毒的最佳杀菌作用（5）酸碱度：含氯消毒剂在酸性条件下杀菌作用明显高于碱性。戊二醛在酸性条件下，大部呈单体状态，当pＨ为６时，单体开始出现聚合倾向，当pＨ为９时，这种聚合体作用达到最快，失去杀菌作用，但是，戊二醛在pＨ７.5—8.3时杀灭芽胞作用最强。（6）有机物：对消毒效果有双重影响，一是保护微生物免受理化因子的作用，二是消耗消毒剂（7）化学拮抗（中和）作用。5、空气消毒应注意的事项（１）空气的相对湿度，有利于消毒剂与带菌颗粒接触；（２）保持室内密闭，消毒后通风；（３）物理法消毒，要注意消毒器放的位置，有利于空气循环通过消毒器，没有死角；（４）通过消毒器的风量，应是室内体积的８－１１倍；（５）仔细阅读产品说明书，在有效空间体积内使用；（６）进行空气消毒同时，应湿式打扫地面、物品表面。检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共20分）1．下列不属于实验室一级防护屏障的是:

(D)

A生物安全柜

B防护服

C口罩

D缓冲间2．下列哪项措施不是减少气溶胶产生的有效方法：

（B）

A规范操作

B戴眼罩

C加强人员培训

D改进操作技术3．运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本须有不少于2人护送，并采取相应的防护措施，以下哪种运输方式目前是不允许的（A

）

A城市铁路

B飞机

C专车

D轮船4．国务院颁布《病原微生物实验室生物安全管理条例》是建立实验室生物安全管理体系所依据的主要法规，该法规是何时公布的？（B

）

A2004年12月1日

B2004年11月12日

C2005年1月1日

D2005年6月1日二、问答题（每题20分，共计80分）（1）BSL-2实验室生物安全设备有哪些，有哪些使用的基本要求？

1、生物安全柜，放置在人员走动少，离门较远的位置，与墙保持30cm。

2、高压蒸汽灭菌器，按期检查验证。3、洗眼器，靠近出口处。（2）进入BSL-2实验室应该如何做好个人防护？

1、应穿工作服，外加防护服

2、戴口罩、帽子，戴一次性手套，不得清洗后再次使用。

3、微生物操作在生物安全柜外面时应该有防护目镜、面罩、个体呼吸保护用品等。（3）实验室的废弃物分类？感染性废物病理性废物损伤性废物药物性废物化学性废物临床实验室的废弃物主要是感染性废物、损伤性废物和化学性废物。（4）真菌感染的原因？主要由于操作不当引起真菌的平皿和试管等器材未及时处理实验台或净化台不及时消毒处理意外事故造成实验室污染打破容有活真菌的培养皿、试管真菌很容易在空气中传播影响整个实验室污染制备环境、采血器材、培养基、细胞培养瓶检测结果不准确或制备环境不合格检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共25分）1．PCR实验室要求严格分区，一般分为以下四区

（B）

A

主实验区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区

B

试剂准备区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区

C

主实验区、样本置备区、产物扩增区、试剂准备区

D

主实验区、试剂准备区、产物扩增区、产物分析区2．甲类传染病的霍乱进行大量活菌的实验操作应该在哪种级别的实验室？（B）

A

BSL-1

B

BSL-2

C

BSL-3

D

BSL-43．生物安全柜操作时废物袋及盛放废弃吸管的容器放置要求不正确的（B

）

A

废物袋及盛放废弃吸管的容器必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外

B

因其体积大的放在生物安全柜一侧就可以

C

污染的吸管、容器等应先在放于安全柜中装有消毒液的容器中消毒1h以上，方可处理

D

消毒液后的废弃物方可转人医疗废物专用垃圾袋中进行高压灭菌等处理4．避免感染性物质扩散实验操作注意点

（

D）

A

微生物接种环直径应为2～3mm并且完全闭合，柄的长度不应超过6cm

B

应该使用密闭的微型电加热灭菌接种环,最好使用一次性的、无需灭菌的接种环

C

小心操作干燥的痰标本，以免产生气溶胶

D

以上都是二、问答题（每题20分，共计80分）（1）病原微生物根据危害不同分为几类，分类的主要依据。

可以分为4类

第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。

第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。

第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。

第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。（2）感染性材料洒溢处理的一般原则？

1、戴手套和防护服

2、用布活纸巾覆盖

3、倒消毒剂

4、消毒，由外向中心，适当时间后处理

5、再次消毒污染材料放置在废弃物处理容器中，并通知有关部门。（3）检验科HBV感染的可能途径？离心加样3、洗涤HBV阳性标本易溢出污染工作仪器、台面、器物及其周围环境，检验人员经常接触标本及工作器械，接触感染是实验室感染HBV的主要途径（4）实验室感染的控制如何实现？建立控制实验室感染的管理制度重视专业知识教育与更新加强消毒的质量的他方与己方监测加强仪器设备的消毒保持台面清洁检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共20分）1．生物安全柜在使用前需要检查正常指标，不包括（

A）

A噪声

B气流量

C负压在正常范围

D风速2．微生物对消毒因子的抗力从高到低的顺序（

B）

A细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒

B细菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒

C细菌芽孢、分枝杆菌、真菌孢子、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒

D真菌孢子、细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒3．干热灭菌效果监测应采用（B

）作生物指示物

A嗜热脂肪杆菌芽孢

B枯草杆菌黑色变种芽孢

C短小芽孢杆菌

D粪链球菌4．一本实验原始记录本的封面被细菌污染，适宜的消毒方法是：（D）

A干烤

B高压蒸汽灭菌法

C

75%酒精浸泡

D紫外线照射二、问答题（每题16分，共计80分）1、什么是HIV职业暴露？HIV职业暴露是工作人员，如实验室技术人员、医生、护士、护理员、警察、监狱管理人员等，在从事艾滋病防治工作中，意外地被HIV感染者或艾滋病人的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃肠道粘膜，或被含有HIV的血液、体液污染了的针头及其他税器刺破皮肤，而导致有被HIV感染可能性的情况。2、职业暴露的主要方式？（1）皮肤针刺伤或锐器切割伤；（2）粘膜或破损皮肤（如皲裂、皮肤炎症等）接触感染性材料；（2）皮肤虽然完整无破损，但大面积或长时间（几分钟或更长）接触感染性材料3、生物安全的概念？是指防范由现代生物技术的开发和应用所产生的负面影响即对生物多样性，生态环境和人体健康可能构成的危险或潜在危险。4、实验室污水如何处理？1.实验室污水须经无害化处理后排放2.血细胞仪和尿沉渣仪等用桶存放的废水，先用有效氯处理后倒入下水池3.全自动生化仪的废水可直接通过管道入医院废水处理池5、菌(毒)种和生物样本怎样保存？1.专人负责菌(毒)种和生物样本的保藏2.用可上锁的冰箱、双人双锁，或冰箱无锁，储藏室门双人双锁3.要有菌种名录清单，有销毁记录检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共20分）1．脱卸个人防护装备的顺序是（A）

A

外层手套→防护眼镜→防护服→口罩帽子→内层手套

B

防护眼镜→外层手套→口罩帽子→防护服→内层手套

C

防护服→防护眼镜→口罩帽子→外层手套→内层手套

D

口罩帽子→外层手套→防护眼镜→内层手套→防护服2．二级生物安全实验室硬件设施方面必须具备的条件（D）

A送排风系统

B三区两缓布局

C

UPS电源

D自动闭门系统3．生物安全柜内少量洒溢，没有造成严重后果属于

（

B

）

A

严重差错

B一般差错

C一般实验室感染事故

D严重实验室感染事4.全自动高压灭菌器的使用哪项是正确的（

B）

A

同类物品装放一起

B

液体和固体物品分开存放

C

敷料与器械同时灭菌时，应将敷料放在下层

D

常用各种物品的灭菌时间(110-121℃)20-30min二、问答题（每题16分，共计80分）1、什造成职业暴露的原因及风险因素？（1）.防护意识淡漠（2）.手卫生不规范（3）.安全注射操作不规范（4）.医疗废物处置不当2、手套损坏、污染（脱手套流程）？（1）.用一手捏起另一只手套近手腕处的外缘（2）.将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内（3）.用戴着手套的手拿住该手套（4）.用脱去手套的手指插入另一手套腕部内面（5）.脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状.丢弃在高温消毒袋中待消毒处理。（注意）以上操作要远离面部。3.生物样本的处理方法？1.弃置的菌种、生物样本、培养物和被污染的废弃物应在实验室同一建筑内消毒灭菌，达到生物安全后再按感染性废弃物收集处理2.微生物标本、废弃物先集中在高压蒸汽灭菌器内消毒灭菌后再送出实验室，有记录3.带盖的血液标本和未高压的废弃物应置于专用的硬盒外包装容器送医疗废弃处置单位集中处理4、实验室内如何消毒？1.实验室内应有空气和物体表面消毒的设备和设施2.空气用紫外灯或移动的紫外线车3.操作台表面用巴氏或含氯消毒液消毒（清洁工人）5、怎样处理利器？1.实验室使用的利器应盛放在专用的容器内2.一次性注射器针头、安培瓶、微量管使用后及时放入利器盒检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共20分）1．国务院颁布《病原微生物实验室生物安全管理条例》是建立实验室生物安全管理体系所依据的主要法规，该法规是何时公布的？（B

）

A2004年12月1日

B2004年11月12日

C2005年1月1日

D2005年6月1日2．干热灭菌效果监测应采用（B

）作生物指示物

A嗜热脂肪杆菌芽孢

B枯草杆菌黑色变种芽孢

C短小芽孢杆菌

D粪链球菌3．甲类传染病的霍乱进行大量活菌的实验操作应该在哪种级别的实验室？（B）

A

BSL-1

B

BSL-2

C

BSL-3

D

BSL-44．下列哪种不是实验室暴露的常见原因

（

C

）

A因个人防护缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的气溶胶

B被污染的注射器或实验器皿、玻璃制品等锐器刺伤、扎伤、割伤

C在生物安全柜内加样、移液等操作过程中，感染性材料洒溢

D在离心感染性材料及致病因子过程中发生离心管破裂、致病因子外溢导致实验人员暴露二、问答题（每题16分，共计80分）1、衣物被污染后的处理流程？尽快脱掉最外层防护服，并注意防止感染性物质进一步扩散将已污染的防护服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌脱掉手套，到污染区出口处洗手更换防护服和手套必要时对发生污染及脱防护服的地方进行消毒处理（如果内衣被污染，应立即脱掉已污染的衣物，消毒处理）2、刺伤、切割伤或擦伤的应急处理？保持镇静，立即停止实验，脱掉手套。用清水和肥皂水清洗伤口。尽量挤出伤口处的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗伤口，适当的包扎。及时就医，告知医生受伤原因及可能的微生物污染，必要时要进行医学处理。向实验室生物安全小组报告，进行事故记录。3、进入实验室如何执行登记制度？1.实验室应建立人员进出登记制度，非实验室人员进入实验室，必须要遵守相关的生物安全规章制度2.要有准入规定3.本科人员由科主任签字准入4.进修实习人员经培训后由主任或组长同意5.非实验室人员进入要有组长同意并有记录4、生物安全柜内为何不能明火？1.生物安全柜内不能使用明火2.酒精灯火焰会影响安全柜内的气流走向3.明火的长期高温会破坏安全柜内的过滤膜4.可使用电热消毒器或一次性接种环5、污染报告单如何处理？1.在污染区出具的检验报告，需经消毒处理2.门诊查检处集中打印报告3.病区检验结果网上传输4.病区也可按科室集中打印5.凡是手写的非打印原始报告单，可用微波炉消毒后发出.检验科生物安全考核试题答案姓名：（职务/职称：）得分：一、单选题（每题5分，共20分）1．国务院颁布《病原微生物实验室生物安全管理条例》是建立实验室生物安全管理体系所依据的主要法规，该法规是何时公布的？（B

）

A2004年12月1日

B2004年11月12日

C2005年1月1日

D2005年6月1日2．干热灭菌效果监测应采用（B

）作生物指示物

A嗜热脂肪杆菌芽孢

B枯草杆菌黑色变种芽孢

C短小芽孢杆菌

D粪链球菌3．甲类传染病的霍乱进行大量活菌的实验操作应该在哪种级别的实验室？（B）

A

BSL-1

B

BSL-2

C

BSL-3

D

BSL-44．下列哪种不是实验室暴露的常见原因

（

C

）

A因个人防护缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的气溶胶

B被污染的注射器或实验器皿、玻璃制品等锐器刺伤、扎伤、割伤

C在生物安全柜内加样、移液等操作过程中，感染性材料洒溢

D在离心感染性材料及致病因子过程中发生离心管破裂、致病因子外溢导致实验人员暴露二、问答题（每题16分，共计80分）1、衣物被污染后的处理流程？尽快脱掉最外层防护服，并注意防止感染性物质进一步扩散将已污染的防护服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌脱掉手套，到污染区出口处洗手更换防护服和手套必要时对发生污染及脱防护服的地方进行消毒处理（如果内衣被污染，应立即脱掉已污染的衣物，消毒处理）2、刺伤、切割伤或擦伤的应急处理？保持镇静，立即停止实验，脱掉手套。用清水和肥皂水清洗伤口。尽量挤出伤口处的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒精擦洗伤口，适当的包扎。及时就医，告知医生受伤原因及可能的微生物污染，必要时要进行医学处理。向实验室生物安全小组报告，进行事故记录。3、进入实验室如何执行登记制度？1.实验室应建立人员进出登记制度，非实验室人员进入实验室，必须要遵守相关的生物安全规章制度2.要有准入规定3.本科人员由科主任签字准入4.进修实习人员经培训后由主任或组长同意5.非实验室人员进入要有组长同意并有记录4、生物安全柜内为何不能明火？1.生物安全柜内不能使用明火2.酒精灯火焰会影响安全柜内的气流走向3.明火的长期高温会破坏安全柜内的过滤膜4.可使用电热消毒器或一次性接种环5、污染报告单如何处理？1.在污染区出具的检验报告，需经消毒处理2.门诊查检处集中打印报告3.病区检验结果网上传输4.病区也可按科室集中打印5.凡是手写的非打印原始报告单，可用微波炉消毒后发出生物实验室安全培训试题选择题1、乙型肝炎病毒，按危害程度分类，属于第几类病原微生物？()A、第一类B、第二类C、第三类D、第四类2、结核分枝杆菌，按危害程度分类，属于第几类病原微生物？()A、第一类B、第二类C、第三类D、第四类3、根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将生物安全的防护水平分为四级，哪一级的防护水平最低？()A、=1\*ROMANI级B、=2\*ROMANII级C、=3\*ROMANIII级D、=4\*ROMANIV级4、下列不属于实验室一级防护屏障的是:

()A、生物安全柜

B、防护服C、口罩

D、缓冲间5、下列哪项措施不是减少气溶胶产生的有效方法：

（）A、规范操作

B、戴眼罩C、加强人员培训

D、改进操作技术6、二级生物安全实验室必须配备的设备是

(

)A、生物安全柜、培养箱

B、生物安全柜和水浴箱

C、生物安全柜和高压灭菌器

D、离心机和高压灭菌器7、PCR实验室要求严格分区，一般分为以下四区

（）A、主实验区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区B、试剂准备区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区

C、主实验区、样本置备区、产物扩增区、试剂准备区

D、主实验区、试剂准备区、产物扩增区、产物分析区8、作为甲类传染病的霍乱进行大量活菌的实验操作应该在哪种级别的实验室？（）A、BSL-1

B、BSL-2

C、BSL-3

D、BSL-49、实验记录本的封面被细菌污染，适宜的消毒方法是：

（）A、干烤

B、高压蒸汽灭菌法

C、75%酒精浸泡

D、紫外线照射10、脱卸个人防护装备的顺序是（）A、外层手套→防护眼镜→防护服→口罩帽子→内层手套

B、防护眼镜→外层手套→口罩帽子→防护服→内层手套

C、防护服→防护眼镜→口罩帽子→外层手套→内层手套D、口罩帽子→外层手套→防护眼镜→内层手套→防护服判断题生物安全Ⅱ级实验室的建造、使用和管理无需参照生物安全Ⅰ级实验室的有关要求。（）在生物安全Ⅱ级实验室中工作人员应当穿工作服，戴防护眼镜。（√）任何单位和个人都有责任对违反生物安全规定的问题提出批评和建议。（）生物安全培训应当从常识教育入手，引导所属人员增强生物安全意识。（√）危险分组不到Ⅱ的微生物，无须按照Ⅱ级生物安全的要求处理。（）我国以行业标准及国家标准形式颁布的生物安全实验室准则是对从事微生物学、生物医学工作的实验室生物安全方面的最低要求。（√）生物安全Ⅱ级实验室的门要求带锁、可自动关闭，必须还具有可视窗。（√）生物安全Ⅱ级实验室内必须配备高压蒸汽灭菌器。（）生物安全Ⅱ级实验室必须设置通风系统，保证空气不向内循环流动。（）10、动物实验室的门必须能够自动锁闭。（√）填空题1、运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当通过路运输。2、生物因子是指一切和。3、病原体指的是能够引发人和动物、植物疾病的。4、是指通常以滤除大于0.3微米微粒为目的，滤除效率符合相关要求的过滤器。其名称的英文缩写是。5、依据实验室的安全设计要求，一般可将实验室分为三个区域，即、和。6、危险标志中常见的“Biohazard”一词所对应的中文是或。7、生物安全实验室防护水平可分为4级，级防护水平要求最低，级防护水平要求最高。根据实验室所操作的生物因子的危害程度，一般生物安全实验室可分为、、、四级，8、在存在生物危险因素的场所中，作业人员按照规定配备必要的。问答题1、结合自己实验室情况，分析有哪些生物安全风险？如何控制这些风险？2、比较通风橱、超净工作台和生物安全柜的异同。3、结合自己实验室情况，简述实验室垃圾如何处理？4、结合自己实验室情况，说说有哪些生物试剂你认为是需要注意的？怎样操作算安全？5、简述BSL-2实验室对个人防护的要求。参考答案选择题1.C2.B3.A4.D5.B6.C7.B8.B9.C10.A判断题1.×2.√3.×4.√5.×6.√7.√8.×9.×10.√填空题1.陆2.微生物、生物活性物质3.生物因子4.高效空气过滤器、HEPA5.清洁区、半污染区、污染区6.生物危害、生物危险7.I、IV、BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-48.个人防护装备问答题见培训课件，答案略。2.比较通风橱、超净工作台和生物安全柜的异同。3.结合自己实验室情况，简述实验室垃圾如何处理？4.结合自己实验室情况，说说有哪些生物试剂你认为是需要注意的？怎样操作算安全？操作注意个人防护5.简述BSL-2实验室对个人防护的要求。生物安全技术试题一、填空题(每空0.5分，共40分)1、我国一直以来高度重视实验室生物安全工作，国家陆续颁布了一系列法律、法规和标准，包括______________________________________________、___________________________________________等。各种菌（毒）株所需实验室的生物安全级别参见卫生部__________________________________有关规定。2、尽管生物安全实验室内存在各种潜在感染的风险，但是随着人们认识的深入及实验室设备设施条件的改善，防范感染事件发生的能力不断得到提高。通过开展______________________________、确定________________________和______________________、制定____________________和__________________等措施，将会减少或避免实验室感染事件的发生。3、二级实验室适用于进行我国危害程度分类为_____________和_____________________的病原微生物检测实验活动。4、二级实验室在一级实验室的基础上，增加了_______________、_____________________等安全设备。5、依据现行国家标准，三级实验室由_____________、_____________和_____________三部分组成。整个平面布局为_____________→_____________→_____________→_____________→_____________。6、液体进行压力蒸汽灭菌时，液体体积不得超过__________________________。应该__________________________，保证蒸汽能够进入。7、BSL-2实验室操作规范：(1)人员进入二级实验室，需经过__________________________，并经_____________________同意，方可进入；(2)进入实验室后，应做好_____________、___________等记录；(3)实验室工作人员根据工作内容，在实验室生物风险评估的基础上，选择并穿戴好___________________；通常情况下，应穿上鞋套，穿防护服或反穿式隔离服，戴好帽子、口罩、手套，必要时根据操作内容可戴上防护眼镜；戴帽子时，不应___________________；(4)二级实验室内，各种可能产生___________的操作，应在生物安全柜内或其他物理保护装置中进行；(5)将实验所需物品放入生物安全柜，按照实验步骤进行操作；如果是两个人进行操作，相互应配合，但不能影响_____________________________；(6)实验产生的废物，应该放在生物安全柜内的废物盒里；(7)实验结束后，首先撤出主要实验材料，随后再撤出剩余实验用品，实验废物应放在废物处理桶中并在二级实验室内进行灭菌；(8)撤离结束后，对安全柜内所用的物品进行消毒处理，实验废物放在废物桶中，还要对生物安全柜进行消毒处理；(9)实验产生的废物放在____________________中进行灭菌；(10)整个实验结束后，在实验室出口处脱去个人防护装备，脱去手套，脱去防护服，脱下防护眼镜、口罩，摘掉帽子，最后脱去鞋套；并仔细_______________；(11)在离开二级实验室之前，需要做好________________________________。8、感染性物质的公路运输，需要申请单位____________________直接送往目的地。注意应__________________________，防止运输过程中感染性物质泄漏，以便紧急处理。9、消毒和灭菌方法分为物理和化学两种方法。常用的物理灭菌方法有________________、__________________、______________________________等；化学法主要以化学消毒剂为主，根据消毒剂对微生物的杀灭种类和效果，可分为高效、中效和低效消毒剂，高效消毒剂包括含氯消毒剂（如次氯酸钠）、__________、____________________、戊二醛，中效消毒剂包括________、________，低效消毒剂有氯己定。使用消毒剂时，注意__________________________，注意配制的期限；必要时需要定期更换、交替使用，避免微生物出现________________。10、国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物_______________，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成_______________，传播风险_________，实验室感染后很少引起_______________，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。_______________、_______________病原微生物统称为高致病性病原微生物。11、请填写以下微生物的危害程度分类及各种实验活动所需生物安全实验室级别。种类中文名危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别病毒培养或大量活菌操作未经培养的感染材料的操作或样本检测灭活材料的操作无感染性材料的操作病毒埃博拉病毒第一类BSL-4BSL-3BSL-2BSL-1SARS冠状病毒BSL-3BSL-3BSL-2艾滋病毒（I型和II型）口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳头瘤病毒BSL-2甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒细菌结核分枝杆菌BSL-3鲍曼不动杆菌BSL-2嗜水气单胞菌空肠弯曲菌肺炎衣原体流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌嗜肺军团菌单核细胞增生李斯特菌鸟分枝杆菌龟分枝杆菌肺炎支原体铜绿假单胞菌鼠伤寒沙门菌金黄色葡萄球菌肺炎链球菌创伤弧菌小肠结肠炎耶尔森菌12、试剂技术部样品制备实验室最高只能进行可能含有___________________________________________微生物的________________________________（此操作需要BSL-3实验室的SARS冠状病毒除外）。13、出现下列情况之一，实验人员进入实验室工作区需经项目负责人、部门负责人审批：(1)_______________________________；(2)________________________；(3)____________________________________________________；(4)正在使用免疫抑制剂或免疫耐受；(5)妊娠期。14、外部门或外单位人员进入试剂技术部样品制备实验室学习、工作等，该人员需接受相关的________________________，应经过__________________（附件1）（其中规定申请进入的人员须已阅读试剂技术部样品制备实验室______________________________和试剂技术部样品制备实验室__________________），并遵守试剂技术部样品制备实验室管理制度。15、实验人员在第一更衣室进行个人防护，进入实验室前和实验操作完毕后需填写________________________________________（附件2）（具体包括：________、________、________________、________________及________________），其中________________一项需详细记录。二、问答题（共60分）1、二级实验室的基本结构？（8分）2、BSL-1、2、3三类实验室的区别？（6分）3、生物安全柜的作用和防护原理？（5分）答：4、实验室意外事件处理原则？实验室地面被污染如何处理？（6分）5、生物安全柜的操作流程和注意事项？（11分）6、进入试剂技术部样品制备实验室，需要穿戴哪些个人防护装备？穿戴和解除装备的流程分别是怎样的？（10分）7、皮肤被刺伤如何处理？（5分）8、实验完毕后的清场和操作？（4分）9、离心管破裂应如何处理？（5分）答案：一、填空题(每空0.5分，共40分)1、我国一直以来高度重视实验室生物安全工作，国家陆续颁布了一系列法律、法规和标准，包括《病原微生物实验室生物安全管理条例》、国家标准GB19489《实验室生物安全通用要求》等。各种菌（毒）株所需实验室的生物安全级别参见卫生部《人间传染的病原微生物名录》有关规定。2、尽管生物安全实验室内存在各种潜在感染的风险，但是随着人们认识的深入及实验室设备设施条件的改善，防范感染事件发生的能力不断得到提高。通过开展实验室生物安全风险评估、确定实验室生物安全级别和个人防护装备、制定相应的标准操作规程和应急预案等措施，将会减少或避免实验室感染事件的发生。3、二级实验室适用于进行我国危害程度分类为第三类和少量第二类的病原微生物检测实验活动。4、二级实验室在一级实验室的基础上，增加了生物安全柜、压力蒸汽灭菌器等安全设备。5、依据现行国家标准，三级实验室由清洁区、半污染区和污染区三部分组成。整个平面布局为清洁区→缓冲区I→半污染区→缓冲区II→污染区。6、液体进行压力蒸汽灭菌时，液体体积不得超过容器体积的2/3。应该把盖子旋松，保证蒸汽能够进入。7、BSL-2实验室操作规范：(1)人员进入二级实验室，需经过相关生物安全培训，并经实验室负责人同意，方可进入；(2)进入实验室后，应做好进入时间、姓名等记录；(3)实验室工作人员根据工作内容，在实验室生物风险评估的基础上，选择并穿戴好个人防护装备；通常情况下，应穿上鞋套，穿防护服或反穿式隔离服，戴好帽子、口罩、手套，必要时根据操作内容可戴上防护眼镜；戴帽子时，不应把头发漏在外面；(4)二级实验室内，各种可能产生气溶胶的操作，应在生物安全柜内或其他物理保护装置中进行；(5)将实验所需物品放入生物安全柜，按照实验步骤进行操作；如果是两个人进行操作，相互应配合，但不能影响生物安全柜内气流；(6)实验产生的废物，应该放在生物安全柜内的废物盒里；(7)实验结束后，首先撤出主要实验材料，随后再撤出剩余实验用品，实验废物应放在废物处理桶中并在二级实验室内进行灭菌；(8)撤离结束后，对安全柜内所用的物品进行消毒处理，实验废物放在废物桶中，还要对生物安全柜进行消毒处理；(9)实验产生的废物放在灭菌器中进行灭菌；(10)整个实验结束后，在实验室出口处脱去个人防护装备，脱去手套，脱去防护服，脱下防护眼镜、口罩，摘掉帽子，最后脱去鞋套；并仔细清洗手部；(11)在离开二级实验室之前，需要做好相关实验室使用的记录。8、感染性物质的公路运输，需要申请单位两人专人专车直接送往目的地。注意应带上个人防护用品，防止运输过程中感染性物质泄漏，以便紧急处理。9、消毒和灭菌方法分为物理和化学两种方法。常用的物理灭菌方法有紫外线消毒、压力蒸汽灭菌、高效过滤器（HEPA）过滤除菌等；化学法主要以化学消毒剂为主，根据消毒剂对微生物的杀灭种类和效果，可分为高效、中效和低效消毒剂，高效消毒剂包括含氯消毒剂（如次氯酸钠）、甲醛、过氧乙酸、戊二醛，中效消毒剂包括乙醇、碘氟，低效消毒剂有氯己定。使用消毒剂时，注意在有效期内使用，注意配制的期限；必要时需要定期更换、交替使用，避免微生物出现抗药性。10、国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。11、请填写以下微生物的危害程度分类及各种实验活动所需生物安全实验室级别。种类中文名危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别病毒培养或大量活菌操作未经培养的感染材料的操作或样本检测灭活材料的操作无感染性材料的操作病毒埃博拉病毒第一类BSL-4BSL-3BSL-2BSL-1SARS冠状病毒第二类BSL-3BSL-3BSL-2BSL-1艾滋病毒（I型和II型）BSL-2BSL-1口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳头瘤病毒第三类BSL-2BSL-2BSL-1BSL-1甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒细菌结核分枝杆菌第二类BSL-3BSL-2BSL-1鲍曼不动杆菌第三类BSL-2BSL-2BSL-1嗜水气单胞菌空肠弯曲菌肺炎衣原体流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌嗜肺军团菌单核细胞增生李斯特菌鸟分枝杆菌龟分枝杆菌肺炎支原体铜绿假单胞菌鼠伤寒沙门菌金黄色葡萄球菌肺炎链球菌创伤弧菌小肠结肠炎耶尔森菌12、试剂技术部样品制备实验室最高只能进行可能含有我国微生物危害程度第二类的微生物的未经培养的样本的检测（此操作需要BSL-3实验室的SARS冠状病毒除外）。13、出现下列情况之一，实验人员进入实验室工作区需经项目负责人、部门负责人审批：(1)身体出现开放性损伤；(2)患发热性疾病；(3)呼吸道感染或其它导致抵抗力下降的情况；(4)正在使用免疫抑制剂或免疫耐受；(5)妊娠期。14、外部门或外单位人员进入试剂技术部样品制备实验室学习、工作等，该人员需接受相关的生物安全培训，应经过审批流程（附件1）（其中规定申请进入的人员须已阅读试剂技术部样品制备实验室实验人员个人防护和试剂技术部样品制备实验室操作规范），并遵守试剂技术部样品制备实验室管理制度。15、实验人员在第一更衣室进行个人防护，进入实验室前和实验操作完毕后需填写《样品制备实验室出入记录》（附件2）（具体包括：日期、姓名、进入时间、离开时间及工作内容），其中“工作内容”一项需详细记录。二、问答题（共60分）1、二级实验室的基本结构？（4分，第一句0.5分，后面每条0.5分）答：二级实验室除满足一级实验室的设计要求以外，增加以下内容：(1)实验室的门上标有国际通用的生物危害警告标志；(2)实验室的门带锁，能自动关闭，有可视窗；(3)一般不需要特殊的通风设备，但可以设置有通风系统；若无，窗户应该能够打开，并安装有纱窗；(4)实验室内配备有II级生物安全柜，安装在离门和空调送风口较远的地方；(5)实验室配备有压力蒸汽灭菌器；(6)实验室有可靠的电力供应和应急照明，可设有紫外灯；(7)在靠近实验室出口的地方设有洗手池。2、BSL-1、2、3三类实验室的区别？（3分，每条1分）答：由于三类实验室操作的微生物危害程度不同，因此三类实验室在布局和防护屏障、设施、设备要求上不同。一级实验室不需要特殊的防护屏障；二级实验室在一级实验室的基础上增加了生物安全柜和压力蒸汽灭菌器两个重要的设备；三级实验室自成隔离区或独立建筑物，有明确的功能分区，具有独立的送、排风系统，气流由清洁区向污染区定向流动等。3、生物安全柜的作用和防护原理？（5分）答：作用：（2分）生物安全柜是一个负压过滤排风柜，能迅速把产生的气溶胶过滤除掉，因此在其中操作原代培养物、菌株、毒株、诊断性标本等感染性物质时，可以保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，避免暴露于操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物。防护原理：（3分）(1)从安全柜排出的空气经过HEPA空气过滤器过滤释放，保护外部环境；(2)在安全柜内形成的负压和气幕，可以防止气溶胶外泄，保护操作者；(3)进入安全柜工作区的空气经过HEPA空气过滤器过滤，在安全柜内形成百级洁净度的环境，保护操作对象。4、实验室意外事件处理原则？实验室地面被污染如何处理？（6分，原则2分，处理4分）答：实验室如果发生意外事故，原则是：立即停止工作；在加强个人防护条件下进行消毒处理，并对当事人进行医学观察；按照程序向负责人报告发生的事件。如果感染性材料洒溢到实验室地面上，应立即用布或纸巾覆盖所有可能污染处，然后在