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文档简介

第二章基因概念的演变与发展1、名词解释C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。DNA变性:在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,DNA双螺旋结构松散,变成单链的过程。DNA的Tm:DNA的Tm——熔链温度等于OD增加值的中点温度(一般为85-95℃)或DNA双螺旋结构失去一半时的温度Tm值计算公式:Tm=69.3+0.41(G+C)%GC%=(Tm-69.3)×2.44DNA复性:DNA水溶液加热变性时,双螺旋两条链分开;如果缓慢冷却至低于Tm值25股螺旋过程。断裂(间隔)基因:真核生物的结构基因是由若干外显子和内含子序列相间隔排列组成。2、简答题DNA是否是唯一的遗传物质?答:否。RNA一类能侵染动物并在宿主细胞内复制的小分子的无免疫性疏水蛋白质。请问哪些条件可促使DNA退火)?变性1,加热变性2,极端酸碱变性 3,变型剂处复性:1、温度和时间。DNA复性时,温度不宜过低,Tm-25℃是比较合适的复性温度,而且时间也不能过短,时间太短DNA复性效果不明显。2、DNA性速度越快。3、DNADNA4、DNA序列的复杂性。片段内的重复序列多,则容易形成互补区,因而复性较快。5、反应溶液中的离子强度。维持溶液中一定的离子强度,消除磷酸基负电荷造成的斥力,可加快复性速度。原核生物和真核生物基因和基因组结构特点比较。原核生物基因结构:多顺反子,转录区序列区(5,-UTR;cDNA序列区-编码区;3,-UTR);mRNA5-,poly(A)尾巴。原核生物基因组 真核生物基因组特点 1)原核生物的基因组很小,大多只有一条染色体,且DNA含量少没有重复序列2)结构简练:存在转录单元:有重叠基因:

3×109bp存在大量的重复序列转录产物为单顺反子断裂基因,含有内含子有大量顺式作用元件DNA多态性具有端粒结构3) 义。重复基因:基因组中拷贝数不止一份的基因。意义:影响着生命的进化、遗传、变异;同时它对基因表达、转录调控、染色体的构建以及生理代谢都起着不可或缺的作用。断裂基因:真核生物的结构基因是由若干外显子和内含子序列相间隔排列组成。意义3.大生物体的遗传信息储量4.利用内含子进行代谢调节。跳跃基因:在基因组中可移动的一段DNA序列。意义:1.有利于基因组的进化。2.用于哺乳动物基因功能的研究。假基因意义重叠基因:不同的基因功能共用一段相同的NBA序列。意义b选择的适应性。3、论述题DNA模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?答Crick1953分子是由两条反向平行的多聚核苷酸链组成的,连酸骨架主链位于螺旋的外缘,A/T,G/C以氢键方式连接形成的碱基对堆积在螺旋内部,向右盘旋的B-双螺旋棒状实体。意义:标志着生物科学的发展进入了分子生物学阶段。DNA双螺旋结构的提出开始,便开启了分子生物学时代.分子生物学使生物大分子的研究进入一个新的阶段,使遗传的研究深入到分子层次,"生命之谜"被打开,人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径.在以后的近50年里,分子遗传学,分子免疫学,细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现,一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明,DNA重组技术更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景.在人类最终全面揭开生命奥秘的进程中,化学已经并将更进一步地为之提供理论指导和技术支持.第三章DNA的复制1、名词解释DNA保留复制:DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链DNA半不连续复制:前导链的连续复制和滞后链的不连续复制在生物界是有普遍性的,因而称之为DNA的半不连续复制。复制子:从复制原点到终点,组成一个复制单位。岗崎片段DNADNA短链称为冈崎片段。2,简答题DNA复制为何选择RNA作为引物?答:有两方面的原因。DNA3-OH3-OH3-OH的作用,而RNA3-OHRNA比较好。DNADNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNADNADNA复制的准确性。RNADNA聚RNA3'-OH端而DNA链的延伸阶段DNA复制起始过程如何,有哪些因子参与?答:a.20DnaAOriC49合;b.识别并使3个13碱基串联重复区DNA形成开环结构;c.DnaBDnaC的帮助下与未解链序列结合。每六个DnaB蛋白形成一DNADNASSBDNADnaB复制过程中,只有复制起始受细胞周期的严格调控因子:DnaA蛋白,DnaB蛋白,DnaC蛋白,DnaT蛋白,HU蛋白,旋转酶,ssB,RNA聚合酶。DNA5’末端短缩的解决办法有哪几种。答:1.DNARNA引物,并由该酶催5端短缩。2.在真核生物中端粒酶的作用4)原核生物DNA复制的形式有哪几类?()线性A双链的复制——在A末端形成发夹结构(2)DNA双链的复制——θ型复制。5)真核与原核复制的比较。答一)相同:1、基本机制相似。如半保留复制、半不连续复制。2所需酶相似。(二)区别:复制起始点复制起始点复制方向复制速度复制DNA的酶引物酶的结合情况真核生物多个双向较快不原核生物一个单向较慢是δ)(polⅢ)DNA聚合酶与解旋酶为什么核酸分子的复制均是从5’向3’进行的?答DNA3′—OH末端聚合dNTPDNA聚合酶只能以5′→3′方向聚合子代DNA链。第四章 RNA的转录1,名词解释转录单位——一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。转录起点——与新生RNA链第一个核甘酸相对应DNA链上的碱基。启动子——DNARNADNARNARNARNA2,简答题1、简述因子在转录起始中的作用可提高RNA(103),DNA104σ因子负责模板链的选择和转录的起始σ因子不参与转录延伸过程,在转录起始后RNADNARNA但不能在正确位置起始转录。σRNARNA8~92、简述原核生物基因启动子的结构1)转录起始点:多数情况下(>90%)CAT,A2)-10Pribnow结构特点:具保守序列TATAAT(T80A95T45A60A50T96,A.T解链。-35Sextamabox结构特点:具保守序列TTGACA(T82T84G78A65C54A45,与-10序列,相隔16-19bp。-10-35基序列并不重要DNA50150bp起始的频率。3、简述原核生物转录终止的两种机制不依赖ρ因子的终止7~20bpIRIR6-8URNARNApolRNApol6-8URNApolRNA-DNAU-ARNApol依赖ρ因子的终止子终止转录dnaρdna录。机制:rnaρrna5’端的某个可能有序列或二级结构特异性的位点上利用atp水解产生的能量沿着5’ 方向朝转录泡靠近,其运动速度可能比rna聚合酶移动的速度快些;当rna聚合酶移动到终止而暂停时,ρ因子到达rna的3’-OH端追上并取代了暂停在终止位点上的rna聚合酶,它所具有的rna-dna解旋酶活性使转录产物rna从模板dna上释放,随后,转录复合物解体,完成转录过程。、4、RNA聚合酶II的启动子有哪些基本元件,各元件的作用是什么?帽子位点(capsite:转录起始位点TATACAAT增强子:表明其作用具有细胞或组织特异性(调节蛋白。GC3、思考题:一个转录单元就是指一个基因,这种说法对吗?为什么?答DNADNARNA的区段。真核生物转录和原核生物转录的差异?答RNA必须经过加工,将内含子转RNA不需要剪切、拼接等加工过程。再有,原核生物基因的转录和翻译通常是在同一时间同一地点进行的,即在转录可见,真核生物基因的转录和翻译具有时间和空间上的分隔。上述真核生物基因转录和复制都是合成的过程,二者有何不同?答:转录转录模板原料以DNA的一条链或RNA为RNA四种核糖核苷酸RNA聚合酶,转录酶酶引物不需要复制DNA的两条链为模板,合成双链DNA四种脱氧核苷酸DNADNA连接酶需要RNA在生物进化中的地位?RNADNARNADNA分子,直接影响后代的基因型。RNARNARNA是功能分子,它在表达过程中起着信息提取和加工作用。内含子的“功能”及其在生物进化中的地位。答:由于内含子(intron)的进化目前还没有一致的观点,一般认为内含子组织特异性表达、蛋白质变异、基因转录等多种生物学过程。RNA聚合酶如何找到DNA上的一个特异性的启动子?答DNA不能在正确位置起始转录。RNARNA链合成8~9个碱基后释放。比较原核生物和真核生物mRNA的特征原核生物mRNA的特征半衰期短mRNAmRNAmRNAmRNA。AUGGUUUGpoly(A)结构。SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。AUG7~1216SrRNA端反向互补端无帽子poly(A)结构。SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。原核生物起始AUG7~1216SrRNA端反向互补。

真核生物mRNA的特征☆5’端存在“帽子”结构mRNApoly(A)尾巴(组蛋白除外)以单顺反子的形式存在AUGRNA要怎样才能变成有活性的RNA分子?答:真核生物的RNA5′苷化(加尾,内含子的剪切,编辑修饰和内部腺嘌呤甲基化等过程。原核生物没有内含子,所以不用内含子剪切。第五章蛋白质翻译1、名词解释:翻译mRNAtRNAmRNA密码序列转变为氨基酸序列,合成多肽的过程。多顺反子:原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA课编码几种功能相关的蛋白质。ORF的阅读框可编码完整的多肽链,其间不存在使翻译中断的终止密码子。反密码子:RNA3tRNA3mRNA上的密码子互补配对,因而叫反密码子。核糖体结合位点:是细胞mRNA的一个序列,它包括蛋白质合成起始期被30S亚基结合的一个起始密码子。2、思考题原核生物和真核生物的核糖体组成。答:1)9%,rRNARNA的80%以上,Euk中相对比例小些。49338×103~4.0×104之间。核糖体作为蛋白质的合成场所,具有哪些方面的功能?答:一是提供rRBA遗传密码的特点。()间断也无交叉。(2)密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并发现少数例外,如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。tRNAmRNA上的4)什么是SD序列?其功能是什么?答:SD序列是核糖体与mRNA结合序列,其功能是对翻译起到调控作用。核糖体有哪些活性中心?答:核糖体发挥生物学功能的5个活性位点①mRNA结合位点;②结合A位点(A位;③结合肽基A位点(P位;④空载A移出位点(E位;⑤形成肽键的位点(转肽酶中心)。此外,还有用于起始和延伸的各种蛋白质因子结合位点。tRNA答:1)组成:tRNA在蛋白质生物合成过程中起关键作用,称为第二遗传密码tRNA,4S,74~22tRNA的稀有碱基2)tRNA的空间结构:三叶草的二级结构①氨基酸接受臂:tRNA5’7bp3’XCCA序列,A功能:负责携带氨基酸TψC臂:特殊的碱基ψ(假尿嘧啶p茎环的配对,功能:负责和核糖体上的识别结合;③反密码子臂:5bp茎环的配对,反密码子,功能:负责对mRNA上的密码子的识别与配对。D环:茎区常为,含有特殊的碱基D(双氢尿嘧啶功能:起连接作用⑤额外环:可变性大,从4Nt到21Nt不等,功能:在tRNA三维结构中连接两个区域(DTψ受体臂。⑥含丰富的稀有碱基:约70余种,每个tRNA分子至少含有2个稀有碱基,最多有19个“LmRNA上。-tRNA:催化反应(2步:活化:氨基酸→氨基酰转移:氨基酰-AMP-E+tRNA→AA-tRNA+AMP+E能。起始因子延伸因子终止因子简要说明原核生物与真核生物的翻译过程的差别。核糖体核糖体数量起始tRNA真核80S原核70S8060启动tRNAmeteIFtRNA结合tRNAfmetIF三种,先与mRNA结合延伸因子 EF1,EF2 EF-TuEF-TsEF-G终止 RF RF1,RF2,RF3什么是信号肽?序列组成特点是什么?有什么功能?答:概念:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的末端氨基酸序列(N端。特点:位于起始密码子后的一段长度15~30个AA的序列。10-15个疏水氨基酸;1个或数个带正电荷的氨基酸;在其氨基酸往往带有很短的侧链(丙氨酸或甘氨酸。功能:信号肽的作用一般是帮助蛋白质穿膜用的,跟蛋白质的细胞定位有关系。什么是核定位序列?其主要功能是什么?答新运入核内,因此,为了核蛋白的重复定位,核定位序列一般不被切除.功能:它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。简述蛋白质生物合成的大体过程。答DNA经高尔基体加工成蛋白质。简述RNA答3在合成蛋白质时与核糖

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