免疫分型用于68例急性白血病的分型

免疫分型用于68例急性白血病的分型【摘要】为了评价免疫分型在急性白血病分型中的科学意义，应用形态学分型、直接免疫荧光标记流式细胞仪检测免疫分型对68例AL进行了分析。结果表明：形态学与免疫学检查符合率为%，有4例形态学误诊被免疫分型纠正；髓系中较特异抗原为CD13、CD33，AML-M3多为CD34低表达，HLA-DR阴性，AML-M4、M5易有CD14表达，髓系中易见淋系相关抗原表达，常见为CD7；淋系中亦可合并髓系抗原表达。结论：免疫分型可提高AL的诊断分型准确性，特殊类型AL如急性未分化性白血病、AML-M0等的诊断必须依赖免疫分型。

【关键词】急性白血病

ImmunologicClassificationUsedintypingof68CasesofAcuteLeukemias

AbstractToevaluatethesignificanceofimmunologicclassificationfortypingofacuteleukemia.68casesofALwereclassifiedmorphologicandimmunologictypings.Theresultsshowedthattheconsistencyratewas%betweenmorphologyandimmunology，and4morphologicmisdiagnosedcaseswerecorrectedbyimmunology；CD13andCD33werespecialmyeloidlineage-associatedantigens；AML-M3wasoftenCD34low-expressedandHLA-DR-negative；CD14wasoftenexpressedinAML-M4andM5；lymphoidlineage-associatedantigens(CD7)wereeasilyfoundinANLL，andmyeloidlineage-associatedantigenswerealsofoundinALL.Inconclusion，immunologicclassificationcanimprovetheaccuracyinacuteleukemiadiagnosis.ThediagnosisofsomespecialAL，suchasacuteunidentifiedleukemia(AUL)，AML-M0andsoon，mustrelyonimmunologicclassification.

Keywordsacuteleukemia；morphologicclassification；immunologicclassification；immunologicphenotype

JExpHematol2006；14(1):39-41

急性白血病属高度异质性疾病，其肿瘤细胞存在多变性，分化差异性等，传统的形态学分型法仅能使70％左右的AL得以准确分型。近年来，结合白血病发病过程中免疫表型(immunologicphenotype)的变化对AL进行分型，加深了对各类AL本质的认识，对各类AL的诊断、治疗和预后判断有重要的临床意义。本研究对68例AL的免疫分型研究报告如下。

材料和方法

研究对象

四级标题68例AL患者，男性36例，女性32例，年龄14-78岁，中位年龄44岁。51例急性髓系白血病中M01例，M224例，M310例，M44例，M512例，16例急性淋巴细胞白血病中L15例，L210例，L31例，急性未分化型白血病1例。

形态学检查

骨髓及血涂片经瑞氏染色及相关细胞化学染色检查，按FAB标准确定AL的类型。

免疫学检查

检测指标包括T系的CD2、CD3、CD7，B系的CD19、CD20、CD79a，髓系的CD13、CD14、CD33、CD117、CD41a及CD34、HLA-DR等，均采用流式细胞仪测定，仪器与试剂由美国BectonDickinson公司提供。结果判断：阳性细胞≥20％为阳性。

结果

68例AL的免疫分型特征见表1，2。Table1.MajorantigensexpressedinAMLcellsTable2.MajorantigensexpressedinALLcells

68例AL中，其中4例经结合免疫学分型才确定，其中1例M0患者形态学示：原始细胞为29％，POX染色阴性；细胞形态学符合急性淋巴细胞白血病，形态学诊断ALL，但免疫分型示：CD3447%、CD11753%、HLA-DR54%表达，CD1316%、CD3313%及CMPO24%表达，诊断为M0型白血病。1例形态学似ALL(L2)患者，原幼淋巴细胞97％；免疫分型示：CD747%、CD3863%、HLA-DR54%、CD3458%均阳性，CD11718%表达；染色体示：46，XX〖14］/46，XX，csb(1q)〖1］，予DOCP2疗程化疗未达缓解，后改予DOAP1疗程达完全缓解(CR)，此后予以DOAP方案为主的化疗持续完全缓解，诊断为AUL。1例形态学L2患者免疫学分型示：CD3436%、CD3342%、CD1345%、CD11791％、HLA-DR82％及CD737％表达，考虑为ly+ANLL。1例形态学L1患者免疫学分型示：CD1977％、CD2078%、CD79a65％和CD222％、CD320％、CD729％表达，考虑为双表型白血病。余病例形态学、免疫学分型相符合。

分析上述结果发现，髓系中CD13表达率最高，为96％，其次为CD33表达率为％；CD14为单核细胞特异性抗原，但阳性率较低，在AML中为%，在M4、M5中表达率为%。M3中HLA-DR为阴性，CD34表达率(10%)明显低于其他亚型。髓系中部分合并淋系抗原的表达，常见CD7、CD19等。本研究51例AML中12例合并淋系抗原表达，阳性率%，其中T系表达占9例，主要为CD7表达，1例合并CD2表达，B系表达占3例，为CD19表达。

淋系中也有合并髓系抗原表达，如CD13和CD33，阳性率为20％。B淋巴细胞中抗原阳性率依次为CD19＞CD20＞CD79a，T淋巴细胞中抗原阳性率依次为CD7＞CD3＞CD2。

讨论

白血病是一组克隆性的恶性疾病，具有高度异质性，传统的FAB形态学分型可使70％左右的AL得以分型，结合免疫分型可以较精确的识别表达不同分化抗原的细胞，从而明确划分出细胞的发育阶段和类型，对于区分T、B淋巴细胞及形态学难以辨认的细胞，特别是其在AML与ALL的鉴别、ALL亚型区分及AUL、M0、M6、M7等的诊断中尤为重要。本研究中形态学诊断与免疫分型符合率为%。1例M0患者形态学为淋巴细胞，免疫分型示髓系抗原表达，完全符合M0；1例形态学似L2，免疫分型示高度表达干/祖细胞标志，无特异淋系、髓系抗原表达，诊断为AUL；1例形态学L2，免疫分型表达髓系CD13、CD33为主，同时表达CD7，考虑为ly+AML。

髓系中较特异的抗原为CD13、CD33、CD14，其阳性率依次为CD13＞CD33＞CD14，CD34为造血干、祖细胞相关抗原，随着细胞的成熟其抗原表达会逐渐减弱［1］。M0、M1常主要表达CD34这类造血干/祖细胞标志，也可表达髓系相关标志，如CD13、CD33，本研究1例M0患者部分表达髓系抗原CD13、CD33，强烈表达干/祖细胞标志。M3型白血病较特异的免疫表型为CD13、CD33阳性，CD34低表达，HLA-DR多阴性［2，3］，本研究与此相一致。研究证实CD14为单核细胞的特异性标记抗原［4］，本研究中发现，CD14主要在M4、M5中表达，阳性率为%，在AML中为%，与国内的汤美华等［5］研究相比，阳性率略低。髓系中可合并有淋系表达，常见为CD7，其次为CD10、CD19和CD20等［6］，本研究中发现51例AML中，12例合并淋系表达，其中T系表达9例，主要为CD7表达，1例同时合并CD2表达；B系表达3例，主要为CD19表达。淋系中，B淋巴细胞抗原阳性率依次为CD19＞CD20＞CD79a，T淋巴细胞中抗原阳性率依次为CD7＞CD3＞CD2，淋系中可合并髓系CD13、CD33表达，其中1例淋系同时表达B系抗原及T系抗原(CD2、CD3、CD7)，诊断为双表型白血病，考虑细胞恶变部位在多能干细胞或以上阶段［7］。

综上所述，在形态学基础上结合免疫学分析，可更精确地了解待检测细胞的不同分化阶段和类型，提高白血病的分型准确性，具有补充和纠正诊断的临床意义。

【参考文献】

1TestaU，TorelliGF，RiccioniR，etal.Humanacutestemcellleukemiawithmultilineagedifferentiationpotentialviacascadeactivationofgrowthfactorreceptors.Blood，2002；99:4634-4637

2LoCocoF，FoaR.Diagnosticandprognosticadvanceintheimmunophenotypicandgeneticcharacterizationofacuteleukaemia.EurJHaematol，1995；55:1-9

3丘镜滢，谭家怀，洪波等.急性早幼粒细胞白血病的形态学、免疫学和细胞遗传学检测的临床意义.北京医科大学学报，1997；29:333-335

4CasasnovasRO，CamposL，MugneretF，etal.Immunophenoty-picpatternsandcytogeneticanomaliesinacutenon-lymphoblasticleukemiasubtypes:aprospectivestudyof423patients.Leukemia，1998；12:34-43

5汤美华，周宇，沈德诚等.从AML细胞表面标记特点看AML、ALL鉴别时单抗的选择.中华血液学杂志，1994，15：466-468

6翟志敏，何晓东，戴海明等