2023学年人教版选择性必修三微生物的选择培养和计数教案

二 微生物的选择培育和计数课程标准 素养要求1.生命观念：通过学习选择培育基的原理，建立生物与环境的适应观。目的地培育某种微生物。

基于稀释涂布平板法和显微镜计数法，运用归纳与概括的科学方概述稀释涂布平板法和显微镜计数法法，概述测定微生物数量的常用方法。是测定微生物数量的常用方法。 价。一、选择培育基[提示] 培育基的唯一氮源，只有能产生脲酶的微生物才能将尿素分解为氨供自身利用，其他微生物由于缺少氮源而无法生长生殖。二、微生物的选择培育三、微生物的数量测定[提示] 显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。四、试验设计筛选分解尿素的细菌的培育基以尿素为唯一氮源且为固体培育基( )(2)利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。( )落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进展统计。( )利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分别和计数。( (5)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数目。( )(6)培育分解尿素的细菌，培育基的pH会增大。( )答案：(1)√ (2)×(3)× (4)× (5)× (6)√学问点一 微生物分别的两种常见方法的比较稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法的比较比较工程 平板划线法 稀释涂布平板法将菌液进展一系列的梯度不纯化原理培育基的外表，进展培育，同以得到单菌落点接种工具接种环涂布器单菌落单菌落从最终划线的区域只有稀释度适宜，才能得的获得挑取到单菌落用途分别纯化菌种，获得单菌①分别纯化菌种，获得单落 菌落；②用于计数操作比较简单，需将菌液

步削减，逐步分散开

板果图一样点

①都能分别纯化菌种；②都是在固体培育基上进展的；③都需要在酒精灯火焰旁进展接种[温馨提示](1)划线的末端开头划线。(2)稀释涂布平板操作完毕后，要将一个未接种的培育基和一个已接种的培育长，说明白培育基制备成功、合格，未受到污染。法是微生物培育中的一种常用的接种方法，以下相关表达错误的选项是( )A．操作中需要将菌液进展一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培育基外表C．不同浓度的菌液均可在培育基外表形成单个的菌落解析：C。假设菌液浓度过大，形成的菌落连在一起，得不到单个的菌落。结合甲、乙两图，答复以下相关问题：图甲是利用 法进展微生物接种，图乙是利用 法进展微生物接种这两种方法所用的接种工具分别是 和 对这两种接种工具进展灭菌的方法依次是 和沾上酒精引燃。在培育基上进展划线操作时，操作的第一步及 之前都要灼烧接种环。在其次次及以后的划线，总是从上一次划线的 一区(图甲中5区)的划线与第一区(图甲中1区) 。 。接种后，在固体培育基上培育细菌时进展倒置培育的缘由是 。以下图是承受上述某接种方法接种后培育的效果图解，其接种方法是 (填“图甲”或“图乙”)。答案：(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器 灼烧灭菌每次划线 末端不要相连火焰四周存在着无菌区域(5)图乙学问点二 微生物的选择培育特定培育基的设计原理与应用实例特定培育基的设计原理

分别菌种不添加碳源依据养分需求 不添加氮源参加青霉素、四环素或链参加某种化学物质，其不作为霉素但会抑制或杀死其他微生物10%的酚

(硝化细菌等)(圆褐固氮菌等)能分解石油的微生物抑制细菌和放线菌生长→分别酵母菌、霉菌等抑制细菌和霉菌生长→分别放线菌厌氧型和兼性厌氧型置于无氧条件下微生物→分别乳酸菌、酵母菌等其他菌在高盐环境中利用特别环境 置于高盐环境中易失水而不能生存→色葡萄球菌置于高温环境中而无法生存→分别耐高温微生物试验设计原则设立重复组：3个平板作重复组，以增加试验结果的说服力与准确性。设立两种比照组。接种后培育，观看两种培育基上的菌落数目，进展比照得出结论。[温馨提示] 原则上选择培育基只能允许特定种类的微生物生长，但实际生物的培育是一个格外简单的问题有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长生殖，因此能在选择培育基上生长的微生物不肯定都是所需的微生物，还需进一步验证。1．(2023·山东淄博月考)以下关于土壤中分解尿素的细菌的分别的表达，正确的选项是( )A．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B．统计样品中的活菌数目一般用平板划线法C．筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培育基中唯一的养分物质明筛选到了分解尿素的细菌解析：选A。统计样品中的活菌数目时一般用稀释涂布平板法，B错误；筛示剂，假设指示剂变红，则说明筛选到了分解尿素的细菌，D错误。2．下表是微生物培育基的成分。以下说法错误的选项是( )编号 ①成分 含量 0.4g

②KH2PO44.0g

③0.5g

④CaCl2g

⑤H2O100mLA.此培育基可用来培育自养型微生物B．此表中的养分成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．假设除去①，此培育基可培育圆褐固氮菌含含碳有机物，可用来培育自养型微生物，A、B正确；圆褐固氮菌的同化类型确。进展素养 长句特训 与高考接轨1．()分别分解尿素的细菌的选择培育基是如何进展选择的？ 。利用尿素的微生物才能够生长2．()应如何设置比照，推断选择培育基是否起了选择作用？ 。答案：在完全养分培育基上接种微生物纯培育的“两个妙用”妙用培育基困难，因此，可用特定培育基进展初步“，去除大局部其他微生物。①利用目的菌对某种养分物质有“嗜好”分解尿素的细菌，就将尿素作为培育基中的唯一氮源。利用某种“抑制物”得充分的生存空间，从而大量增殖，在数量上占据优势。妙用接种方法过培育获得单一个体形成的菌落，再依据菌落特征鉴别筛选。学问点三 微生物的数量测定微生物的计数试验结果分析内容 现象长

结论未被杂菌污染有无杂菌污染的推断

培育基中菌落数偏高

被杂菌污染菌落形态多样，菌落数偏高培育基中混入其他杂菌牛肉膏蛋白胨培育基上的选择培育基的筛选作用 菌落数目大于选择培育基上的数目得到3个或3个以上菌落数样品的稀释操作30～300的平板

选择培育基具有筛选作用操作成功重复组的结果 假设选取同一种土样，统计结果应接近[温馨提示] 显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过肯定的关心处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进展染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进展计数。1．(2023·河北石家庄高二月考)以下图为“土壤中分解尿素的细菌的分别与计数”试验中样品稀释示意图。据图分析，以下表达正确的选项是( )103倍510倍1.7×109个D．该试验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高答案：C2．(不定项)以下关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的表达，不正确的是( )A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基，经高温、高压灭菌后倒平板0.1mL，分别涂布于各组平板上C．将试验组和比照组平板倒置，37℃恒温培育24～48h以上的试验组平板进展计数解析：BD。进展培育基的制备时，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基，平板上，B项错误，将试验组和比照组平板倒置，37℃恒温培育24～48h，C30～300值，再通过计算得出土壤中的细菌总数，D项错误。进展素养 长句特训 与高考接轨1() 。答案：当两个或多个细菌连在一起时，平板上观看到的只是一个菌落2．(科学探究)某同学在三种稀释度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下数据，则1g样品的活菌数为 个。平板菌落数稀释度123104320360356105212234287106212318答案：2.44×108核心学问小结

[答题必备]在微生物学中，将允许特[要点回眸] 生长的培育基，称为选择培养基。稀释涂布平板法除可以用统计样品中活菌的数目。3.当样品的稀释度足够高中的一个活菌。在同一稀释度下，应至少3个平板进展重复计数，然后求出平均值。用稀释涂布平板法统计的观看到的只是一个菌落。[随堂检测]1．以下关于微生物分别和培育的表达，错误的选项是( )A．微生物培育前，需对培育基进展消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法C．分别土壤中不同的微生物，要承受不同的稀释度能分解尿素的细菌，要以尿素作为培育基中唯一的氮源30～300解尿素的细菌，要以尿素作为培育基中唯一的氮源。2.(2023·山东德州高二期末)某同学成功分别出了土壤中的固氮菌，结果如右图所示。该试验使用了( )平板划线法

液体培育基CA项错误；在固体培育基上才能形成菌落，B项错误；要分别土壤中的固氮菌，C项正确；固氮菌为异养型生物，因此其所用培育基需要参加碳源，D项错误。微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，以下关于二者的比较，正确的选项是( )平板划线法稀释涂布平板法①需在无菌条件下操作不需无菌操作②培育基中不加琼脂培育基中添加琼脂③不行计算菌液中的活菌数可计算菌液中的活菌数④需要接种环需要涂布器A.③④C．①④B．②④D．②③②错误；平板划线法不能对菌落进展计数，释涂布平板法的接种工具是涂布器，④正确，A符合题意。4．(2023·安徽合肥高二检测)用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数在对应稀释倍数为106的培育基中得到以下几种统计结果正确的选项是( 230．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和261，取平均值23821、212256，取平均值163209、240250233解析：D。在设计试验时，肯定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增加试验的说服力与准确性，A、B错误；C3个平板，但是，其中3个平板的计数值用来求平均值，C错误。5．(不定项)以下图甲是稀释涂布平板法中的局部操作，图乙是平板划线法操作的结果。以下相关表达正确的选项是( )A．图甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液B．对于浓度较高的菌液，假设图甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子生殖而成C．图乙培育皿中所得的菌落都符合要求B正确；平板划线法中一般最终一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子生殖而成的，这种菌落才符合要求，C错误；连续划线操作中，除了第一次划线外，划线末端处的菌落是由单一的细胞或孢子生殖而成的，D正确。6．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2NH3，供植物吸取和利用。答复以下问题：有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，缘由是前者能产生 能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2 作为碳源，缘由是 但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培育基时，应选择 (填“尿或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的缘由是 。用来筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用是(答出两点即可)。24 4 以能够分解尿素，是由于它们能产生脲酶。尿素分解菌是异养生物，不能利用CO来合成有机物，必需利用有机物(如葡萄糖)作为碳源。葡萄糖通过呼吸作用被分解时，能为细胞生命活动供给能量；同时葡萄糖还可以转化成脂肪某些氨基酸等物质所以进入细菌体内的葡萄糖能为其他有机物的合成供给原料。(2)选择培育基是只允许特定种类的微生物(目的微生物)生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基。本试验的目的菌是可分解尿素的细菌，因此配制的培育基应只允许尿素分解菌生长，NHNO可以作为全部细菌的氮源，培育基中如含有 NHNO24 4 KH2PO4Na2HPO4H2PO－/HPO2－4 4pH保持相对稳定。答案：(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动供给能量；为其他有机物的合成供给原料尿素 其他两组都含有N4N3能分解尿素的细菌和不能分解尿素的都能利用NH4NO3，不能起筛选作用为细菌生长供给无机养分；作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH的稳定[体验高考]1．(2023·高考江苏卷)为纯化菌种，在鉴别培育基上划线接种纤维素降解细菌，培育结果如下图。以下表达正确的选项是( )A．倒平板后需间歇晃动，以保证外表平坦C．该试验结果因单菌落太多，不能到达菌种纯化的目的D．菌落四周的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色Ⅲ维素被降解后，不能被刚果红染成红色，D错误。2．(2023·高考北京卷)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培育基。的透亮圈(如图)，试验结果见下表。菌种

菌落直径：C(mm)5.18.1

H(mm)11.213.0

H/C2.21.6有关本试验的表达，错误的选项是( )基除淀粉外还含有氮源等其他养分物质B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉力量的差异解析：C。微生物培育基含有四类养分物质：水、无机盐、碳源、氮源，B项正和Ⅱ形成的菌落四周都消灭了透亮圈，说明两种细菌都能将淀粉酶分泌至细胞外，C项错误。3．(2023·高考全国卷Ⅰ)某种物质S(一种含有CHN的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。争论人员依据以下图所示流程从淤泥中分别得到能高效降解SS，乙的组分为无机盐、水、SY。答复以下问题：试验时，盛有水或培育基的摇瓶通常