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文档简介

实训8犬的血涂片检查犬的血涂片检查一、实训目标二、实训内容三、实训材料与设备五、注意事项六、实训报告四、实训方法与步骤了解犬血涂片的制备方法，在显微镜下能正确识别红细胞及各类白细胞形态。一、实训目标

1.红细胞形态观察；

2.白细胞分类及其形态观察。二、实训内容三、实训材料与设备犬、静脉输液针、注射器、止血带、止血钳、载玻片、盖玻片、瑞氏染色液、显微镜、松柏油、擦镜纸等。1、血液样本的收集：采用犬前肢臂头静脉采血。采血时，将犬保定，局部剪毛、消毒，于剪毛区上部扎紧止血带，使下部静脉充血，右手用连有6号或7号针头的静脉输液针刺入静脉，左手放松，已适当速度抽血即可。四、实训方法与步骤2、血涂片的制作：（1）将采集的犬血滴一滴于载玻片的一端。（2）以左手拿该片的两端，右手持准备好的盖玻片，拇指、中指夹持盖玻片的两缘，食指轻压玻片表面，将盖玻片一边压在载玻片上血滴的前方，向后拉盖玻片至接触血滴，待血滴扩散成线；此时保持两玻片的眼角约30°左右，夹持盖玻片的拇指和中指也正好夹住盖玻片的两边；匀速前推盖玻片，直推至载玻片的尽头为止。四、实训方法与步骤（3）涂片在空气中干燥后置于染色架上，滴加瑞氏染色液，使涂片被染色液覆盖。染色1分钟后，再加等量的缓冲液于染色液上，浸染约5～8分钟此时涂片表面呈现一层古铜色。然后用蒸馏水迅速冲洗，见涂片呈粉红色后，自然晾干。四、实训方法与步骤

3、显微镜观察：使用油镜观察红细胞的大小、形态、胞浆着色、结构等方面有无异常；各种白细胞的形态学特征，包括细胞形状、胞浆染色、细胞核着色及形态等。四、实训方法与步骤1、采血一定要轻微，防止溶血。2、血涂片的制备一定要均匀、厚薄适中。3、染色时间要控制好，过短，着色较浅；反之较深。五、注意事项小组讨论并要求每个学生写出实训犬的血涂片检查的实习报告1份。六、实训报告血细胞观察血涂片各种血细胞瑞氏染色法染料：酸性染料伊红和碱性染料美兰（亚甲蓝）的复合染料。亚甲蓝氧化为次级染料天青。溶剂：甲醇溶解+固定磷酸盐缓冲液（PBS）：pH6.4-6.8染色原理1、血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性物质，与酸性伊红结合染成粉红色，称为嗜酸性物质2、嗜碱性颗粒和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性美兰结合，染成紫色或蓝色，称为嗜碱性物质3、中性颗粒呈等电点状态与伊红美兰均可结合，染成紫红色，称为中性物质染色步骤1、制作推片2、瑞氏染液覆盖血膜，染0.5-1min3、加等量或稍多的缓冲液，混匀，染5-10min4、流水冲去染液，干燥后镜检染色结果正常血膜外观为淡紫红色镜下红细胞和嗜酸性颗粒染成粉红色，嗜碱性颗粒染成紫黑色，中性颗粒染成淡紫红色，细胞核染成紫红色镜检方法检查区域：体尾交界处，细胞分布均与，细胞排列紧密但不重叠低倍镜：估计细胞分布和染色情况油镜：观察细胞形态血样100μL涂片

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