选修三第讲克隆技术及生物技术的伦理问题

第2讲克隆技术及生物技术的伦理问题2015备考·最新考纲1.植物的组织培养(Ⅱ)。2.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。3.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。4.生物技术中的伦理问题(Ⅰ)。

考点1植物细胞工程(5年8考)

(2013课标Ⅰ卷、天津卷、江苏卷、重庆卷、课标卷……）1．细胞工程

(1)操作水平：_____________________。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的_________或获得_________。细胞水平或细胞器水平细胞产品遗传物质2．植物细胞的全能性

(1)概念：具有某种生物全部_________的任何一个细胞，都具有发育成___________的潜能。 (2)原因：细胞内含有本物种的_____________。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于_____状态，提供一定的__________和其他适宜外界条件。遗传信息完整生物体全部遗传信息离体营养、激素3．植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有_______。 (2)过程：全能性4．植物体细胞杂交技术

观察植物体细胞杂交技术图示，完善相关问题

(1)过程①为去除_______获得具有活力的原生质体，常用方法是酶解法，所用到的酶是_________________。细胞壁纤维素酶和果胶酶 (2)过程②是原生质体的融合，人工诱导的物理法包括_________________等；化学法一般用_________(PEG)作诱导剂。 (3)过程③是原生质体融合后再生出_______，这是原生质体融合成功的标志。 (4)植物体细胞杂交的意义：___________________________。离心、振动、电激聚乙二醇细胞壁克服了远缘杂交不亲和的障碍5．植物细胞工程的应用

(2)作物新品种的培育：单倍体育种、突变体的利用。 (3)细胞产物的___________：培养到_________阶段。优良品种的遗传特性分生区工厂化生产愈伤组织思维激活

判断正误

(1)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性 (

)。 (2)愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的(

)。 (3)幼嫩的组织脱分化较为容易，如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化，而植物的茎、叶和成熟的组织则较难

(

)。 (4)对外植体和接种用的每种器械都要彻底灭菌(

)。

(5)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光，再分化过程需要光，因为愈伤组织利用有机营养成分，而试管苗需要进行光合作用以自养 (

)。 (6)植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素不同，因为培养的目的不同(生根或生芽) (

)。

答案

(1)×

(2)×

(3)√

(4)×

(5)√

(6)√思考感悟

植物组织培养的整个操作过程中，如何实现无菌环境？

提示

通过培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)、外植体的消毒(酒精、氯化汞)、接种的无菌操作(酒精、酒精灯灼烧)、无菌箱中的培养、移栽到消过毒的环境中生存一段时间等操作实现无菌环境。

植物组织培养技术1．(2013·重庆理综，5)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是(

)。 A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消

毒剂对细胞的伤害

B．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染

色体加倍的细胞

C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调

控

D．生根时，培养基通常应含α－萘乙酸等生长素类调节

剂

解析本题主要考查植物组织培养的相关知识。在愈伤组织中，因植物细胞含有细胞壁，阻碍了细胞融合，所以此时加入细胞融合的诱导剂，不能获得染色体加倍的细胞；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害；愈伤组织出芽是细胞分化的结果，而细胞分化的实质是基因的选择性表达；生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，生根时，培养基通常含有α－萘乙酸等生长素调节剂。

答案

B题后归纳

植物激素在组织培养中的作用

在配制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。

(1)按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高 (2)当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。生长素与细胞分裂素的用量比值植物细胞的发育方向比值高有利于根的分化、抑制芽的形成比值低有利于芽的分化、抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成植物兄体细勇胞杂移交技色术2．(2衡01免3·天津新卷，9)花椰输菜易究受黑易腐病驰菌的呈危害解而患泊黑腐粥病。闲野生袭黑芥提具有通黑腐典病的盟抗性重基因锁。用筋一定丸剂量畜的紫息外线醒处理尝黑芥息原生腹质体畏可使鹅其染昆色体唱片段伶化，昏并丧朴失再药生能犯力。强再利魂用此岔原生泛质体所作为工部分舟遗传框物质启的供狠体与厘完整秆的花送椰菜质原生公质体玩融合谋，以诸获得熊抗黑疤腐病努杂种仓植株困。流闸程如错下图享。据图孝回答移下列转问题择：(1辱)过程①所需亩的酶掠是__紫__秤__臭__浆__笔__文__判__河__呼__装__党__区__丹__。(2恢)过程②后，究在显滔微镜皆下观段察融拖合的车活细祥胞中兆有供达体的__艰__点__吹__存在线，这临一特膨征可软作为胖初步膛筛选播杂种彻细胞潮的标状志。(3受)原生宇质体云培养灯液中娇需要宿加入功适宜尘浓度妖的甘冲露醇翁以保碗持一浑定的倍渗透鹊压，俗其作劝用是__熔__日__想__逆__诊__侍__欣__。原纺生质污体经趣过__止__欢__鸽__再生洋，进遥而分越裂和骄脱分灿化形捧成愈灭伤组糊织。(4如)若分竖析再斯生植初株的次染色纹体变芽异类误型，刻应剪捡取再础生植扮株和__幼__累__虏__植株即的根们尖，流通过__格__奔__粗__、__蓝__们__秃__、染据色和蒸制片小等过毯程制奏成装投片，洞然后制在显造微镜碰下观骗察比璃较染腔色体丝式的形碑态和老数目铺。(5嘴)采用乎特异汪性引做物对仿花椰哄菜和艇黑芥机基因愚组DN东A进行PC违R扩增盾，得纲到两拿亲本果的差奇异性墙条带盯，可里用于博杂种晶植株罗的鉴郊定。拖下图饥是用建该引虹物对很双亲祝及再枕生植酒株1～4进行PC利R扩增笔的结屠果。晌据图棵判断险，再闷生植旁株1～4中一尼定是弊杂种吵植株桐的有__闹__闷__语__。(6担)对杂色种植愿株进因行__蝇__肝__渠__接种妻实验伴，可坛筛选耽出具买有高烧抗性残的杂廉种植肝株。解析(1陷)过程①是利责用纤鄙维素雹酶和梦果胶洪酶去昏除幼缸叶细次胞和躁根细层胞的难细胞娃壁，泳制备兰相应厦原生封质体柏；(2达)过程②在PE针G的作书用下认两个诉原生负质体军融合段在一躬起，烫形成妙杂种演细胞舌，来钞自幼嘉叶的唇原生咸质体习中有朋叶绿扎体存尽在，黄可以聪作为梅显微总镜下热初步涂筛选烛杂种锦细胞席的标莲志；(3羡)原生翼质体银及刚港形成敌的杂紫种细抓胞因她为没追有了茅细胞弹壁的星束缚烦作用育，必指须浸箭泡在斧适宜雁浓度脊且无冻毒害白作用弯的等监渗溶偶液中等，以因保持绑原生去质体耕的完软整性叔，原溪生质砌体经湾过细里胞壁阁的再忌生后孔，才迟能进绿而分企裂和切脱分吃化形辞成愈勿伤组悟织。(4嗓)若分伍析再乖生植味株的化染色乒体变忍异类怀型，讽应剪坛取再误生植划株和架双亲礼植株省的分义生组买织(如根占尖)，通膀过解伸离、蒸漂洗城、染傻色和雅制片归等过听程制为成装郑片，散再在显周微镜鱼下观嫁察比工较染谷色体口的形絮态和岸数目层。(5舟)识图丧可判像断再灰生植皆株1～4中一煎定是咬杂种踪蝶植株去的有1、2、4；(6瞧)对杂子种植弱株进会行黑英腐病轿菌接找种实选验，搭可筛茄选出兔具有辟高抗箩性的杨杂种里植株停。答案(1福)纤维劲素酶叼和果镇胶酶(2科)叶绿区体(3急)保持麻原生恒质体址完整更性汤细胞充壁(4手)双亲(或花暴椰菜寒和黑坟芥)解离慰漂由洗(5巩)1、2、4(6殖)黑腐踏病菌题后尼归纳植物真组织粉培养盟和植损物体驳细胞煤杂交敲的比请较名称植物组织培养植物体细胞杂交原理细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性过程选材选取根尖、茎尖、形成层部位最容易诱导脱分化不同的植物细胞技术操作脱分化、再分化等除脱分化、再分化外，还要用酶解法去除细胞壁，用一定的方法诱导细胞融合关系植物组织培养是植物体细胞杂交的基础，植物体细胞杂交所用的技术更复杂考点2动物堂细胞象工程(5年9考)(2肿01稼3安徽君卷喊、浙心江卷采、租重庆备卷照、海劝南卷……枪)1．动物桐细胞趁培养过程关：2．动物孙细胞宫培养扯的条甩件(1基)无菌窜、无耗毒：击对培抖养液唯和所然用培剖养用犹具__磁__收_处理课，添当加__缠__蜡__孤_；定呢期__弟__胞__寸__次__增_以清耻除代精谢产警物。(2汪)营养靠：除芬糖、贪氨基宅酸、尽促生弦长因苹子、投无机钳盐、窝微量颜元素之特外通啦常还渔需加戏入__像__踪蝶__衡__等天萍然成针分。(3帅)适宜章的温复度和pH：温撞度为__禽__旱__继__连__迈_哺乳化动物)，pH为__滴__霸__大__奔_。(4孔)气体逮环境——荣95牧%空气忙＋5%卵CO2(维持__拜__防__抛__涝__河_)无菌抗生书素更换蓬培养渔液血清酒血浆36低.5宰±0止.5盾℃7.责2～7.庄4。培养友液的pH3．动物选体细同胞核禽移植待及克编隆技算术引矩发的寻伦理划问题(1疏)原理势：__移__科__客__劲__爹__芹__鸦__殊__匹__摘__(2撒)核移燃植过漏程(以高缩慧产奶闯牛克稍隆为蛮例)动物跟细胞嗓核具炒有全辞能性(3值)克隆赤人的灵类型捉及其罪伦理胁问题

类型项目

治疗性克隆生殖性克隆区别目的____________用于_____，产生新个体水平_____水平_____水平联系都属无性繁殖；产生新个体、新组织，遗传信息相同中国政府的态度中国政府的观点：不赞成，不允许，不支持，不接受任何_____________的实验，不反对_____________治疗船人类班疾病生育细胞个体治疗软性克赏隆生殖浩性克矮隆人4.单克独隆抗绑体制香备(1季)诱导拦动物晒细胞瘦融合言的原抢理：__柳__湖__宰__玩__匪__跌__凉__浩__模__端__。(2坊)诱导掩动物蠢细胞蚊融合肾的方质法：原物理赖法——离心罚、振醋动、丢电激盏等；陶化学收法——聚乙稍二醇终；生培物法——母__放__声__五__。(3陵)单克这隆抗可体制秃备过能程细胞东膜具升有一偶定的肿流动荒性灭活酬病毒(4坟)单克絮隆抗牧体的屯优点弄：__笨__易__驴__、灵秆敏度是高，希可大锡量制豪备。(5谣)单克蹦隆抗克体的罪应用债：作笋为__砖__婶__凯__；用摩于治锦疗疾嚼病和__浙__忍__唯__。特异狂性强诊断济试剂运载摔药物5．比较增动物任细胞抛培养捆、核拆移植药与动舒物细含胞融贫合比较动物细胞培养核移植动物细胞融合原理细胞增殖动物细胞核的全能性细胞膜的流动性过程结果相同分化程度的细胞群与供体基本相同的个体杂交细胞关键环节细胞增殖(分裂)、细胞癌变核融合、细胞分化人工诱导细胞膜融合应用①生产生物制品②基因工程③检测有毒物质①加速良种繁育②保护濒危物种③生产医用蛋白④提供克隆器官、组织等获得杂种细胞，制备细胞产物如单克隆抗体思维驶激活判断辣正误(1茶)植物户组织浴培养挽常用菠液体粉培养煮基，至动物毫细胞咱培养悄常用致固体鄙培养依基()。(2腔)具有膝包含攀物种患完整番基因避组的汇细胞尺核的肾活细汉胞是圾生物膜克隆流的重明要条嫌件之估一()。(3汇)一般饼血清哑中的纯抗体桶是一顺群识毯别不拦同抗沿原部拣位的倚抗体桂混合嘴物，旺单抗魄则识琴别抗涛原分陈子的柏特殊屿部位用，具薄专一霸性()。(4租)细胞惠克隆蚕的基你本要区求是线：必插须保理证分顿离出肿来的草细胞乞是一扑个而溪不是受多个()。(5突)在培串养瓶萌中要丙定期毯用胰榨蛋白述酶处柜理使念细胞康从瓶滋壁上罩脱离适，制马成悬克浮液()。(6菊)二倍解体细泊胞的庭传代台培养载次数膜通常蔑是无鸽限的()。(7锄)核移伙植过狼程中叠供体催理论执上是仙提供吹细胞唇核，稀但操旨作过如程中贸可以坑把整筐个体闲细胞亿注入企去核护的卵已母细另胞中半去()。答案(1蹦)×(2曲)√(3妄)√(4章)√(5戏)√(6稍)×(7泡)√思考逢与填朱空仔细紫阅读垦图示狠及相址关内歼容辨猾析并镰填充其含捷义从A、B到C的过案程可脸以表缓示不符同的含义(如图喘所示)：①若A、B为动尺物细讲胞，驴则该芝过程谁表示__疼__沾__膨__唐__；②若B为精床子，A为卵恩细胞抬，则加该过动程表敏示__凡__新_；③若A为除源去细柳胞核夺的卵沿母细酷胞，B为细探胞核洗，则驰该过也程表衫示__紧__肠__叔_。细胞梦融合受精核移嗓植动物罪细胞笼培养占技术1．(2柱01渣3·浙江削理综，6)实验餐小鼠颜皮肤伏细胞郑培养(非克伯隆培趟养)的基铲本过琴程如亩图所则示。蜂下列诞叙述完错误蔬的是()。A．甲奖过程久需要臂对实千验小六鼠进晚行消剃毒B．乙膀过程址对皮手肤组掩织可例用胰味蛋白葡酶消今化C．丙算过程誓得到渠的细眠胞大此多具连有异碧倍体没核型D．丁眉过程匠得到齿的细闪胞具槽有异存质性解析取小跨鼠皮存肤组敏织进防行培住养时盏需对侄实验蜡小鼠座进行叹消毒爬；通拢过胰焦蛋白狐酶消悉化皮崭肤组沙织可进获得拌皮肤正细胞恭；丙胞过程征为最银初的白传代套培养就，得钢到的电细胞焰大多度具有宗正常仙二倍贷体核傻型；攻来源磁于多牧个细磨胞的披非克袄隆培妹养所淹得到芬的细谁胞系围具有付异质杨性，殊该实挨验小筐鼠皮敞肤细昼胞属敌于非疯克隆侮培养该，丁爹过程圆得到绍的细申胞具究有异仔质性吉。答案C题后痰归纳(1居)动物地细胞温培养张时选绳用幼警龄动吊物组裁织或员胚胎构进行蚁细胞及培养项的原这因：得幼龄艰动物宿组织闻或胚尽胎的拥细胞侨分化尺程度制低，湖增殖怖能力墙很强晨，更奖易于血培养州。(2柄)在动旦物细菌胞培狱养过疏程中夕两次袭用到望胰蛋坝白酶状：第角一次咽是将恳剪碎穴的组梨织分裤散成兄单个危细胞垫；第刑二次恰是将这贴壁冷细胞吸从瓶翼壁上浑分离辰下来梯，目匀的是狼避免赖动物掉细胞消的接炎触抑奇制现票象。(3顾)细胞剂贴壁喷和接性触抑嚷制悬液向中分我散的奖细胞灵很快焰就贴舍附在篇瓶壁辫上，蒸称为璃细胞风贴壁毯。细志胞数序目不摔断增泡多，较当贴尽壁细标胞分父裂生见长到惕表面迷相互奔接触辩时，挣细胞则就会傍停止卵分裂扑增殖锋，这趣种现科象称倒为细光胞的辛接触孕抑制后。(4村)原代拉培养冻与传炎代培形养①原宴代培交养：杠细胞纠悬液拒第一隔次在乱瓶中恰培养婚，没插有分搜瓶培仁养之厕前的疤细胞周培养磁。②传蜻代培数养：睬原代翅培养胡的细甘胞生糕长、未繁殖予一定袄时间询后，盐由于境空间滴不足粒或细倡胞密新度过踩大导纠致营双养枯土竭，霉影响阶细胞星的生半长，赚因此仇需要粗重新替用胰削蛋白鼓酶等辜处理身，进推行分详瓶扩陈大培置养，搂即传牢代培晓养。单克躺隆抗贫体的霞制备拾过程研及选独择培据养基症的制唯备2．下炭图为离反射餐弧中陡神经—肌肉摸接头榴的结哀构及扭其生半理变检化示蝴意图陪。(1掩)发生屈反射爸时，翠神经己中枢照产生循的兴宁奋沿__堆__宪__冠__神经捷传到络突触叉前膜拦，导亦致突秋触小脂泡与却前膜__龄__饱__毛__，释山放神秋经递土质(A博ch著)；Ac赠h与Ac邀h受体兰结合雀后，鸡肌膜冈发生__蚁__括__晶__，引愿起肌腾肉收顷缩。(2令)重症英肌无陷力是决自身晕免疫党病，岗其病筹因是写患者插免疫冬系统蚀把Ac虑h受体均当作全抗原美，使__践__损__偿__被激旨活而羽增殖益、分晃化，涂产生Ac君h受体雀抗体法。Ac扰h受体稠抗体机与Ac桶h受体疾特异竖性结量合，治造成Ac召h不能垫与Ac环h受体挽正常众结合牵，导懂致__粒__颜__奏__信号点转换梨过程洽受阻被。(3沉)临床遣上治煌疗重岩症肌浊无力柿的重木度患疼者，遮可采忘用胸耀腺切秃除法搞，目居的是驳抑制__浪__趋__浓__发育毯成T细胞部，不惨能产颈生淋之巴因木子，日从而圾抑制__盏__雪__踢__免疫偷的应袖答。解析(1锯)分析勺题中工的示润意图炸，神螺经中柜枢产良生的汇兴奋像应沿只传出内神经违传到槐突触斩前膜赌，使满突触统小泡卷与前匙膜融屑合并零释放德神经粒递质挖，电忽信号→化学旬信号背；Ac贯h与Ac暮h受体电结合这后，职化学太信号→电信短号，朴肌膜驶产生鞭电位译变化残，进描而引补起肌肌肉收西缩。(2畅)重症沸肌无拼力患感者的B细胞而，在Ac健h受体(抗原)的刺关激下厚增殖文、分锄化，缩慧产生Ac凤h受体阅的抗夕体，俱其与兽肌膜勤上的Ac置h受体舒结合好，导遥致化粮学信巷号→电信袭号的李过程原受阻带。(3循)切除芹胸腺后可抑连制造送血干糖细胞致发育厚成T细胞耐，造外成淋符巴因效子缺匙乏，投进而绢影响B细胞础的增书殖、脖分化慨过程西，从面而抑京制了内体液渣免疫握的应始答。答案(1软)传出预融丧合钳电位僵变化(2卡)B细胞回化书学信书号向虎电(3削)造血兰干细坦胞恼体液题后全归纳(1膝)血清扁抗体墓与单密克隆允抗体名称产生特点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强，灵敏度高，能大量制备(2多)比较茅制备芽单克院隆抗舞体过笋程中拴的几眉种细勺胞细胞特点浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体杂交瘤细胞即能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖(3所)单克杏隆抗录体制温备过箩程中匆两次和筛选俊的比狱较项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞(4渣)选择轻培养父基的柔制备依据晋筛选璃目标抚，制小备选狼择培际养基早时应“只让蛋杂交捎瘤细岗胞”存活朗，其热余细男胞(包括挖未融茶合的B细胞壳，未灰融合事的骨划髓瘤浩细胞沸