2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸拔高历年高频考点真题含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸拔高历年高频考点真题含答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共85题)1.PCR的衍生技术包括A、反转录PCRB、实时荧光定量PCRC、反向PCRD、巢式PCRE、RACE-PCR2.隐性质粒3.Nick和Gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。4.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。5.基因工程药物的特点是高技术，短周期，高投入，高风险，高收益。6.限制酶命名采用Smith和Athens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的属名的第一个字母；第二、三个字母取自来源细菌的种名的前两个字母；第四个字母（如果有）取自来源菌的____。7.对柯斯质粒(cosmid)描述正确的是A、它具有COS位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶源化反应E、能与有同源序列的质粒进行重组8.核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。9.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒10.在_________的作用下，含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子。11.PCR反应中常用的酶是______。12.pSC101质粒是第一个成功克隆真核DNA的载体，属于松弛控制型的质粒。13._________是指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。14.切口平移法标记DNA探针时应用的酶是_____。15.双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有哪些特征。A、有对称轴B、两条链的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ类酶的识别序列D、可增强基因的表达E、是I类酶的识别序列16.染色质免疫沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用17.影响限制性核酸内切酶酶切的反应条件有哪些A、温度B、盐离子浓度C、缓冲体系D、反应体积和甘油浓度E、限制性核酸内切酶反应的时间18.应用药物敏感基因转染肿瘤细胞，以提高肿瘤患者细胞对药物的敏感性。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因激活B、基因失活C、免疫调节D、药物敏感疗法19.DNA片段之间的连接方式有哪些？20.______________是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。21.接合质粒22.将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个cDNA克隆，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个______。23.试述免疫共沉淀技术的原理？24.何谓基因组文库？25.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力26.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端27._________是指转录因子用于识别靶DNA的蛋白结构域。28.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。29.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种30._________是利用同源重组去改变内源性基因，通过基因打靶可以成功剔除一个基因外显子，增加一个基因和引起点突变。31.扩增与已知DNA区段相连接的未知染色体DNA序列的PCR技术是A、常规PCRB、逆转录PCRC、反向PCRD、多重PCR32.大肠杆菌作为外源基因表达系统的优点是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆机表达系统成熟完善D、全基因组测序完成E、被美FDA批准为安全的基因工程受体生物33.下面关于穿梭质粒载体描述最正确的是A、在不同的宿主中具有不同的复制机制B、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D、在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率34.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？35.cDNA文库的特点是什么？36.细菌抗药性基因一般存在于A、核酸DNAB、质粒C、RNAD、小的直线型DNA37.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-338.Klenow酶在有_________情况下，呈现DNA聚合酶活性，39.在DNA分离过程中，通常要进行透析，其目的是_________。40.什么是穿梭载体？41.何谓cDNA文库？42.通过基因敲除技术使生物体缺失一个或更多基因，从而判断这些被敲掉基因的功能，常称之为_______________。43.逆转录病毒载体的优点不包括A、高效感染宿主细胞B、拷贝数高C、侵染范围广D、基因组小并且简单44.第一个成功地用于基因工程的大肠杆菌质粒是pBR322质粒。45.基因组文库和cDNA文库的区别？46.下列哪一种限制性核酸内切酶是单功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型47.双酶切或多酶切时，一般先用低盐浓度的酶切，再用高盐浓度的酶切。48.试述基因组文库的构建流程。49.酵母表达系统是最常用的真核表达系统。50.说明SangerDNA测序法的原理。51.迄今发现的质粒DNA都是环状的。52.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性53.多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记，是因为它能够将单个的32P标记的单核苷酸加到每一DNA链的5’端。54.基因工程又叫遗传工程、____________、分子克隆。55.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的理论上的三大发现对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发现是下列哪些A、发现了生物的遗传物质是DNA而不是蛋白质B、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制C、遗传密码子的破译D、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆E、逆转录酶的使用56._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。57.写出分子克隆的载体应具备的条件？58.核酸杂交的原理是根据RNA分子间互补。59.下面关于多克隆位点MultipleCloneSite（MCS)的描述错误的一项是A、仅位于质粒载体中B、具有多种酶的识别序列C、不同酶的识别序列可以有重叠D、一般是人工合成后添加到载体中60.大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统。61.1982年在美国诞生了世界上第一种基因工程药物A、重组人胰岛素B、人生长激素C、凝血因子D、干扰素62.下列哪一项不是逆转录病毒的特点A、基因组很小B、表达时间短C、可感染分裂细胞D、可整合到宿主染色体上63.DNA聚合酶I_________的是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子质量为76kDa的大片段。64.什么是荧光定量PCR?65.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以两个方向插入到EcoRI末端的载体中。66.DNA连接酶根据来源不同，可以分为三类，即_________和T4DNA连接酶及热稳定的DNA连接酶。67.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃68.酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构？69.何谓基因工程？70.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、碱性磷酸酶E、末端核苷酸转移酶71.基因工程中使用的II类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。72._________是自然界存在的植物基因工程的天然载体。73.基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA文库中则不含_________。74.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？75.Ptrp表示（）A、噬菌体启动子B、色氨酸启动子C、乳糖和色氨酸复合启动子D、乳糖启动子76.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、病毒基因组DNA的一部分D、真核细胞染色体DNA的一部分77.基因治疗通常采用哪种载体比较合适A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32278.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是____。79.基因治疗是把健康的外源基因导入A、有基因缺陷的染色体中B、有基因缺陷的细胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的细胞中80.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。81.对基因功能的研究，首先需要获取基因或基因片段，即______________。82.甲醇酵母表达系统具有的抗药性基因是A、氨苄青霉素和卡那霉素B、四环素和氨苄青霉素C、氨苄青霉素和庆大霉素D、四环素和庆大霉素83.Cre-loxP系统两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导loxP间的序列互换。84.限制性内切酶可特异性识别A、双链DNA的特定碱基对B、双链DNA的特定碱基序列C、单链RNA的特定碱基序列D、单链DNA的特定碱基序列85.写出动物基因工程的常用方法？卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:A,B,C,D,E2.正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。3.正确答案:错误4.正确答案:限制酶切图谱5.正确答案:错误6.正确答案:株名7.正确答案:A,B,D,E8.正确答案:错误9.正确答案:B10.正确答案:DNA连接酶11.正确答案:TaqDNA聚合酶12.正确答案:错误13.正确答案:转基因植物14.正确答案:DNA聚合酶I15.正确答案:A,B,C16.正确答案:D17.正确答案:A,B,C,D,E18.正确答案:D19.正确答案:具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端DNA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。20.正确答案:基因21.正确答案:指含有nic/born基因，能自我转移的质粒。22.正确答案:cDNA文库23.正确答案:以抗体和抗原之间的相互作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。24.正确答案:指将某生物的全部基因阻DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。25.正确答案:C26.正确答案:A27.正确答案:锌指结构域28.正确答案:正确29.正确答案:A30.正确答案:基因打靶技术31.正确答案:C32.正确答案:A,B,C,D,E33.正确答案:B34.正确答案:应注意的问题有：启动子、密码子、剪接、分泌。35.正确答案:基因特异性、器官特异性、代谢或发育特异性、不均匀性、各cDNA均可获得表达。36.正确答案:B37.正确答案:A38.正确答案:Dntp39.正确答案:除去小分子的无机离子40.正确答案:是指那些既能在真核细胞中繁殖又能在原核细胞中繁殖的载体。41.正确答案:指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。42.正确答案:缺失基因功能43.正确答案:B44.正确答案:错误45.正确答案:cDNA文库是有时效性的，cDNA文库构建时的信息供体是某一时空条件下的细胞的总mRNA，它是在转录水平上反映该生物在某一特定发育时期、某一特定组织在某种环境条件下的基因表达情况，并不能包括该生物有机体的全部基因。46.正确答案:B47.正确答案:正确48.正确答案:生物供体DNA片段的制备；载体的选择与制备；DNA片段与载体的连接；重组体转化宿主细胞；基因文库质量的评价。49.正确答案:正确50.正确答案:(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程)；(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应，则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。51.正确答案:错误52.正确答案:B,D53.正确答案:错误54.正确答案:DNA重组技术55.正确答案:A,B,C56.正确答案:引物57.正确答案:自主复制，即具有复制原点；易于扩增分离纯化；有适宜的限制酶切位点；具备对重组体易于检测的选择性遗传标记；表达载体还应有表达调控元件。58.正确答案:错误59.正确答案:A60.正确答案:正确61.正确答案:A62.正确答案:B63.正确答案:Klenow片段64.正确答案:是一种利用外参或者内参为标准，在PCR体系中加入荧光信号强度与DNA数目相关的荧光物质，并通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时变化检测来实现对起始模板定量及定性的分析工作。65.正确答案:正确66.正确答案:大肠杆菌的DNA连接酶67.正确答案:B68.正确答案:(1)着丝粒；(2)端粒；(3)ARS序列。69.正确答案:一般指利用分子生物学的手段，将不同生物的遗传物质按人们的意志或需要，进行基因的定向改造、突变与重组，从而使生物体的遗传性状发生变异。70.正确答案:A,B,C,D,E71.正确答案:错误72.正确答案:Ti质粒73.正确答案:内含子74.正确答案:启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子，表达系统常选用诱导型启动子，机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度的提高基因的转录水平。75.正确答案:B76.正确答案:B77.正确答案:A78.正确答案:EcoRl79.正确答案:D80.正确答案:错误81.正确答案:目的基因82.正确答案:A83.正确答案:错误84.正确答案:B85.正确答案:显微注射技术构建转基因小鼠；基因打靶策略；病毒载体法；精子载体法；ZFN介导转基因；TALEN技术。卷II一.综合考核题库(共85题)1.除了常规PCR外，还有一些特殊的PCR，常见的有反向PCR、反转录PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。2.常用的DNA探针标记方法是切口平移法和随机引物法。3.下列哪一种酶不能标记DNA分子探针A、Klenow片段B、T4DNA聚合酶C、DNA连接酶D、大肠杆菌聚合酶I4.1986年第一例植物基因工程产品----_________问世。5.一个质粒含有四环素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr内有一HindIII位点，LacZ中有一EcoRI

位点。如用这两种切割载体一并连接入相应的外源片段，则带有该重组质粒的细胞将A、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现蓝色B、有四环素抗陛，在X-gal平板上呈现白色C、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现白色D、有四环素抗性，在X-gal平板上呈现蓝色6.PCR反应中DNA模板量一般为A、100-10000拷贝B、100-100000拷贝C、1000-10000拷贝D、10-100拷贝7.DNA连接酶反应的时间一般为_____________就足以取得较好的连接效果。8.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。9.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个10.人类基因组是指人体DNA分子所携带的全部遗传信息。人类基因组计划就是分析测定人类基因组的核苷酸序列。其主要内容包括绘制人类基因的遗传图、物理图、序列图和转录图。科学家应对多少染色体进行分析A、46条B、24条C、23条D、22条11.在引物存在的情况下才能发挥作用的酶是A、限制性核酸内切酶B、末端转移酶C、逆转录酶D、DNA连接酶12.克隆基因目的蛋白的表达形式主要有哪些类型？13.YAC是下列哪种克隆载体的缩写A、酵母人工染色体B、人工Y染色体C、细菌人工染色体D、粘粒14.Ti质粒中能插入到植物基因组DNA区段是A、复制远点区B、毒素蛋白区C、T-DNA区D、冠婴碱代谢区15.基因工程最知名的也是饱受争议的应用之一是_____________。16.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。17.基因工程的基本流程是A、目的基因的分离、获取与制备B、目的基因与载体连接构建成为重组载体分子C、重组DNA分子导入到受体细胞D、外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选E、外源目的基因的表达18.质粒生物学特性不包括A、自我复制B、转移性C、相容性D、高拷贝数19.蛋白质的融合表达式指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起，并作为一个新的____________进行表达。20.将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个基因组DNA克隆,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_______.21.下列哪一种疾病是获得性免疫缺陷综合症A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纤维化22.cDNA合成第一链时所用的引物是A、PolyCB、PolyTC、发夹结构D、PolyA23.非接合质粒24.转基因植物技术在农业领域主要有哪些应用？就其中一方面应用进行举例说明。25.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段26.第一个作为重组DNA载体的质粒A、ColElB、pSCl01C、pUCl8D、pBR32227.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？28.用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶29.连接酶通常使用的连接反应温度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃30.cDNA文库包括该种生物的A、某些结构基因B、内含子C、所有的结构基因D、内含子和调控区31.下列测序方法哪个是属于经典的DNA测序方法A、ABISOLID测序B、Illumina测序C、Roche454D、双脱氧终止法32.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。33.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶34.一般来说，识别序列的碱基对越多，则这种酶在DNA上出现的频率越高。35.同尾酶36.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病37.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦38.逆转录酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端转移酶活性E、RnaseH活性39.请写出Southern杂交的操作过程。40.巴斯德毕赤氏酵母表达系统较酿酒酵母表达系统具有哪些优势？41.LacZ基因通常用于构建质粒载体的目的是A、编码蓝色色素产物，可用于示踪转化的细胞B、编码一种酶，将RNA转化为DNAC、编码一种抗生素抗性的酶D、编码一种可检测的酶,当基因内部的位点插入任何外源片段，ORF遭到破坏时，产物即不能表达42._________是指以精子为载体，通过动物受精过程将外源基因导入胚胎，产生转基因动物。43.核酸分子杂交的探针只能是标记的小片段DNA分子44.请叙述反转录PCR的含义。45.大肠杆菌DNA聚合酶有几种酶活性A、5种B、2种C、3种D、4种46.在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做______。47._________是一种最为普遍的与年龄相关的认知障碍退行性疾病。48.用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。49.被FDA批准为安全的基因工程受体生物的细菌是A、金黄色葡萄球菌B、蜡样芽孢杆菌C、大肠杆菌D、变形杆菌50.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT51.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。52.标记灵敏度高效果好的探针是A、32PB、地高辛C、生物素D、荧光素53.对Ti质粒描述正确的是：A、可从农杆菌转到植物细胞中B、作为双链DNA被转移C、在植物中导致肿瘤D、介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素E、需要细菌的vir 基因帮助转移54.融合蛋白实际上就是杂合蛋白，含有两个或多个蛋白质的氨基酸序列。55.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、昆虫表达体系D、哺乳类细胞表达体系56.酵母双杂交法是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用57.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

58.原核启动子是由两端紧密连接且又高度保守的核苷酸序列组成。59.什么是动物乳腺生物反应器？60.在众多的植物转基因方法中，_________的方法应用最多。61.在分离DNA时，要戴手套操作，原因是手上常有________。62.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。63.Amp是（）的表示A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四环素64.Southern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体65.末端脱氧核苷酸转移酶在基因工程的操作中主要是防止载体自连。66.质粒具有下列哪几项生物学特性A、质粒的复制B、拷贝数C、不相容性D、转移性E、表达性67.根据Northern印迹的结果可以说明：_________。68.关于宿主控制的限制修饰现象的本质描述不太恰当的是A、由作用于同一DNA序列的两种酶构成B、这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶C、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA

进行修饰D、不同的宿主系统具有不同的限制--修饰系统69.基因操作的核心部分是_________。70.λ噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复制都是用滚环模型。71.Northern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体72.westernblot杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体73.根据Northern印迹的结果可以说明_________。74.在长模板链的指导下，引物延伸合成长的DNA互补链时应选用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大肠杆菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶75.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显_________色，为阳性克隆。76.质粒具有____________，它是指在自然条件下，很多质粒可以通过称为细菌接合的作用转移到新宿主内。77._________是革兰氏阳性细菌，在芽孢形成过程中能产生大量的伴孢晶体。78._________是指编码产物能够被快速测定，常用来判断外源基因是否已经成功导入寄主细胞并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。79.一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。80.目的蛋白与担体蛋白GST的分离是用哪一种酶进行水解的？A、肠激酶酶解B、溴化氢裂解C、凝乳酶酶解D、凝血酶酶解81.________技术是基于互补的DNA单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。82.构建cDNA文库的首要步骤是A、分离既定组织或者细胞的DNAB、分离既定组织或者细胞的mRNAC、逆转录合成cDNAD、cDNA的克隆83._________是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。84.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大肠柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌体聚合酶D、T7噬菌体聚合酶E、逆转录酶85.最早建立成功的转基因哺乳动物是_________。卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:实时荧光定量PCR2.正确答案:正确3.正确答案:C4.正确答案:除草剂耐受烟草5.正确答案:C6.正确答案:B7.正确答案:30min8.正确答案:错误9.正确答案:A10.正确答案:B11.正确答案:C12.正确答案:表达蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白两类，具体包括如下几种结构形态：包涵体型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白。13.正确答案:A14.正确答案:C15.正确答案:转基因食品16.正确答案:简并引物PCR17.正确答案:A,B,C,D,E18.正确答案:C19.正确答案:开放阅读框20.正确答案:基因组文库21.正确答案:C22.正确答案:B23.正确答案:指不含nic/born基因，不能自我转移的质粒。24.正确答案:抗虫转基因作物；抗病毒转基因作物；抗菌转基因植物；抗逆转基因植物；抗除草剂转基因植物；改良作物品质。具体实例可以从这几个方面挑一项进行说明，比如：抗除草剂转基因植物，这类植物转入了抗除草剂基因，表现出抗不同类型除草剂的性状，目前已获得了一些抗除草剂作物，如抗草丁膦转基因作物冬油菜，抗草甘膦转基因作物大豆、玉米、棉花、油菜、向日葵、甜菜，抗磺酰脲类除草剂转基因作物大豆，棉花。25.正确答案:B26.正确答案:B27.正确答案:氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因、氯霉素抗性基因、卡那霉素和新霉素抗性基因以及琥珀突变抑制基因。28.正确答案:D29.正确答案:C30.正确答案:C31.正确答案:D32.正确答案:原核生物33.正确答案:C34.正确答案:错误35.正确答案:有的限制性核酸内切酶虽然识别序列各不相同，但切割后都产生相同的黏性末端，称之为同尾酶。36.正确答案:A37.正确答案:C38.正确答案:A,B,C,D,E39.正确答案:基因组DNA提取和限制酶消化；琼脂糖凝胶电泳分离基因组DNA样品及预处理；转膜；探针标记；预杂交、杂交和洗膜；放射性自显影检测。40.正确答案:生长迅速，外源蛋白表达水平高，产物可翻译后修饰，产物可正确折叠和高效分泌，可利用简单无机盐培养基，高密度发酵，生物量大，实验室和工业操作简单。41.正确答案:D42.正确答案:精子载体法43.正确答案:错误44.正确答案:是一种利用逆转录酶将组织和细胞中的RNA反转录成cDNA，并以此为模板通过PCR进行DNA扩增来间接检测RNA的链式聚合酶反应。45.正确答案:C46.正确答案:星活性47.正确答案:阿尔茨海默病48.正确答案:错误49.正确答案:C50.正确答案:B51.正确答案:20世纪70年代52.正确答案:C53.正确答案:A,C,D,E54.正确答案:正确55.正确答案:D56.正确答案:B57.正确答案:C58.正确答案:错误59.正确答案:能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。60.正确答案:农杆菌介导61.正确答案:核酸酶62.正确答案:错误63.正确答案:A64.正确答案:A65.正确答案:错误66.正确答案:A,B,C,D67.正确答案:外源基因是否进行了转录68.正确答案:B69.正确答案:基因克隆70.正确答案:正确71.正确答案:B72.正确答案:C73.正确答案:外源基因是否进行了转录74.正确答案:D75.正确答案:白76.正确答案:转移性77.正确答案:Bt78.正确答案:报告基因79.正确答案:正确80.正确答案:D81.正确答案:核酸杂交82.正确答案:B83.正确答案:原位杂交技术84.正确答案:A,B,C,D,E85.正确答案:转基因小鼠卷III一.综合考核题库(共85题)1.基因重组的载体必须具备下列哪些特点：A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制B、插入外源DNA后也不影响自身的复制C、易于进入受体细胞D、通过自身的酶系在受体细胞中复制E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定2.酶切法鉴定重组体时，最常用的方法是A、用多种限制性酶将其切出B、用S1核酸酶将其切出C、用DNA酶将其切出D、用重组时的限制性酶将其切出3.表达载体的结构元件包括哪些A、具备与克隆载体相同的复制原点、多克隆位点、筛选标记B、启动子C、转录终止子D、核糖体识别位点E、翻译起始密码子和终止密码子4.酿酒酵母表达系统常用启动子有哪些？5.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori6.获得DNA重组体后，还需进一步鉴定，可采用的方法有A、DNA序列测定B、PCR鉴定C、酶切鉴定D、表达产物的鉴定E、进行定点突变7._________是植物细胞出去细胞壁后的部分，是一个质膜包围的裸露细胞。8.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃9.当载有文库的菌落被转移到杂交膜上用于筛选时，需要碱性溶液处理的步骤，这一步骤的意义何在?A、启动杂交探针与互补序列间的反应B、标记DNA，便于检测C、裂解菌体细胞，并使DNA变性D、促使文库DNA结合到杂交膜上10.何谓转基因动物？11.经典的DNA测序方法有两种，即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。12.关于回文序列，下列各项中哪些是不正确的？A、是限制性内切核酸酶的识别序列B、是某些蛋白质的识别序列C、是基因的旁侧序列D、是高度重复序列E、有对称轴13.印迹是如何形成的？14.Tet是下列哪一种抗性标记的简写名称A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四环素15.下面哪一项不是产生星号活性的主要原因A、甘油含量过高B、反应体系中含有有机溶剂C、含有非Mg2+的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低16.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+17.已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有三个切点，因此，用此酶切割该环状DNA，可得到三个片段。18.PCR技术是_________的缩写。19.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。20.何谓转基因植物？21.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、构建重组DNA分子B、无性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立单克隆抗体22.组成型启动子23.目的基因通常是指A、拟进行研究或利用的基因B、人工合成的基因C、载体DNA分子D、具有编码序列的DNA分子24.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。25.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达26.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。27.DNA聚合酶I在基因工程中有哪些主要用途？28.II型限制酶识别位点一般长度为______个核苷酸对。29.基因工程的两个基本特点是：分子水平上的操作和_________。30.基因治疗的载体只有病毒载体系统。31.EGTA是_________离子螯合剂。32.下列哪一种限制性核酸内切酶的酶蛋白分子组成只有一单一亚基A、II型B、III型C、IV型D、I型33._________成为国际国内人体健康战略的重中之重。34.一种间歇的培养方式，除了进气、排气和补加酸碱调节pH外，在培养过程中与外界没有其他的物料交换。这种培养方式是A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、分批培养35.基因工程药品的试验分为几个时期A、2个B、3个C、4个D、1个36.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。37.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。38.基因工程中有三种主要类型的载体：_________、病毒DNA质粒和病毒DNA杂合体。39.克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的_________的使用。40.所有限制性核酸内切酶的最适反应温度为37℃。41.只能从DNA分子的末端开始水解磷酸二酯键，使核苷酸解离下来的酶是A、核酸外切酶B、核酸内切酶C、DNA连接酶D、末端转移酶42.向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，达到治疗的目的。这个过程叫做A、基因治疗B、基因置换C、基因修正D、基因激活43.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。44.根据结构和功能特性，可将DNA限制性内切酶分为几类A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶45.在cDNA技术中，所形成的DNA发夹环可用A、限制性内切核酸酶切除B、3’切核酸酶切除C、S1核酸酶切除D、5’切核酸酶切除46.柯斯质粒是一类人工构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自_________，cos位点序列来自λ噬菌体。47.用_________表达乳铁蛋白可谓是乳腺生物反应器的典型代表。48.黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足之处。49.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养50.下列哪种病不可以进行遗传病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、心血管疾病51.Cosmid的特点元件是52.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力53.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？54.同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相连接的是A、载体DNA与载体DNA之间B、目的基因与载体DNA之间C、目的基因与mRNA之间D、目的基因与目的基因之间55.重组体的筛选方法有A、抗性药物标记选择法B、分子杂交法C、蓝白斑法D、免疫印迹法E、插入失活法56.用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是A、模板链的互补链B、mRNA的C、cDNA的D、模板链的57.常用的_________使抗生素失活，解除抗生素对转化细胞在转录和翻译过程中的抑制作用，使转化细胞得以继续生长。58.原生质体就是去处了细胞壁的细胞。59.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点60._________是由磷脂组成的膜状结构，用它包装外源DNA分子，然后与植物原生质体共保温。61.II型限制性核酸内切酶的切割位点是A、识别序列1000bp以外B、识别位点下游24－26bp处C、DNA分子任一位点D、识别序列内62.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白63.试述理想质粒载体的构建原理？64.试述影响连接反应的因素？65.基因工程的三大基本元件是供体基因、受体细胞、_____________。66._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。67.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？68.Southern杂交的流程中，（）能否去掉非特异性杂交带来的很高的背景A、转膜B、预杂交C、洗膜D、电泳69.HIV为逆转录病毒。70.常规PCR反应的循环次数一般为多少个周期A、40B、20C、30D、5071.单个细胞中所含有的质粒DNA分子数目即为质粒的_________。72.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。73.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活74.常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA连接酶C、T4RNA连接酶D、RNA聚合酶75.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。76.用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。77.通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。78.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段？79.外源DNA离开染色体是不能复制的，将外源DNA与____________连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。80.分离总DNA比分离总RNA困难的原因是无处不在的耐高温的DNA酶的存在。81.试述基因敲除技术的原理？82.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、5个B、2个C、3个D、4个83.第一个被分离的Ⅱ类限制性核酸内切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB84.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链DNA是由自身引物引导合成，但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的