卫健委临检中心 张传宝-精密度和正确度验证-EP15-A2

09:28:521临床检验方法精密度和正确度验证卫生部临床检验中心张传宝09:28:522主要内容•

前言•

术语和定义•

精密度验证•

正确度验证•

小结09:28:523主要内容•

前言•

术语和定义•

精密度验证•

正确度验证•

小结09:28:524前言—相关法规或者标准要求《医疗机构临床实验室管理办法》

(2006)

第三章

医疗机构临床实验室质量管理

第二十四条

医疗机构临床实验室应当保证检测系统的完整性和有效性，对需要校准的检验仪器、检验项目和对临床检验结果有影响的辅助设备定期进行校准。《医疗机构临床实验室管理办法》三级甲等医院考核检查表

3章24条：

20.1

是否对检测系统(仪器设备、试剂、校准品)进行了有效性的评价？包括对准确度、精密度、分析测量范围、参考范围、分析干扰等的评估。

20.2

每个项目是否具备详尽的校准程序？是否记录了校准结果?

20.3是否能提供校准品的溯源证明?

20.4是否建立了分析测量范围的验证程序?

20.5是否验证了分析测量范围?5相关法规或标准要求ISO

15189医学实验室——质量和能力要求(2012)：5.5

检测程序5.5.1

检测程序的选择、验证和确认

总则实验室应选择针对预期用途进行过确认的检测程序，...

检验程序验证未做修改的经确认的检测程序，在常规使用之前，实验室应进行独立验证实验室应从制造商或方法开发者获得用以核实检测程序性能特征的信息实验室进行的独立验证应通过获取客观证据（以性能指标形式）证实检测程序的性能要求得以满足6相关法规或标准要求ISO

15189医学实验室——质量和能力要求(2012)：

检测程序的确认实验室应对以下检测程序进行确认：a)非标方法；b)实验室自行设计或建立的方法；c)超预期范围使用的标准方法；d)修改过的确认方法注：检测程序的性能指标包括：正确性、准确性、精密度、测量不确定度、分析特异性、分析灵敏度、检测限、定量限、测量区间、诊断特异度和诊断敏感度09:28:527相关法规或标准要求•

5.5检验过程•

检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可报告范围。•

如果使用内部程序，如自建检测系统，应有程序评估并确认正确度、精密度、可报告范围、生物参考区间等分析性能符合预期用途。•

5.5.2生物参考区间评审内容应包括：参考区间来源、检测系统一致性、参考人群适用性等，评审应有临床医生参加。CNAS-CL38医学实验室质量和能力认可准则

在临床化学检验领域的应用说明09:28:528相关法规或标准要求The

U.S.

CLIA

RulesSec.

493.1253

Standard:

Establishment

and

verification

of

performance

specifications(a)

Applicability.

Laboratories

are

not

required

to

verify

or

establish

performance

specifications

for

anytest

system

used

by

the

laboratory

before

April

24,

2003.(b)

--(1)

Verification

of

performance

specifications.

Each

laboratory

that

introduces

an

unmodified,

FDA-cleared

or

approvedtestsystemmust

do

the

following

before

reportingpatienttest

results:(i)

Demonstrate

that

it

can

obtain

performance

specifications

comparable

to

those

established

by

themanufacturerforthe

following

performancecharacteristics:(A)

Accuracy(trueness)FDA批准的方法(B)

Precision(C)Reportablerangeof

test

resultsfor

thetest

system(ii)

Verify

that

the

manufacturer's

reference

intervals

(normal

values)

are

appropriate

for

thelaboratory'spatientpopulation.(2)

Establishment

of

performance

specifications.

Each

laboratory

that

modifies

an

FDA-cleared

orapproved

test

system,

or

introduces

a

test

system

not

subject

to

FDA

clearance

or

approval

(includingmethods

developed

in-house

and

standardized

methods

such

as

text

book

procedures,

Gram

stain,

orpotassium

hydroxide

preparations),

or

uses

a

test

system

in

which

performance

specifications

are

notprovided

by

the

manufacturer

must,

before

reporting

patient

test

results,

establish

for

each

test

systemthe

performance

specifications

for

the

following

performance

characteristics,

as

applicable:(i)

Accuracy（Trueness）.(ii)

Precision.a)

修改FDA批准方法b)

未经FDA批准方法c)经批准，但厂家未提供性能指标(iii)

Analytical

sensitivity.(iv)

Analytical

specificity

to

include

interfering

substances.(v)

Reportable

range

of

test

results

for

the

test

system.(vi)

Reference

intervals

(normal

values).(vii)

Anyother

performance

characteristic

required

for

test

performance.09:28:529前言-WHEN方法/系统首次在实验室使用；EQA/PT

结果未通过，采取纠正措施后；09:28:5210前言-HOW

实验室列出方法的性能指标要求（法规或者临床要求）；

实验室选择合适的方法/系统，其性能指标需满足实验室的要求；

实验室验证分析系统在实验室能否达到厂家的性能指标。09:28:5211新版参考文件09:28:5212主要内容•

前言•

术语和定义•

精密度验证•

正确度验证•

小结09:28:5213术语和定义

准确度

正确度

精密度

溯源性

互通性09:28:5214测量准确度测量准确度

measurement

accuracy准确度（accuracy）被测量的测得值与其真值间的一致程度。注

1：概念“测量准确度”不是一个量，不给出有数字的量值。当测量提供较小的测量误差时就说该测量是较准确的。注

2：术语“测量准确度”不应与“测量正确度”、“测量精密度”相混淆，尽管它与这两个概念有关。注

3：测量准确度有时被理解为赋予被测量的测得值之间的一致程度。【JJF1001-2011

通用计量术语及定义

5.8】09:28:5215测量正确度测量正确度

measurement

trueness正确度

trueness无穷多次重复测量所得量值的平均值与一个参考量值间的一致程度注1.测量正确度不是一个量，不能用数值表示。注2.测量正确度与系统测量误差有关，与随机测量误差无关。注3.“测量正确度”和“测量准确度”不可混用【JJF1001

5.9】09:28:5216测量精密度

测量精密度

measurement

precision

精密度

precision在规定条件下，对同一或类似被测对象重复测量所得示值或测得值间的一致程度。注1.测量精密度通常用不精密度以数字形式表示，如在规定测量条件下的标准偏差、方差或变异系数。注2.规定条件下可以是重复测量条件、期间精密度测量条件或复现性测量条件。注3.测量精密度用于定义测量重复性、期间测量精密度或测量复现性。【JJF1001

5.10】精密度:在规定条件下获得的独立测量结果之间的接近程度。不精密度（imprecision):在规定条件下获得的独立测量结果之间的离散程度。09:28:5217精密度与不精密度

精密度

Precision

重复性

(repeatability)

中（期）间精密度

(intermediate

precision)

重现性

不精密度

Imprecision

重复性标准差/CV

中间标准差/CV

重现性标准差/CV09:28:5218重复性及其条件

重复性：在相同检测条件下，对同一被测量连续测定结果间的一致程度。

重复性条件：七个相同：方法、检测项目、机构、时间、校准、操作者、设备09:28:5219期间精密度及其条件

期间精密度(intermediate

precision)：在期间精密度条件下的精密度。

期间精密度条件：

三个相同：方法、检测项目、机构；

四个变化：时间、校准、操作者、设备

四个包括：批间、天间、设备内、实验室内09:28:5220重/再现性及其条件

重/再现性在不同测试条件下，对同一检测项目进行检测所得结果的接近程度。

重/再现性条件：两个相同：方法、检测项目五个不同：实验室、操作者、设备、（时间、校准）09:28:5221通俗理解•

重复性是指在相同条件（

时间、校准、操作者、仪器等）下获得的精密度，即所谓的批内精密度；•

中间精密度是指在一种或几种条件因素发生变化，但在同一实验室内获得的精密度；•

重现性则是在不同实验室、不同条件下获得的精密度，故又称实验室间精密度。陈文祥、申子瑜、郭健、杨振华,临床检验量值溯源中的重要术语与概念及有关问题中华检验医学杂志2005年2月第28卷第2期09:28:5222通俗理解

准确度(accuracy):

一次测量的结果与被测量真值的接近程度。

正确度(trueness):真实度，大量测量的均值与真值的接近程度。

精密度(precision):

在规定条件下获得的独立测量结果之间的接近程度。不能用数字表示其优劣，只能用“良好”、“不足”等词汇描述，其反义概念可以用数字表示，分别为不确定度、偏差标准差或变异系数

。陈文祥、申子瑜、郭健、杨振华,临床检验量值溯源中的重要术语与概念及有关问题中华检验医学杂志2005年2月第28卷第2期09:28:5223总误差变异系数(CV)：不精密度，随机误差偏倚(B)：不正确的程度，系统误差总误差(TE)：不准确度，TE=B+1.65CV

（or

1.96CV)09:28:5224靶值，目标09:28:5225检测方法09:28:5226正确、精密、准确？09:28:5227正确、精密、准确？09:28:5228理想的方法•

百发百中，百步穿杨！09:28:5229准确度、正确度和精密度准确度

(ACCURACY)不确定度(UNCERTAINTY)总误差（Total

Error)EQA正确度

(TRUENESS)精密度

(PRECISION)均值与真值的接近程度系统误差重复测量结果之间的接近程度随机误差标准差(SD)IQC偏倚(BIAS)EQA09:28:5230总误差、变异系数、偏倚何为可接受变异？250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0MeanMV2sMeanMV2s2s2s3s3s3s3s实验室B：CV=

2%实验室A：CV=

6%13579111315171921232527291357911

13

15

17

19

21

23

25

27

2909:28:5231总误差、变异系数、偏倚

：何为可接受偏倚？250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0TVMeanMV2sTVMeanMV2s2s2s3s3s3s3s实验室B：CV

=

2%Bias=

6%实验室A：CV

=

6%Bias=

2%13579111315171921232527291357911

13

15

17

19

21

23

25

27

2909:28:5232总误差、变异系数、偏倚

PSA分析质量(2)：何为可接受总误差？250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0250.0240.0230.0220.0210.0200.0190.0180.0170.0160.0150.0TVMeanMV2sTVMeanMV2s2s2s3s3s3s3sTETETETE实验室A：CV

=

6%Bias=

2%TE=

12%实验室B：CV

=

2%Bias=

6%TE=

9%13579111315171921232527291357911

13

15

17

19

21

23

25

27

2909:28:5233主要内容•

前言•

术语和定义•

精密度验证•

正确度验证•

小结09:28:5234精密度验证要求：•

熟练使用仪器步骤•

实验前准备•

实验与数据处理•

结果判断09:28:5235精密度验证

样本类型：

厂家质控品或校准品

自制样本

样本浓度

至少含二个浓度水平。

应尽可能与厂家精密度评价时所用样本的浓度一致。09:28:5236样本的选择

样本类型

单个患者来源的样本、混合样本、厂商建立精密度性能使用的商品质控材料。

样本浓度

至少含二个浓度水平。

理想情况下，其中之一为临床决定限（cutoff

值）或者参考限；或者仅代表正常与异常水平。

如果只是验证厂家性能，则尽可能与厂家建立精密度时所用浓度一致。

避免过高或者过低的值，以防超过说明书规定的范围。09:28:523709:28:5238精密度验证

样本类型：

厂家质控品或校准品

自制样本

样本浓度

至少含二个浓度水平。

应尽可能与厂家精密度评价时所用样本的浓度一致。应确定医学决定水平处的精密度09:28:5239精密度验证医学决定水平（/Article/200908/2009-08-10/147872.shtml）五十、α-胎儿球蛋白（AFP）参考值0～25ug/L决定水平25ug/L临床意义及措施当发生睾丸癌时，血清AFP常超过25ug/L1000ug/L60%以上的肝细胞癌或睾丸的非精原细胞的生殖细胞瘤患者AFP超过此值，而一般肝疾患如肝炎、肝硬化等，仅30%以下的病人超过此值。所以，当水平在鉴别两类肝病中有决定性作用，另当胎儿有神经管缺陷时，母体血清AFP更高于此值。09:28:5240精密度验证-概述实验周期•

精密度验证应进行5d，每天一个批次。实验方法•

校准方法•

校准频率•

室内质控•

样本测量：每一批次对各浓度样本分别重复测量3次。09:28:5241数据处理测量数据有效性判断•

实验日质控数据确认：按室内质控规则评价数据有效性。•

离群值判断标准：单次测量数据超出总均值±4SD。•

数据剔除量：小于总测量数据量的5%(数据超过20个时)。有效数据处理•

填表•

重复标准差•

期间标准差09:28:5242数据处理--填表项目第1批第2批第3批第4批第5批2/20TF2/21JL2/22GG2/23KW2/24SR日期/操作人员第一次测量结果：

X1第二次测量结果：

X2第三次测量结果：

X3每批测量结果之和：每批测量结果均值：푋푑140140140420140.00138139138415143144144431143143142428142143141426138.3

143.7

142.7

142.00.1089

0.4489

0.1089

0.000每批第一次测量结果与每批测量结果均值之差的平方：(X

-푋

）21푑每批第二次测量结果与每批测量结果均值之差的平方：000.4489

0.1089

0.1089

1.00000.1089

0.1089

0.4489

1.0000(X

-푋

）22푑每批第三次测量结果与每批测量结果均值之差的平方：(X

-푋

）23푑09:28:5243数据处理--填表项目第1批第2批第3批第4批第5批每批单次测量结果与每批测量结果均值之差的平方和：00.66670.66670.6667

2.0000每批测量批内方差：00.3330.3330.3331.000每批测量结果均值与总均值之差的平方：1.76899.0005.47561.7956

0.4489注：表中：n——每批重复测量次数（3）；X

——每批单次测量结果；푖푋

——每批测量结果均值；푑푠푑

——每批测量重复标准差；푟푢푛푋——总均值，即所有批次测量结果均值。141.3309:28:5244数据处理--重复标准差（S푟）09:28:5245数据处理--填表项目第1批第2批第3批第4批第5批每批单次测量结果与每批测量结果均值之差的平方和：2.000000.6667

0.6667

0.6667每批测量批内方差：00.333

0.333

0.333

1.000每批测量结果均值与总均值之差的平方：0.4481.7689

9.000

5.4756

1.79569注：表中：n——每批重复测量次数（3）；X

——每批单次测量结果；푖푋

——每批测量结果均值；푑푠푑

——每批测量重复标准差；푟푢푛푋——总均值，即所有批次测量结果均值。141.3309:28:5246数据处理--期间标准差（Sb）•

计算总均值（푋）=141.33

计算批间方差S푏209:28:5247数据处理--填表项目第1批第2批第3批第4批第5批每批单次测量结果与每批测量结果均值之差的平方和：00.66670.66670.6667

2.0000每批测量批内方差：00.3330.3330.3331.000每批测量结果均值与总均值之差的平方：1.76899.0005.47561.7956

0.4489注：表中：n——每批重复测量次数（3）；X

——每批单次测量结果；푖푋

——每批测量结果均值；푑푠푑

——每批测量重复标准差；푟푢푛푋——总均值，即所有批次测量结果均值。141.3309:28:5248数据处理--期间标准差（Sl）•

Sl-实验室内（精密度）标准差09:28:5249数据处理--重复标准差（S푟）09:28:5250数据处理--期间标准差（Sb）•

计算总均值（푋）=141.33

计算批间方差S푏209:28:5251数据处理--期间标准差（Sl）•

Sl-实验室内（精密度）标准差•

重复性标准差09:28:5252结果判读重复精密度（S푟）12计算值S

（0.632mg/dL）<厂家声称值σ

(1.0mg/dL)푟푟表明厂家声称的重复精密度可靠，不需要再计算验证值实验室内标准差（푺풍）计算值푺

（2.21mg/dL）>厂家声称值σ

(2.0mg/dL)풍풍需计算验证值09:28:5253验证值的计算重复精密度验证值

v:自由度=D.(n-1)

=

5x2

=

10

C:a

=0.05，自由度为10，卡方（Chi-Square)分布的临界值验证值=实验室内精密度验证值验证值=09:28:5254精密度验证--重复精密度验证值计算Sr

<厂家指标，验证通过Sr

>厂家指标：

计算验证值=

v:自由度=D.(n-1)=5x2

=10

C:a=0.05，自由度为10，卡方（Chi-Square)分布的临界值，为20.48。本实验中，Sr

=

0.63，厂家指标是1，验证通过。09:28:5255精密度验证—实验室内精密度验证Sl<厂家指标，验证通过Sl>厂家指标：

计算验证值09:28:5256精密度验证—实验室内精密度验证值计算计算有效自由度：C=11.14验证值09:28:5257精密度验证—实验室内精密度验证Sl

<厂家指标，验证通过；Sl

>厂家指标：

计算验证值•

结论：实验结果虽然超过厂商指标，但是小于验证值，故认为实验结果同厂商申明的实验室内精密度一致，验证通过。09:28:5258验证不通过或者结果不好的可能原因•

试剂储存不当•

试剂处理不当•

样本处理不当或不稳定•

基质不同：实验样本和制造商评价精密度所用物质之间的基质不同，例如，血浆和非血浆液体控制物•

手工移液（加样）技术不好•

仪器设备维护不到位•

实验室环境影响：如温度、湿度、电子或无线频率干扰09:28:5259正确度验证•

测定已知浓度的样本，将测定结果与样本靶值(TVs)相比。•

首先要规定一个允许的偏倚（Bias），09:28:5260偏选择样本，最好和精密度验证样本相同计算均值和TV间的偏倚计算TV的验证区间倚评估按照厂家说明书要求准备样本均值在验证区间内？bias<

允许的偏倚？按照精密度验证实验的方式测定样本流程使用ANOVA计算平均值和SD计算靶值和测定均值的标准误被评价方法的偏倚在可接受范围内联系厂商计算TV的自由度09:28:5261正确度确认和验证（评价）

评价的是什么什么？

偏倚；系统误差。

如何评价？

测定准确定值的物质•

标准物质•

PT物质•

正确度验证物质

和准确可靠的方法比较09:28:5262测定准确定值的物质•

测定标准物质例：GBW

09175b

GLU

认定值(Cref)：

7.69Mmol/L；实验室测定20次，均值(풙)7.00mmo/L;问：绝对偏倚和百分偏倚分别是多少？b=푥-퐶푟푒푓

=7.00-7.69=-0.69(mmol/L)b

=(=

푥-퐶

)/퐶

100%=

-0.69/7.69

×100%

=-8.97%rel푟푒푓푟푒푓问题：这些结果是否符合要求呢？09:28:5263测定准确定值的物质•

测定能力验证物质来源：CNAS-TRL-001:2012

医学实验室-测量不确定度的评定与表达09:28:5264测定准确定值的物质•

测定能力验证物质09:28:5265测定准确定值的物质样本编号201611你室结果135靶值126487240560341偏差9百分偏差7.14%3.29%5.00%3.39%3.81%4.53%4.33%20161250316201613252122016145791920161535413算术平均值几何平均值（A+B+C+D+E）/513.813.45퐴.

퐵.

퐶.

퐷.

퐸푨ퟐ

+

푩ퟐ

+

푪ퟐ

+

푫ퟐ

+

푬ퟐퟓퟐ均方根平均值14.24.75%问题：这些结果是否符合要求呢？09:28:5266和准确可靠的方法比对准确的方法：参考方法、公认的可靠方法•

特点：精密度好、正确度高•

其他：特异性、分析测量范围、参考区间等•

比对方法的选择−

厂家说明书中的方法：厂家声称的标准−

现有方法（欲改动、用到新仪器上时）09:28:5267正确度验证•

用患者样本比对进行正确度验证•

用参考物质进行正确度验证•

正确度验证计划-NCCL

EQA09:28:5268正确度验证—用患者样本比对样本测量周期和测量次数

20份患者样本

4-7样本/天，3-5天

每个样本测量一次

与精密度验证同时进行

避免已知干扰物质

应根据项目特点规定储存条件，冷冻样本应避免反复冻融比对实验需考虑的因素实验方法

用两个测量程序对样本进行单次测定

弃去偏差异常大样本，重新测定另一样本；

查找导致异常偏差的原因。

校准方法

校准频率

室内质控09:28:5269正确度验证—用患者样本比对数据处理结果判读判读标准.

计算两个方法间的绝对偏移（푏）如果b（

푏

）绝对值≤厂家rel声称值,则验证厂家声称值可靠。.

绘制偏移图如果b（

푏

）绝对值＞厂家rel声称值,则需要计算验证区间.

绝对偏移标准差（Sb）验证区间的计算绝对偏倚验证区间相对偏倚验证区间•

相对偏移:brel•

相对偏移标准差：Srel(b)09:28:5270正确度验证--用患者样本进行比较实验程

比对程bi%bi序序127677-16-1.304.96-2.293.0616.00-0.862.440.002.581.090.424.351.30-1.980.003.709.26-1.084.411.1647.222.3614.2712725630329121262294253-6945463454234841-31781543989315438892091011011

24012

7213

31214

992396913308101375162544-2015

37516

16861759518

18319

21320

436185204431-295和502.54.33平均值标准差09:28:5271正确度验证--用患者样本进行比较偏倚图：葡萄糖测量程序比对12.5107.552.50-2.5-5-7.5050100150200250300350400450500比对程序测定值17.5015.0012.5010.007.505.002.500.00-2.50-5.00050100150200250300350400450500比对程序测定值09:28:5272计算偏倚的CIn’

P(2):0.050.020.01P(1):

0.0250.010.005112.706

31.821

63.657•

95%

CI,

α=0.05（双侧）；t=2.861•

99%

CI,

α=0.01（双侧）；t=2.09319202.0932.0862.5392.5282.8612.845•

푏的CI：푏=2.5mg/dL•

99%퐶퐼:

푏

±2.861.

푆푏/

푛=[-0.27,

5.27]mg/dL•

95%퐶퐼:

푏

±2.093.

푆푏/

푛=[0.47,

4.53]mg/dL푆

=

4.33mg/dL;푏n=20•

b%的CI:•

99%퐶퐼:푏%±2.861.

푆푏%/

20=[-0.37,

5.09]%•

95%퐶퐼:푏%±2.093.

푆푏%/

20=[

0.36,

4.36]%푏%=2.36%푆푏%

=

4.36;n=2009:28:5273判断如果偏倚小于厂家指标（实验室指标），验证通过；如果偏倚大于厂家指标，但是在验证限的范围内，验证通过。

用户可增加10-20样本，用所有样本的结果来进行统计，以增加统计效能。

如果偏移不在验证限范围内，验证不通过，联系厂家以求协助。3.36%[2.36%,

4.36%]2.2.0%.8%09:28:5274正确度验证•

用参考物质进行正确度验证09:28:5275正确度验证—测量参考物质参考物质：一种材料或者物质，其一种或多种特性值足够均匀并被良好确定，用于校准测量系统性、评价测量床徐或为材料赋值。包括校准物质（calibrationmaterial）和正确性质控物质（trueness

controlmaterial)。具有校准和评价测量系统两个主要功能。有证参考物质：附有证书的参考物质，其一种或多种特性值用可建立溯源的程序确定，使之可溯源至准确复现的表示该特性值的测量单位，每种确定的特性值都有给定置信水平的不确定度。09:28:5276正确度验证--测定参考物质参考物质来源

新鲜冰冻人血清有证参考物质（/en/committtees/jc/jctlm-db/;/ts/msd/srm/)；国标−

SRM956c：Li\Na\Ca\K\Cl\Mg，高、中、低3个浓度水平，2ml/支；−

SRM1951b：TC\TD\HDL\LDL，高、低2个浓度水平，1ml/支；−

SRM967a：Crea，高、低2个浓度水平，1ml/支；−

SRM965b：Glu，四个浓度水平，2ml/支；−

GBW09152：Na\Cl\Mg\K\Ca\Fe\Cu\Zn\Se，2.5ml/支；

能力证计划中的标物，如CAP的正确度验证，卫生部临床检验中心代谢物正确度验证、脂类正确度验证计划；

厂商提供的正确度或质控材料，只限于本系统；

其他室间质评样本，组内实验室数量越大越好；

第三方提供的物质，定值实验室数量小，不确定度大；

其它09:28:5277一级标准物质GBW09174冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质GBW09175冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质GBW09176冰冻人血清中葡萄糖、肌酐、尿酸、尿素标准物质GBW09177冰冻人血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、α-淀粉酶活性浓度标准物质GBW09178血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质GBW09179血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质GBW09180血清总胆固醇、总甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇标准物质GBW09181人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质GBW09182人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质GBW09183人血红蛋白溶液中糖化血红蛋白标准物质电话：58115059胡翠华；

shenghua@09:28:5278正确度验证-测定参考物质•

参考物质：EQA材料•

组内均值：40mg/dL•

组内s

：1.73mg/dL2•

组实验室数：135•

方法和数据：•

测定次数：每天2次，测定5天（n=5）；•

测定均值：37.7；总体s1=0.95（mg/dL）•

判断：正确度验证是否通过？09:28:5279判断：正确度验证是否通过？•

方法1：计算偏倚（En值）•

方法2：计算测定值验证区间•

方法3：计算靶值验证区间•

设定a=0.01或0.05•

假定参考物质定值无偏倚；•

自由度2n-1=9•

查双侧概率（a）或单侧（a/2），自由度9的t值。

自由度，2n-1（2次重复，n批）=2x5-1=9

t

=

2.262,t

,

=

3.250.05,90.01

9

EXCEL公式；

=TINV(0.01，9)09:28:5280计算过程•

푏

=

|푥

−푡arget|

=

|37.7

−

40|

=

2.3

mg/dL22푠1.732•

푠

=2

==

0.022푎푛135222푠0.95102•

푠

=1

==

0.09푥푛1푏2.32.3•

퐸푛

====

6.90.022+0.090.33522푠

+푠푎푥•

t

=2.262,•

En>t0.01,9

验证未通过0.05,9•

t

,

=

3.250.01

9•

方法和数据：•

参考物质：EQA材料•

组内均值：40mg/dL•

组内s

：1.73mg/dL•

测定次数：每天2次，测定5天（n1=5）；2•

组实验室数n

：135•

测定均值：37.7；总体s1=0.9（mg/dL）209:28:5281其他两种计算方法•

方法2：计算测定值验证区间•

方法3：计算靶值验证区间•

区间：푥

±

푡

푠

+

푠

=

37.7

±

3.25

×

0.335

=

[ퟑퟔ.

ퟔ,

ퟑퟖ.

ퟖ]22,9.푎푥α•

判定：[36.6,38.8]未包括40，验证未通过；•

区间:

푡푎푟푔푒푡

±

푡

푠

+

푠

=

40

±

3.25

×

0.335

=

[ퟑퟖ.

ퟗ,

ퟒퟏ.

ퟏ]22,9.푎푥α•

判定：[38.9,41.1]未包括40，验证未通过；09:28:5282测定有证标准物质？项目TC量值不确定度*,U0.049单位3.3990.6471.2921.902mmol/Lmmol/LTTG0.017HDL-CLDL-C0.025mmol/Lmmol/L0.055*扩展不确定度，包含因子k=2；u=U/2，相当于前文的푠푎09:28:5283实际工作中如何处理标准差过小的问题项目量值不确定度*,U(K=2)单位TC3.3990.049mmol/L•

u=U/2,•

u=sa푏•

퐸푛

=2

2푠

+푠푎

푥09:28:5284正确度验证--测定参考物质如果验证区间包括定值数字，验证通过；

验证区间包括定值，但是偏倚（或偏倚%）较大，可增加2-5个样本（不同实验批），用所有数据进行统计以增加功效。

如果验证区间未能将定值数字包括，验证不通过：计算偏倚和允许总误差是否符合临床需要或者实验室要求；联系厂家以求协助09:28:5285正确度验证•

用患者样本比对进行正确度验证•

用参考物质进行正确度验证•

正确度验证计划-NCCL

EQA09:28:5286EQA-正确度验证计划－代谢物及总蛋白正确度验证（项目及靶值确定方法）葡萄糖（ID-LC/MS/MS）、尿素（ID-GC/MS）、尿酸（

ID-LC/MS/MS

）、肌酐（

ID-LC/MS/MS

）、总蛋白（分光光度法）－脂类正确度验证（项目及靶值确定方法）总甘油三酯（ID-LC/MS/MS）、总胆固醇（ID-GC/MS）、高密度脂蛋白胆固醇（超速离心-HPLC法）、低密脂蛋白胆固醇（超速离心-HPLC法）－酶学正确度验证ALT,AST,CK,GGT,LDH,ALP,AMY(IFCC37℃参考方法)－糖化血红蛋白正确度验证HbA1c－无机离子正确度验证K,Na,Ca,Mg以上正确度验证项目均采用新鲜冰冻血清/全血样本。09:28:5287正确度验证•

样本为两个浓度水平的新鲜冰冻血清，5月初将两个浓度各3只样本使用CO2干冰运送到参加实验室，实验室收到样本后保存在20℃以下冰箱中，并分别于5月15日、5月22日和5月29日取每个浓度水平各1只在一个实验批次内重复测定5次；于5月31日一次性将所有测定结果通过网络进行上报。在此期间，我们采用参考方法对样本进行定值并作为靶值，计算实验室测定均值与靶值之间的相对偏差，作为实验室偏倚水平，与允许偏倚进行比较。09:28:5288EQA-正确度验证计划项目正确度验证新鲜冰冻血清人血清常规EQA冻干粉样本类型基质人或者动物基质有基质效应运输无CO2干冰常温靶值确定作用参考方法、不分组分组、中位数正确度验证/溯源性验证

实验室间结果可比性成本及费用测定成本高、收费高重复测定收费相对较低单次测定09:28:5289近年来NCCL

正确度验证计划参加情况计划2010

2011

2012

2013

2014

2015小分子代谢物验证脂类正确度验证3643597810412212387156183195120184210237152228250273182酶学正确度验证糖化血红蛋白正确度验证开展正确度验证计划的项目血脂和脂蛋白糖化血红蛋白(HbA1c)–

CDCAbell-Kendall胆固醇参考方法–

CDCHDLC指定比对方法–

HPLC胆固醇候选参考方法–

HPLC甘油三酯候选参考方法–

超速离心/HPLC

HDLC和LDLCHPLC/LC-MS-MS

IFCC参考方法电解质/金属离子–

ICP/MS钠离子–

ICP/MS镁离子–

ICP/MS钾离子–

ICP/MS钙离子代谢产物/底物–

ID/GC-MS和ID/LC-MS-MS

胆固醇–

ID/GC-MS和ID/LC-MS-MS

甘油（三酯）–

ID/LC-MS-MS

葡萄糖–

ID/LC-MS-MS

肌酐–

ID/LC-MS-MS

尿酸–

ID/GC-MS

尿素–

分光光度法

胆红素酶,IFCC

37℃参考方法：–

肌酸激酶–

乳酸脱氢酶–

丙氨酸氨基转移酶–

门冬氨酸氨基转移酶–

谷氨酰转移酶–淀粉酶–

碱性磷酸酶非肽激素–

ID/GC-MS

孕酮–

ID/LC-MS-MS

睾酮–

ID/LC-MS-MS

T4–

ID/LC-MS-MS

皮质醇蛋白质–

分光光度法

总蛋白09:28:5291不同的计划-不同的合格率3种外部质量保证计划中不合格实验室统计项目IQCTV1TV2EQA1

EQA2综合15.4%41.5%21.5%1.5%

4.6%

52.3%CREA(10/65)

(27/65)

(14/65)

（1/65)

(3/65)

(34/65)40.0%53.8%32.3%4.6%

3.1%(

70.1%UREA(26/65)

(35/65)

(21/65)

(3/65)

2/65)

(46/65)09:28:529209:28:52如何评价？09:28:52942015-1仪器实验室数平均数

中位数

标准差

CV(%)

最大值

最小值所有仪器Tosoh

G8Bio-RadD-10Bio-RadVariantIIBio-RadVariantII

TurboARKRAY

HA-8160ARKRAY

HA-8180Primus

HPLCHitachi

系列生化分析仪Roche

cobasc50117634301919161296554332111116.36.56.26.36.36.05.95.96.36.56.46.66.36.16.36.56.86.56.76.46.56.36.26.46.36.56.26.36.36.06.06.06.56.46.56.56.26.26.30.280.150.200.170.140.200.340.380.420.260.150.180.280.420.264.442.313.232.702.223.335.766.446.674.002.342.734.446.894.137.26.96.86.66.76.46.36.56.97.16.77.06.86.76.65.46.15.65.96.05.45.04.95.66.16.16.45.75.55.8惠中MQ-2000PTTosoh

G7BeckmanAU

Systems其它（请详述）BeckmanSynchron

系列生化分析仪AbbottArchitect

System/AerosetSimens

ADVIA

1650/2400Bio-RadVariantDadeBehring

DimensionRoche

cobasc311/c502/c701惠中MQ-2000AbbottArchitect

ci4100/ci8200/ci16200Roche

其它系列生化分析仪迈瑞系列生化分析仪靶值：6.3%111109:28:52952015-2仪器实验室数

平均数

中位数

标准差

CV(%)

最大值

最小值所有仪器Tosoh

G8Bio-RadD-10Bio-RadVariantIIBio-RadVariantII

TurboARKRAY

HA-8160ARKRAY

HA-8180Primus

HPLCHitachi

系列生化分析仪Roche

cobasc50117634301919161296554332111117.88.07.77.87.87.47.37.27.78.07.98.37.97.57.88.28.58.18.27.97.87.87.57.97.88.07.77.87.87.47.47.37.97.97.98.27.97.57.90.350.160.240.210.140.320.330.420.700.210.210.230.270.540.234.492.003.122.691.794.324.525.839.092.632.662.773.427.202.959.08.48.58.38.28.27.87.98.78.68.28.78.48.38.16.67.67.27.47.56.66.16.26.37.57.57.97.46.87.4惠中MQ-2000PTTosoh

G7BeckmanAU

Systems其它（请详述）BeckmanSynchron

系列生化分析仪AbbottArchitect

System/AerosetSimens

ADVIA

1650/2400Bio-RadVariantDadeBehring

DimensionRoche

cobasc311/c502/c701惠中MQ-2000AbbottArchitect

ci4100/ci8200/ci16200Roche

其它系列生化分析仪迈瑞系列生化分析仪靶值：7.8%111109:28:52962015-3仪器实验室数

平均数中位数标准差

CV(%)

最大值最小值所有仪器Tosoh

G8Bio-RadD-10Bio-RadVariantIIBio-RadVariantII

TurboARKRAY

HA-8160ARKRAY

HA-8180Primu