植物胚胎培养技术

关于植物胚胎培养技术第1页，课件共30页，创作于2023年2月一、植物胚胎培养的概念（EmbryoCulture）包括成熟胚培养、幼胚培养、胚珠培养、子房培养、胚乳培养、试管受精等类型。1904年Hanning最早成功培养萝卜和辣根的胚。第2页，课件共30页，创作于2023年2月第3页，课件共30页，创作于2023年2月第4页，课件共30页，创作于2023年2月胚胎培养技术的应用：

A.主要用于克服远缘杂交的不亲合;B.促进胚的发育;C.克服胚的休眠等;D.用于胚胎学理论研究。第5页，课件共30页，创作于2023年2月二、植物胚胎培养技术（一）离体胚培养：包括成熟胚及幼胚的培养。植物胚胎发生过程：原胚－－球形胚－－心型胚－－鱼雷胚－－子叶胚

第6页，课件共30页，创作于2023年2月球形胚前期球形胚心型胚前期鱼雷胚第7页，课件共30页，创作于2023年2月第8页，课件共30页，创作于2023年2月成熟胚培养：

成熟胚为子叶期以后的胚，其在简单的培养基上即可萌发生长。对营养条件要求不严格。主要用来繁殖不易萌发植物，或研究胚和胚乳及子叶的关系等。第9页，课件共30页，创作于2023年2月台湾红豆杉成熟胚培养第10页，课件共30页，创作于2023年2月

牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖Matureembryocultureandrapidpropagationoftreepeony第11页，课件共30页，创作于2023年2月2.幼胚培养：

幼胚（心形胚阶段）对培养条件和营养的要求都较高。需要多种的营养和适宜的培养条件。影响幼胚培养成功的因素主要包括幼胚发育时期、培养基及培养条件等。第12页，课件共30页，创作于2023年2月第13页，课件共30页，创作于2023年2月（1）天然提取物及某些蛋白制品；

1934年银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用；1941年曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚)。此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。第14页，课件共30页，创作于2023年2月（2）渗透压的作用：

胚发育早期要求较高的的渗透压，而随着胚的发育逐渐降低。第15页，课件共30页，创作于2023年2月第16页，课件共30页，创作于2023年2月（3）植物激素及生长调节剂的作用：加入适当浓度的生长素、细胞分裂素可以促进胚的发育，单一激素影响发育。（4）其他因素：

pH值以5.4-5.8适宜多数幼胚。温度25-30oC适宜多数植物。第17页，课件共30页，创作于2023年2月（二）胚珠和子房培养：

1、胚珠培养：

包括授粉胚珠和未授粉胚珠的培养。

1942年最早在兰花上获得成功，缩短了授粉到成熟的时间。

1980年成功培养了未授粉的非洲菊、烟草的胚珠，获得了单倍体植株。第18页，课件共30页，创作于2023年2月

显花植物花的结构图示第19页，课件共30页，创作于2023年2月第20页，课件共30页，创作于2023年2月第21页，课件共30页，创作于2023年2月

影响胚珠培养的因素：（1）材料选择：生理状态、基因型、发育时期。未授粉胚珠：开花前1-6天，授粉胚珠：授粉后1-120天不等，较晚时期有利于胚的发育。

（2）材料的消毒：先处理再取出胚珠培养。第22页，课件共30页，创作于2023年2月（3）培养基：

A.植物激素

授粉胚珠：细胞分裂素对胚发育通常有促进作用。未授粉胚珠：外源激素不利于向日葵孤雌生殖。矮牵牛未授粉胚珠培养不需激素，其他需要适当添加。

B.有机物：添加有机附加物可以促进授粉胚珠的发育。

C.蔗糖浓度：3-12%，通常5%，高浓度利于孤雌生殖。（4）胎座组织的影响：促进胚的发育。第23页，课件共30页，创作于2023年2月2、子房培养：包括授粉子房和未授粉子房培养。

1949年和1951年最早在黄瓜、番茄、菜豆、草莓、烟草等植物上获得成功。授粉子房培养形成成熟果实和种子；未授粉子房培养形成小的无籽果实。第24页，课件共30页，创作于2023年2月未授粉子房培养应注意的问题：（1）材料的选择；基因型、发育时期（接近成熟胚囊易于成功）（2）培养基：基本培养基（禾本科N6）、植物激素（配合使用）、蔗糖浓度（3-10%）（3）培养方式：直插优于平放。单倍体胚的来源：多种来源，可以是卵细胞、助细胞或反足细胞等。第25页，课件共30页，创作于2023年2月

（三）胚乳培养：

胚乳在被子植物中是双受精的产物，由极核和雄配子结合成的三倍体组织。而裸子植物胚乳在受精前形成，为单倍体。仅40多种植物进行胚乳培养研究，20种获得再生植株，如猕猴桃等。多存在混倍现象。第26页，课件共30页，创作于2023年2月胚乳培养应注意的问题：（1）确定适宜的发育时期（生长旺盛期）；（2）严格区分胚乳和其他组织；（3）合理使用激素；（4）注意光、温条件（24-280C；黑暗条件）。第27页，课件共30页，创作于2023年2月（四）试管受精：

植物离体受精(Invitrofertilization)或植物试管受精，即在离体的、受人工控制的环境下，通过技术操作来完成植物雌雄配子体的融合。这一技术在60年代随着对受精作用理论研究的深化和生物技术的发展也迅速发