检验中质量控制

生物化学检验技术检验中质量控制内容主要包括：①标本的正确处理和应用②项目操作规程的建立③室内质控和结果分析④登记和填发报告等第二节分析中的质量规范一、建立项目的操作程序

各种检测项目都应建立相应的标准操作程序（SOP），以文件形式存在，便于工作人员随时查阅，并确保在分析过程中得到实施。SOP应由主管负责人编写和修订，并应有主任审核、签字。

第二节分析中的质量规范一、因素的计算酶国际单位的定义：在规定条件下，每分钟催化1umol底物变化所需的酶含量称为1个国际单位，以U/L表示。U/L=K·∆A/t，从公式：

Vt·1000K=—————

可得到K值

ε·d·Vs

其中：Vt为反应系统总体积，Vs为样本体积，ε为摩尔吸光系数，d为光径。

第二节分析中的质量规范

例如：某公司ALT试剂盒在日立生化分析仪的主要参数如下：SampleVolume:20ulReagent1Volume:210ulReagent2Volume:20ul波长：340nm则

Vt·1000250ul×1000K=—————=—————————=2010ε·d·Vs6.22×1cm×20ul第二节分析中的质量规范二、NADH(NADPH)的毫摩尔的消光系数的修正

NADH(NADPH)在反应中的消长被广泛应用于临床化学自动分析中，如ALT、AST、LDH、CK、GLU(HK)均通过NADH(NADPH)的吸光特性测定。其中关于NADA的毫摩尔消光系数，各文献，试剂说明书报道均为6.22（340nm波长），该值要求是单色光、低杂散光，而临床分析仪的干涉滤光片或光栅分光的波长宽度为6—10nm，检测系统的性能也不一致，则NADH在各仪器上的实际毫摩尔消光系数也就不可能一致，所以必须对所用的具体仪器的NADH的毫摩尔消光系数定期校正，以使酶活力的计算值与实际活力相符。第二节分析中的质量规范二、NADH(NADPH)的毫摩尔的消光系数的修正校正方法可用葡萄糖己糖激酶法，其原理如下：1uml葡萄糖被己糖激酶与葡萄糖6-磷酸脱氢酶作用生成1umlNADPH，已知葡萄糖量产生相应量的NADPH，按340nm处吸光度值的增加值，即可算得该仪器的实际毫摩尔消光系数。以日立7150为例，用GLU标准液（5.55mmol/L），样本体积为6ul，GLU测定试剂为300ul，终点时，A=0.6790A·Vt·10000.6790×(300ul+6ul)ε=—————=—————————————=6.24Vs·d·C6ul×1cm×5.55mmol/L6.24即为7150当时条件下的NADPH的毫摩尔消光系数。

第二节分析中的质量规范

关于NADH（NADPH）的毫摩尔消光系数在不同厂商的仪器，同一型号不同仪器，同一仪器不同的时期其实测值可能不一致，故而，在使用中必须认识到这一点，在仪器使用一定时间后，（建议每年一到二次），应对此仪器的NADH的ε值作校正，若ε值偏离理论值则参加全国质控时应该有所反映，既是说，该室有关酶的测定值与靶值均显示出偏高或者偏低的同一倾向。第二节分析中的质量规范

三、基质耗尽的概念酶活力的测定就是测定酶催化某一化学反应的反应速度，根据反应速度变化的方向可分为正反应和负反应。常规检测中的许多酶（如：ALT、AST、LDH）都采用负反应，当分析样品酶活力较高时，在很短的时间内即将基质耗尽（substdplet’n），若仪器不能自动识别，将导致不正确或虚假的结果从而延误疾病的诊治。

有关基质耗尽的参数设置，可参照西北国防医学杂志，2001年8月，第22卷，第5期，442页。第二节分析中的质量规范1、确定质量目标质量目标可用总允许误差的形式表示2、最佳变异和常规变异的设定

最佳变异(optimalconditionsvarianceOCV)表示实验室在最佳条件下测定项目所能达到的最好精密度水平。常规变异(routineconditionsvarianceRCV)表示实验室在常规条件下测定项目所能达到的精密度水平。

RCV<20CV或RCV接近OCV时，可接受；RCV>20CV时，不可接受．二者是反映实验室工作水平的基础指标，也是开展室内质控工作的基础工作。第二节分析中的质量规范3、设定靶值实验室应对新批好的质控品的各个测定项目自行确定靶实验室内使用自己现行的测定系统进行确定，定值质控品的标定值只能作为确定靶值时的参考。（1）暂定靶值的设定为了确定靶值，新批号的质控品应当与当前的质控品一起进行测定，根据20次或更多独立批次获得的测定结果，计算出平均值，作为暂定靶值。以此次暂定靶值作为下一个月室内质控图的靶值进行室内质控，一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积的平均数作为下一个月的质控图靶值。重复上述操作，连续3~5个月。第二节分析中的质量规范3、设定靶值（2）常用靶值的设定以最初20个数据和3~5个月在控数据汇集的所有数据的累计平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此次作为以后室内质控图的平均数。个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则需不断调整靶值。第二节分析中的质量规范四、设定控制限对新批号的质控品应确定控制限，控制限通常是以标准差的倍数表示。临床化学检验不同项目控制限的确定，要根据所采用的控制规则来决定。暂定标准差和常用标准差的设定方法同暂定靶值和常用靶值的设定。第二节分析中的质量规范五、室内质控主要方法1．最常用的是均值-标准差质控图（X-S），以监测分析的精密度。（1）方法：用单一浓度未定值血清，在天内、天间反复测定20次，计算均值（X）、标准差（S）和变异系数（CV）,绘制X-S质控图，得到均值线（X）、警告线（X±2S）和失控线（X±3S）。与质控图制作相同批号的控制血清，每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。第二节分析中的质量规范（2）结果分析正常分布规律：①95%数据落在X±2S内；②不能有连续5次结果在X同一侧；③不能有5次结果渐升或渐降。④不能连续2个点落在X±2S以外；⑤不应该有落在X±3S以外的点。异常表现：①漂移，提示存在系统误差；②趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发生变化；③精度变化，提示测定的偶然误差较大，如仪器、试剂不稳定等。趋势变化漂移精度变化均数－标准差质控图-3S+3S+2S-2Sd均数

①漂移，提示存在系统误差②趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发生变化③精度变化，提示测定的偶然误差较大，如仪器、试剂不稳定等异常表现:第二节分析中的质量规范2．Westgard多规则质控法（1）方法：要求在常规条件下，同时测定2份定值质控血清，并要求质控血清所含测定物浓度最好分别为医学决定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法测定范围的上限和下限。将测定结果分别绘成2份不同浓度的X-S质控图，当有一份质控血清测定值处于质控图上2S～3S界限内，发出“警报”信号时，即应采用其余各条规则对质控图进行全面检查，若符合其中一条，就应把该批分析测定的结果判为“失控”。第二节分析中的质量规范（2）判断规则1）12s警告规则：当2份质控血清中的任意1份测定值处于±2S～±3S界限内，为“警报”信号。2）13s规则：当2份质控血清中的任意1份测定值超过3S界限为“失控”。3）同批两个质控结果同方向超出±2S限值，或同一质控品连续两次质控结果超出±2S限值为“失控”，多由系统误差造成。4）R4s规则：同一批中二个质控结果之差超出4S范围，其中一个超出+2S限值，另一个超出-2S限值，为“失控”，属随机误差过大。第二节分析中的质量规范（2）判断规则5）41S规则：当1份质控血清的测定结果连续4次超过+1S或-1S界限，或2份质控血清的测定结果同时连续2次超过+1S或-1S界限时，为“失控”，一般由系统误差所至。6）10x规则：当1份质控血清测定结果连续10次偏于均值一侧时，或2份质控血清的测定结果同时连续5次偏于x一侧时，为“失控”，是系统误差所至。第二节分析中的质量规范（2）判断规则