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文档简介
实验三富营养化湖中藻量的测定(叶绿素a法)一、实验目的富营养化湖由于水体受到污染,尤以氮磷为甚,致使其中的藻类旺盛生长。此类水体中代表藻类的叶绿素a浓度常大于10微克/升。本实验通过测定不同水体中藻类叶绿素a浓度,以考查其富营养化情况。二、器材与用品1、分光光度计(波长选择大于750nm,精度为0.5-2nm)。2、比色杯(1cm;4cm)。3、台式离心机(3500r/min)4、离心管(15ml具刻度和塞子);冰箱5、匀浆器或小研钵。6、蔡氏滤器;滤膜(0.45微克,直径47mm)。7、真空泵(最大压力不超过300kpa)。8、MgCO3悬液:lgMgCO3细粉悬于100ml蒸馏水中。9、90%的丙酮溶液:90份丙酮+10份蒸馏水。10、水样:两种不同污染程度的湖水水样各2L.三、方法和步骤1、按浮游植物采样方法,湖泊、水库采样500ml,池塘300ml。采样点及采水时间同“浮游植物”。2、清洗玻璃仪器:整个实验中所使用的玻璃仪器应全部用洗涤剂清洗干净,尤其应避免酸性条件下而引起的叶绿素a分解。3、过滤水样;在蔡氏滤器上装好滤膜,每种测定水样取50-500ml减压过滤。待水样剩余若干毫升之前加入0.2mlMgCO3悬液、摇匀直至抽干水样。加入MgCO3可增进藻细胞滞留在滤膜上,同时还可防止提取过程中叶绿素a被分解。如过滤后的载藻滤膜不能马上进行提取处理,应将其置于干燥器内,放冷(4℃4、提取;将滤膜放于匀浆器或小研钵内,加2-3ml90%的丙酮溶液,匀浆,以破碎藻细胞。然后用移液管将匀浆液移入刻度离心管中,用5ml90%丙酮冲洗2次,最后向离心管中补加90%丙酮,使管内总体积为10ml。塞紧塞子并在管子外部罩上遮光物,充分振荡,放冰箱避光提取18-24小时。5、离心:提取完毕后,置离心管于台式离心机上3500r/min,离心10min,取出离心管,用移液管将上清液移
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