薄层色谱分离原理及特点

药物分离与纯化技术课程色谱分离技术--薄层色谱原理及特点薄层色谱原理及特点—色谱分离技术大纲1.薄层色谱原理2.薄层色谱特点薄层色谱原理及特点—色谱分离技术薄层色谱(简称TLC)，属于固-液吸附色谱，是一种微量的分离分析方法，具有设备简单、速度快、分离效果好、灵敏度高以及能使用腐蚀性显色剂等优点。适用于小量样品的分离。薄层色谱是一种非常有用的跟踪反应的手段，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。

常用作柱色谱的先导，可用于柱色谱分离中展开剂的选择，可监视柱色谱分离状况和效果。（一）薄层色谱原理薄层色谱原理及特点—色谱分离技术最常用的薄层色谱属于液-固吸附色谱，把吸附剂(如氧化铝、硅胶)和粘合剂(如煅石膏、羧甲基纤维素钠等)均匀地铺在一块玻璃板上形成薄层，将分离样品滴加在薄层的一端，当利用毛细作用使流动相沿着吸附剂薄层(固定相)移动时，吸附剂借各种分子间力(包括范德华力和氢键)作用于混合物中各组分，各组分以不同的作用强度被吸附。（一）薄层色谱原理薄层色谱原理及特点—色谱分离技术

被分离组分在固定相与流动相之间进行分配或吸附，经过反复无数次的分配平衡或吸附平衡，不同组分的极性化合物就会在薄层板上移动不同的距离。极性强的化合物会“粘”在极性的吸附剂上，在薄板上移动的距离比较短。而非极性的物质在薄层板上移动较大的距离。（一）薄层色谱原理薄层色谱原理及特点—色谱分离技术

化合物移动的距离大小用比移值（Rf值）表达，是介于01之间的数值。

比移值的定义为：组分迁移的距离与展开剂迁移的距离之比。

即：样品原点到斑点中心的距离与样品原点到溶剂前沿的距离之比。如图所示。（一）薄层色谱原理薄层色谱原理及特点—色谱分离技术

薄层色谱常用的吸附剂或支持剂是硅胶或氧化铝。

薄层色谱用的硅胶分为硅胶H不含粘合剂；

硅胶G含煅石膏做粘合剂；

硅胶HF-254含荧光物质，可在波长254nm紫外光下观察荧光；

硅胶GF-254含有煅石膏和荧光剂。

薄层色谱用的氧化铝也分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。（一）薄层色谱原理薄层色谱原理及特点—色谱分离技术薄层色谱是纸色谱和柱色谱的结合，兼具二者的特点。①设备简单，操作方便。只需一块玻璃板和一个层析缸，即可进行复杂混合物的定性与定量分析及分离制备。其原理与经典柱色谱相同，但在敞开的薄层上操作，在检查混合物的成分是否分开以及在显色时都比较方便。（二）薄层色谱特点薄层色谱原理及特点—色谱分离技术②快速，展开时间短。薄层板比滤纸的毛细管作用大，因此展开速度快，薄层色谱一般只需十几分钟至几十分钟。③显色方法选择范围宽。如对于无机物固定相，可采用腐蚀性的显色剂。（二）薄层色谱特点薄层色谱原理及特点—色谱分离技术

④可以选用各种固定相。移动相也可广泛选用，比纸色谱有显著的灵活性。

⑤斑点比较密集，检出灵敏度较高。

⑥可适用于大型制备色谱。如增加薄层厚度，可增大样品的处理量。（二）薄层色谱特点薄层色谱原理及特点—色谱分离技术

⑦展开机理和方式多种多样。

⑧可适用于热不稳定、难挥发药物的分离，但不