南华大学药学与生物科学学院药物毒理学课件第二章-药物的毒物代谢动力学

南华大学药学与生物科学学院药物毒理学课件第二章--药物的毒物代谢动力学第一页，共82页。毒物代谢动力学(toxicokinetics,TK)：

运用药物代谢动力学的原理和方法，定量地研究在毒性剂量下药物在动物体内吸收和消除的过程和特点,探讨药物毒性的发生和发展规律的一门科学。第二页，共82页。3第三页，共82页。第一节药物体内过程与毒性第四页，共82页。一、药物吸收环节的毒性吸收（absorption）：药物自给药部位透过机体的生物膜转运进入血液循环的过程。

影响药物吸收的因素：机体、药物本身、给药途径5第五页，共82页。（一）经消化道吸收:

影响消化道对毒物吸收速度的因素：1.毒物的理化性质2.胃肠道存留食物的质、量3.毒物在胃肠道各部位的停留时间4.胃肠道的吸收面积和吸收能力5.胃肠道局部的pH6.首过效应6第六页，共82页。胃酸stomach

Acid微生物群microflora蠕动度motility消化酶digestiveenzymes稀释dilution7第七页，共82页。代谢代谢粪作用部位检测部位肠壁门静脉药物经肝静脉入全身循环上腔静脉药物经肝门静脉入肝脏小肠吸收药物8第八页，共82页。胃肠道血液（二）经肺吸收

气体、挥发性溶剂或颗粒可经由肺部吸收，如吸人给药(吸入麻醉)、喷雾给药(喷雾剂)，因此药物可通过肺泡壁吸收产生毒性作用。呼吸道表面积30～100M2，毛细血管网的总长度约2000km鼻咽支气管肺泡毒物9第九页，共82页。（三）经皮肤吸收成人的体表面积约1.8平方米毒物通过皮肤吸收的途径1.单纯扩散（大部分亲脂性毒物）2.附属器官吸收：毛囊、汗腺、皮脂腺3.经破损皮肤部位吸收影响毒物通过皮肤吸收的因素1.毒物的性质和浓度2.皮肤的酸碱度、水分含量、面积和厚度。3.皮肤的解剖和生理特性（与年龄、种族和种属有关）10第十页，共82页。静脉注射(Veininjection)肌肉注射(Intramuscularinjection):

简单扩散＋滤过,吸收快而全皮下注射(subcutaneousinjection)

(四）注射给药特点是吸收迅速、完全。影响因素：局部循环情况

11第十一页，共82页。二、药物分布环节的毒性分布（distribution）：药物自血液中随血液循环经过一系列生物膜的转运到达各组织器官中的过程。取决于①药物的理化性质②药物与血浆蛋白结合能力③药物的pKa值及体液的pH值④组织器官血流量⑤药物和组织的亲和力⑥体内屏障现象（barrier）12第十二页，共82页。（一）表观分布容积distributionvolume体内毒物总量和血浆药物浓度之比，Vd非体内生理空间，因此也叫表观分布容积(Apparentvolumeofdistribution)

A：体内药物总量C：平衡时血药浓度推测药物在体内分布情况:Vd小，C0大，进入组织少，分布窄；Vd大，C0小，进入组织多，分布广。13第十三页，共82页。药物（毒物）在人体内的分布情况区域总量的%70kg人的体液（L）给1g化合物后血浆浓度（mg/L）血浆4.53

333总细胞外液201471总体液553826组织结合------0～25第十四页，共82页。在血液中蓄积，血浆蛋白结合在肝肾蓄积在脂肪组织中蓄积在骨骼中蓄积（二）毒物在组织储存15第十五页，共82页。1、药物与血浆蛋白的结合①可逆的②结合型药物的药理活性暂时消失，暂时“储存”于血液中，③影响被动转运；但不影响主动转运过程。④两个药物可能竞争与同一蛋白结合而发生置换现象。16第十六页，共82页。unbound90mg10mgboundunbound90mg+5mg10mg-5mgbound95mgbound5mgunbound95mg–5mgbound5mg+5mgunboundsignificantnegligible17第十七页，共82页。与血浆蛋白结合率比较高的药物>95%boundThyroxine甲状腺素Warfarin华法林Diazepam地西泮Frusemide呋塞米Heparin肝素Imipramine丙咪嗪>90%but<95%boundGlibenclamide格列本脲Phenytoin苯妥英Propranolol普萘洛尔SodiumValproate丙戊酸钠18第十八页，共82页。2.药物在肝脏和肾脏的储存肝脏细胞内的蛋白谷胱甘肽S-转移酶药物、毒物有机酸肝脏、肾脏中的金属硫蛋白金属离子19第十九页，共82页。3.药物在脂肪组织中的储存（保护作用）高脂溶性的有机化合物，如硫喷妥。4.药物在骨骼组织的储存机制：药物与骨组织中的无机盐经磷灰岩结晶的互换吸附含有氟、铅等金属的化合物20第二十页，共82页。（三）体内生物膜屏障（membranebarriers)血脑屏障BloodBrainBarrier胎盘屏障Placentalbarriers血眼屏障21第二十一页，共82页。生物转化（Biotransformation）药物在机体内发生化学结构的改变并形成其衍生物以及分解产物的过程，是药物在体内消除的重要途径.三、药物生物转化环节的毒性

1.药物代谢的部位

肝脏：

肝外部位：肠、肾、脑

等第二十二页，共82页。2.药物在体内转化的两个步骤：

I相反应II相反应药物代谢物结合物（氧化、水解、还原等）（结合）药物经生物转化后，其结局如下：①极性增强，水溶性加强；水溶性降低

②毒性降低；产生毒性代谢物23第二十三页，共82页。I相II相药物结合药物无活性

活性或结合结合药物亲脂

亲水

排泄24第二十四页，共82页。专一性酶如ChE,MAO等非专一性酶（细胞色素P450药物代谢酶系，CYP450）

生物转化主要在肝脏进行，因促进体内药物生物转化的酶主要是肝脏微粒体氧化酶系统（又称肝药酶）也称为细胞色素P-450氧化酶。其特点是:专一性低，活性有限，个体差异大和活性可受药物影响3.生物转化酶的特点及种类：25第二十五页，共82页。CYP2D6家族亚家族酶1）细胞色素P450药物代谢酶系，CYP450是Ⅰ相反应中促进药物生物转化的主要酶系统，有许多种同工酶。26第二十六页，共82页。Fe3+-O

DP-450HOHP-450P-450P-450P-450P-450Fe2+-O2-

HFe2+-O2

DDDDFe2+

Fe3+

Fe3+

DHHHHO2

e¯

e¯

2H+

H2O(1)(2)(3)(4)D（结合）（活化）（加氧）（药物氧化）27第二十七页，共82页。常见的肝药酶诱导剂Phenytoin苯妥英Phenobarbitone苯巴比妥Carbamazepine卡马西平Rifampicin利福平Griseofulvin灰黄霉素Chronicalcoholintake长期饮酒Smoking吸烟28第二十八页，共82页。Chloramphenicol氯霉素Sodiumvalproate丙戊酸盐Sulphonamides磺胺类药Phenylbutazone保泰松Isoniazid异烟肼Amiodarone胺碘酮Omeprazole奥美拉唑常见的肝药酶抑制剂29第二十九页，共82页。2）谷光苷肽S－转移酶glutathioneStransferase（GST）是一组具有多种生理功能的同工酶家族,广泛分布于动植物体内,作为机体的II相解毒酶,参与机体的解毒作用

30第三十页，共82页。四、药物排泄环节的毒性药物和毒物以原形或代谢产物形式通过排泄或分泌器官排出体外的过程排泄途径尿液粪便肺脏汗腺乳汁第三十一页，共82页。1.经尿液排泄①绝大部分药物经肾脏排出体外②只有不与血浆蛋白结合的药物（分子量小于6000的化合物）可被肾小球滤过③肾小管主动分泌：如丙磺舒，同类药物之间有竞争性④肾小管的重吸收：脂溶性药物在排泄过程中可被肾小管再吸收（与药物本身、尿量的多少、血和尿的pH有关）32第三十二页，共82页。药物本身；尿量的多少；尿液pH值对药物排泄的影响：弱酸性药物在碱性尿液中解离多，重吸收少，排泄快，而在酸性尿液中解离少，重吸收多，排泄慢。弱碱性药物则相反。意义：改变尿液pH值可以改变药物的排泄速度，用于药物中毒的解毒或增强疗效。33第三十三页，共82页。水杨酸水杨酸苯丙胺苯丙胺A、酸性尿时

B、碱性尿时血液血液尿液尿液临床意义？34第三十四页，共82页。2.经其它途径排泄胃肠道胆汁排泄被分泌到胆汁内的药物及其代谢产物经由胆道及胆总管进入长枪，然后随粪便排泄。肝肠循环（hepato-enteralcirculation）：有些药物在肝细胞内与葡萄糖醛酸结合后分泌到胆汁，随后排泄到小肠被水解，游离型药物可经肠粘膜吸收，由门静脉重新进入全身体循环，使药物作用时间明显延长。35第三十五页，共82页。经肺排泄：挥发性高的有机溶剂如乙醇等经唾液、汗腺排泄：铅、砷等重金属和某些生物碱等经乳汁排泄：许多金属、毒品、有机氯农药等可从乳汁排泄而影响婴儿。经头发排泄：某些重金属可排泄到头发中。36第三十六页，共82页。第二节毒物代谢动力学(toxicokinetics,TK)第三十七页，共82页。毒物代谢动力学(toxicokinetics,TK)：

运用药物代谢动力学的原理和方法，定量地研究在毒性剂量下药物在动物体内吸收、分布、代谢、排泄的过程和特点,进而探讨药物毒性的发生和发展的规律，了解药物在动物体内的分布及其靶器官，为进一步进行其他毒性试验提供依据，并为今后临床用药以及药物过量的诊断、治疗提供依据。第三十八页，共82页。(1)有助于毒理学研究的设计；(2)了解毒性作用机制；(3)明确重复用药的动力学特征;(4)探讨毒性反应种属间差异的关系(5)分析动物毒性表现对临床安全性评价的价值一、毒代动力学研究目的39第三十九页，共82页。二、毒物代谢动力学研究内容（一）房室概念和房室模型：

动力学的房室(compartment)概念是抽象的数学概念，其划分取决于毒物在体内的转运及/或转化速率。为反映药物分布状况的假设空间，凡摄取或消除药物速率相似的组织器官均可划为同一房室。

40第四十页，共82页。①一室模型分三类：静脉注射染毒；非静脉注射和重复染毒

药物tlogC吸收消除41第四十一页，共82页。一室模型（First-ordercompartmentmodel）药物吸收消除

一室模型计算公式：42第四十二页，共82页。②二室模型多数药物吸收后首先分布到血流丰富的组织器官，然后在分布到血流较少的组织器官，故可设想机体是由两个相互贯通的中央室和周边室组成。药物吸收消除中央室周边室分布logCt分布曲线消除曲线43第四十三页，共82页。二室模型药物中央室周边室吸收消除分布44第四十四页，共82页。

二室模型计算公式：C=Aet+BetC:t时血浆药物浓度:分布速率常数:消除速率常数B

相外延至纵轴的截距A

分布相初始浓度e:自然对数之底＝2.718斜率=-/2.303

斜率=-

/2.303A+B

45第四十五页，共82页。1、半衰期（half-lifetime,t1/2）指血浆中药物浓度下降一半所需的时间。意义：

①药物分类的依据②确定给药间隔时间③预测达到稳态血药浓度的时间：通常恒速经脉滴注或分次恒量给药，经过5个半衰期，消除速度与给药速度相等即达到稳态血药浓度④预测药物基本消除的时间：通常停药时间达到5个半衰期，药量消除96%以上即达到基本消除（二）毒物消除动力学参数46第四十六页，共82页。2、表观分布容积（apparentvolumeofdistribution,Vd）指在药物充分均匀分布的假设前提下，按血药浓度C推算体内全部药物A在理论上应占有的体液容积。Vd=A/C0㏒C㏒C0t0①推测药物在体内分布情况②推测药物排泄速度47第四十七页，共82页。3、血浆清除率（plasmaclearance，CL）

指单位时间内多少容积血浆中的药物被清除干净，即单位时间内从体内清除的药物表观分布容积数。

CL=keVd

单位为L·h-1。意义：反映清除药物的主要器官肝、肾的功能状态速率常数K：可定量比较药物转运速度的快慢，速率常数越大，转运过程进行得越快。48第四十八页，共82页。4、曲线下面积（Areaundercurve，AUC）

——反映进入体循环药物的相对量

CpCmaxMTC-最低中毒浓度MEC-最低有效浓度tTpeakAUC单位：ngh/mL49第四十九页，共82页。药物的消除（elimination）指药物进入血液循环后进行分布、代谢、和排泄，其血药浓度不断衰减的过程。药物消除的规律：dC/dt=-kCn

n=1，一级消除动力学（first-orderkinetics）

n=0，零级消除动力学（zero-orderkinetics）k：消除速率常数(Rateconstantforelimination)k越大，消除过程进行的越快5、毒物消除动力学50第五十页，共82页。一级消除动力学dC/dt=-kCCt=C0e-ktlnCt=lnC0-kt当Ct/C0=0.5

时，有t1/2=ln0.5/k=0.693/k

指血中药物消除速率与血中药物浓度成正比，血药浓度高，单位时间内消除的药量多,当血药浓度降低后，药物消除速率也按比例下降，也称恒比消除。零级消除动力学dC/dt=-k

Ct=C0-kt

当Ct/C0=0.5

时，有t1/2=0.5C0/k指血药浓度按恒定消除速度（单位时间消除的药量）进行消除,与血药浓度无关，也称恒量消除。51第五十一页，共82页。一级消除动力学的特点1.体内药物浓度较低，完全在代谢排泄的控制能力之内，此时药物按恒比消除2.时量曲线用普通坐标时为指数曲线，纵坐标用对数时则为直线3.t1/2

恒定4.一次用药，通常停药时间达到5个t1/2，药量消除96%以上，可以认为药物已经基本消除如K=0.5100mg502512.56.25

3.1352第五十二页，共82页。一级消除动力学的时量曲线㏒C

0

ttC

0

53第五十三页，共82页。零级消除动力学的特点1.体内药物浓度较高，超过了代谢排泄的能力范围，机体只能按最大量即恒量消除2.时量曲线用普通坐标时为直线，纵坐标用对数时则为曲线3.t1/2

不恒定4.一次用药，药物在体内基本消除的时间随用药量的加大而延长600mg3.135006.25

40012.5300

2520050100

54第五十四页，共82页。零级消除动力学的时量曲线㏒C

0

ttC

0

55第五十五页，共82页。连续多次给药的药物血浆浓度变化1.一级消除动力学：多次用药，约经5个t1/2血药浓度达Css。第1次用100mg，一个t1/2后余50mg；第2次100，体内150一个t1/2后余75mg；第3次100，体内175一个t1/2后余87.5mg；第4次100，体内187.5一个t1/2后余93.8mg；第5次100，体内193.8一个t1/2后余96.9mg；第6次100，体内196.9一个t1/2后余98.4mg；56第五十六页，共82页。按一级动力学消除的药物连续给药的药时曲线图57第五十七页，共82页。连续多次给药的毒物血浆浓度变化2.零级消除动力学：多次用药，超比例地升高血药浓度，理论上无Css，易致蓄积中毒。第1次用400mg，8h后余300mg；第2次400，体内7008h后余

600mg；第3次400，体内1000

8h后余900mg；第4次400，体内13008h后余1200mg；第5次400，体内1600

8h后余1500mg；第6次400，体内1900

8h后余1800mg；58第五十八页，共82页。连续多次给药的药物血浆浓度变化零级消除动力学的药物连续给药的时量曲线图CpMTC蓄积中毒t59第五十九页，共82页。(三)生理房室动力学模型生理毒代动力学模型是根据生理学、生物化学与解剖学的知识，以血液连接各组织器官模拟机体系统，每一组织器官中药物按血流速率、组织/血液分配系数并遵循物质平衡原理进行转运，以此基础处理药物动力学实验数据的方法。是一种比较符合毒物在体内动态变化的具体情况状况的模型。以“生理学室”代替经典模型中的房室，这些“生理学室”分别代表与毒物体内分布有主要关系的单个或多个器官组织或体液。

60第六十页，共82页。生理毒代动力学的优点：1.这些模型能提供药物分布于任何组织器官的时程。2.能预测改变生理参数对药物组织浓度的影响。3.通过体表面积换算，相同模型能反映药物通过不同物种的毒代动力学。4.能使复杂的治疗方案容易调节。61第六十一页，共82页。生理毒代动力学的缺点：1.需要较多的信息2.许多数学方程式较难掌握3.许多参数在不同物种、品系或病理情况下很难定义。尽管如此，生理毒代动力学无论在理论上还是应用上，都比经典毒代动力学在毒理学领域有应用前景。62第六十二页，共82页。1、毒代动力学实验须提供：药代动力学数学模型主要参数：时量曲线、AUC、转运速率等2、比较三种剂量对吸收、分布、消除的影响3、必要时需提供代谢产物的动力学参数三、毒代动力学研究实验设计63第六十三页，共82页。需考虑的因素：1，动物选择选用与毒理学研究相同的种属与品系；单一物种单一性别，每个时间点最少3个样本;最好同一动物多次采样，尽量避免多只动物合并样本，以减少个体误差。

64第六十四页，共82页。2，剂量选择

剂量设置主要由受试种属的毒理学反应和药理学效应决定。采用与毒理学研究中相同的或拟用的剂量。(1)低剂量:即无毒性反应的剂量。任何毒性研究的动物最小中毒量在理论上应等同于或刚刚超过推荐病人(或已知的)的最高用量；(2)中剂量：根据毒性研究的目的，通常为低(或高)剂量的适当倍数(或分数)，以正确体现剂量-毒性效应关系；(3)高剂量：有明显毒性反应的剂量，但在实验期限内一般不应有动物中毒死亡。如果毒代动力学研究先于毒性研究，剂量应该为0.1LD50、0.01LD50、0.001LD50.如果出现非线性动力学特征，应该对所有毒性结果解释，分析剂量、暴露于毒性之间的关系。65第六十五页，共82页。3，染毒途径选择均采用与毒理学研究相同途径或人通常的接触途径。以改变给药途径(例如吸入、体表或非肠道释放)来进行毒代动力学研究时，应基于受试药物拟推荐给药途径的动力学性质。需比较人体现行和推荐的给药途径：AUC和Cmax。若AUC和Cmax高于现行的，必须确定新的给药途径是否会显著降低安全范围；若无显著变化，则非临床毒性研究侧重于局部毒性研究。

66第六十六页，共82页。4，样本种类和采样时间点选择样本种类：血样、尿样，有时可选择唾液、胆汁、脑脊液等采样时间点选择：选择适宜的间隔时间采样，应满足药物中毒评估的要求，应包括吸收相、分布相和消除相。采集体液的时间点应达到所需的频度，但不可太频繁。时间点的确定应以早期毒性研究的动力学数据为基础，也可根据预试验或剂量-毒性效应研究，以及在相同动物模型或可以合理外推的其它动物模型另行研究。一般吸收相和分布相至少有3次以上，消除相有4-10次。静脉染毒，8-12个时间点采样；非静脉染毒，10-12个时间点67第六十七页，共82页。时间（分）血浆药物浓度(mg/L)

口服静脉注射

一次给药①初段取浓度接近零的②峰值附近的点尽可能密③末端至少2个点相隔较远8-12个时间点68第六十八页，共82页。5，测定方法高效液相色谱、放射免疫分析、放射性核素法、GC-MS、LC-MS、LC-MS/MS等69第六十九页，共82页。6，代谢产物的测定目的：比较动物与人的代谢途径、代谢速度和程度上的异同。

(1)当受试药物为前体药物而其代谢产物是活性药物时；(2)当药物可被转化为一种或多种具有药理或毒理活性代谢产物，且这些产物可导致明显的组织器官反应时；(3)代谢物累计超过药物剂量1%时；

上述情况在毒性研究中给予动物受试药后，测定主要代谢产物的血浆或组织浓度是评价中毒量的合适手段。70第七十页，共82页。7，数据处理和统计评价分析

对实验获得的数据进行处理、拟合，得出药时关系的数学表达式，计算AUC、Cmax和Tmax参数。所获数据应能对中毒量进行有代表性的评价。但由于动力学参数存在个体内和个体间的差异，毒代动力学资料的动物样本较小，因此通常不需要高精度的统计学处理。应该注意平均值或中位数的计算，在某些情况下，个体动物的数据可能比统计分析的成组资料更为重要。71第七十一页，共82页。8，实验报告撰写与总结

指对得到的毒代动力学数据、毒性效应结果的评价、以及应用毒代动力学资料对毒理学结果进行解释的综合报告。应提供动力学研究分析方法的概述，及其选择测定基质和药物的依据。动力学资料在申报资料中的位置，取决于是特异地对某一毒性研究，还是能支持所有的毒性试验。72第七十二页，共82页。四、毒代动力学研究的特殊问题1，单次染毒毒物代谢动力学

一般采用啮齿类动物。不包括毒物代谢的评价，通常在药品开发的早期进行，这些研究一般早于生物分析方法建立之前，因此无法进行毒代动力学监测。如果需要对其进行研究，可在研究中采集血浆样本，储存以备后期分析，但要求待分析物在样本基质中稳定性数据合乎要求。单剂量动力学研究结果有助于剂量方案的选择，并有助于预测给药期间药物毒性效应的速率和持续时间，这可为后期研究选择合适的剂量水平。为解决在单剂量毒性研究中出现的问题，在此项研究完成后可另进行毒代动力学研究。

73第七十三页，共82页。2，重复染毒毒代动力学选用啮齿和非啮齿动物（雌雄兼用）。给药方案和种属选择要尽可能与药效学和药代动力学原则相符合。初期重复剂量研究过程（超过14天）中，对合适的剂量水平中毒过程进行监测：全身暴露情况、性别和种属差异、剂量相关性、是否有潜在的蓄积倾向和肝药酶的诱导或抑制作用。早期毒性研究结果出现问题时，对特定药物的监测或特征描述可以扩大、缩小或修改。后期研究采用的步骤将依据前期研究的结果和试验设计方案中出现的问题采取相应的变化：减少取样次数等。

74第七十四页，共82页。3，遗传毒性的毒物代谢动力学当体外遗传毒性试验出现阳性结果时，应使用不同方法证明体内全身暴露水平，通过测定血浆或全血药物浓度和相关物质的浓度水平来评价药物暴露情况。当体外遗传毒性研究出现阴性结果时，毒代动力学（体内暴露试验）可以较好地描述所用种属的全身中毒情况或对特定组织的毒性效应。

75第