中药制剂中各类化学成分

第六章中药制剂中各类化学成分分析

§1生物碱类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性）碱性溶解性沉淀反应沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸显色反应+酸性染料（磺酸肽类）→有色配合物紫外光谱特征游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂生物碱盐—水溶性增强生物碱类成分的分离溶剂萃取柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）定性鉴别沉淀反应、显色反应多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应马钱子散中生物碱成分的鉴别取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时，滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。

定性鉴别薄层色谱鉴别吸附剂：氧化铝、硅胶展开剂：氯仿、苯等显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等气相色谱麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定液相色谱含量测定总生物碱含量测定

化学分析法

分光光度法

直接测定

离子对萃取比色法酸性染料比色法

BH十十In－→（BH十In－）→BH十·In－

苦味酸盐比色法

雷氏盐比色法

异羟肟酸铁比色法（含有酯键结构的生物碱）含量测定单体生物碱含量测定

薄层色谱法

高效液相色谱法

液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18）改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液）固定相改进（封尾技术）液—固吸附色谱法离子交换色谱法（阳离子交换树脂）检测器气相色谱法

§2黄酮类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性）溶解性酸碱性酸性：与酚羟基的数目和位置有关7,4‘-二羟基>7-或4‘-羟基>一般酚>5-羟基碱性游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇理化性质显色反应还原反应（盐酸镁粉反应）金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、镁盐）紫外光谱特征I带(300-400nm)→B环桂皮酰基II带(240-285nm)→A环苯甲酰基黄酮类成分的分离溶剂萃取柱层析（聚酰胺柱）沉淀法定性鉴别显色反应盐酸-镁粉反应金属盐类配合反应定性鉴别薄层色谱鉴别硅胶--分离弱极性黄酮

展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇

聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等纤维素--分离多糖苷混合物展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸含量测定总黄酮含量测定

紫外分光光度法比色法高效液相色谱法正相色谱硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分反相色谱（C18或C8）流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水检测器银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定[含量测定]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离度应大于1.5。

对照品溶液的制备（略）

供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液，即得。

测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄酮苷的含量。总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量）×2.51

§3三萜皂甙类成分分析概述理化性质物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）溶解性紫外光谱特征大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端吸收

皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等甘草酸人参皂甙(A型)理化性质显色反应醋酐-浓硫酸反应五氯化锑反应三铝醋酸反应冰醋酸-乙酰氯反应氯仿-硫酸反应金属盐类反应+铅、钡、铜盐→沉淀酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀三萜皂甙类成分的分离溶剂萃取柱层析（大孔树脂柱）沉淀法定性鉴别泡沫反应显色反应定性鉴别薄层色谱鉴别吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土展开剂：三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水等极性较大的体系三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分显色剂三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓硫酸-醋酸酐、碘蒸气等含量测定总皂甙含量测定

重量法比色法显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸等等三萜皂甙类单体成分含量测定薄层色谱法高效液相色谱甘草酸、远志皂甙→紫外检测器其他→蒸发光散射检测器（ELSD）概述理化性质物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性）溶解性酸碱性酚羟基→酸性游离—溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等醌甙—可溶于热水，易溶于甲醇、乙醇丹参醌IIA大黄素

§4醌类成分分析理化性质显色反应羟基蒽醌+碱→橙，红，紫红，蓝+Pb2+/Mg2+→配合物+对亚硝基二甲基苯胺→紫，绿，蓝，灰定性鉴别显色反应升华法薄层鉴别吸附剂：硅胶展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙和甙元不含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙元显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、氨熏含量测定游离蒽醌踏的测定弱极性溶亚剂提取后匹，加碱比洲色结合蒽醌需的测定极性溶剂剥提取，水海解测甙元先酸水庙解后，凯非极性溶吗剂提取则甙元后盼测定醌类单体箩成分含量根测定薄层色邪谱法高效液鸡相色谱牛黄解薄毒片中厦游离蒽号醌和总姨蒽醌的重测定—占混合碱血液比色许法对照品记溶液测岁定：以1，8革-二羟牛基蒽醌为对照品缘瑞，精密称吸取10m个g于10徒0mL量勤瓶中，加篮甲醇溶解吼并稀释至弓刻度（1逮00µg/mL爷）。取1臭mL对照工品液于1玩0mL量即瓶中，在稳水浴上蒸瓜干，加5%氢熊氧化钠点-2%功氢氧化苦铵混合脚碱溶解并撞稀释至姐刻度，放置1小扩时，以5%放氢氧化钠搭-2%氢背氧化铵混艳合碱液为也空白，在510n扫m波长处测云定。样品测定党：⑴游离蒽鸦醌的测定芽：取牛黄读解毒片1送0片，刮蒸去糖衣，桶精密称定虽重量，研什细。称取摘一片重，果置于具塞膜三角瓶中捎，精密加堡入氯仿100m帽L，称重绳，水浴上回流4小时，法取下，加约塞，放冷解，称重，坛用氯仿补军充至原重鬼量，滤过面，吸取滤茅液50m痛L于分液茅漏斗中，请用蒸馏水20m堆L洗涤数次，至音水层无色祸，弃去水求液。氯仿糖层用5%氢氧版化钠-2药%氢氧化影铵混合碱音液振摇萃蹈取数次，直剥至混合碱思液无色，须合并碱液光，用20旦mL氯仿洗齐涤数次，至苦氯仿层无股色，弃去知氯仿层。脊将混合碱延液在水浴点上加热数俊分钟至滩氯仿挥跪尽，冷却，叫移入10童0mL量戴瓶中，并婚稀释至刻匹度，放置扰1小时，止以5%氢翅氧化钠-匪2%氢氧帐化铵混合饥碱液为空揭白，在5理10nm席处测定，钓计算游离逗蒽醌的含拿量（相当叶于1，8朵-二羟基叉蒽醌含量逗）。牛黄解有毒片中云游离蒽吸醌和总留蒽醌的议测定—废混合碱颈液比色倍法⑵总蒽糊醌的测蠢定：精密称勉取游离哨蒽醌项昂下的牛医黄解毒惜片粉一德片置于球150视mL烧倒瓶中，意加2.5片mol出/L硫壁酸30mL直火回流简4小时，放冷谷，加入氯仿20m钩L，水治浴回流0.皇5小时，放冷可，吸出期氯仿液职，再加腹氯仿，诊反复操字作至氯哈仿无色拍为止。讲合并氯桐仿层液深，用蒸馏水农洗涤数次，至案水层无色驳，弃去水讨液。氯仿肤液用5%氢体氧化钠军-2%倍氢氧化丹铵混合碱疑液振摇牢萃取数戚次，至毕碱液无租色，合甚并，用沿20m刻L氯仿狡洗涤数痛次，至温氯仿层窑无色，沾弃去氯欺仿液。教将碱液碑置水浴忙上加热断至氯仿阿挥尽，针冷却，窝移入5蚀0mL帜量瓶中致，用混像合碱液群稀释至爹刻度，木放置1摔小时，趴以5%捞氢氧化喂钠-2在%氢氧乖化铵液增为空白塘，在510n乓m处测定勉，计算游朽离蒽醌旧的含量湾（相当识于1，泼8-二寺羟基蒽角醌含量惠）。⑶结合框蒽醌的管计算：每片含结抬合蒽醌量=每片含总睬蒽醌量—眠每片含游零离蒽醌量夹。复方丹鸭参片中叼丹参酮党ⅡA含惑量测定朽—高效且液相色兼谱法色谱条陆件与系言统适用溪性试验追：用十八烷洗基硅烷键餐合硅胶为薯填充剂；册甲醇-水伤（73：努27）为蛙流动相；题检测波长愉为270黑nm。对照品溶虑液的制备顶：精密称取宫丹参酮Ⅱ订A对照品还10mg雷，置50翼mL棕色量妖瓶中，用甲貌醇溶解并墨稀释至刻肥度，摇匀演，精密量卫取5mL岔，置25烛mL棕色商量瓶中，雹加甲醇至允刻度，摇尘匀，即得修（每1m凡L中含丹光参酮ⅡA钳40µg）供试品施溶液的析制备：取本品1素0片，糖筒衣片除去贸糖衣，精啄密称定，视研细，取描1g，精句密称定，煤精密加入剧甲醇25馋mL，称彻定重量，肝超声处理钻15分钟指，放冷，拨再称定重甩量，用甲择醇补足减锯失的重量畜，摇匀，祥滤过，取腿续滤液，慕即得。测定法笑：分别精液密吸取鞠对照品昏溶液与盛供试品乳溶液各泽10µ闲L，注申入液相问色谱仪恩，测定嫁，即得施。§5姓挥发性成分分拒析概述理化性剃质物理性盼状（气长味，比镰重，折颈光性）溶解性：钥易溶于有艘机溶剂显色反应酚类+三氯普化铁→蓝，蓝蛛紫，绿羰基+苯肼混、羟胺→结晶体醛类+硝酸银胜胺→银镜内酯类+亚硝酰彻铁氰化钠鸭+NaO挤H→红色并慌逐渐消失奧类+浓硫塌酸→蓝，紫柠檬烯薄荷醇桂皮醛§5嘱挥发性成分分析定性鉴弓别化学反应氧化反应江(高锰酸饥钾，铬酸奔）香草醛屈硫酸反岔应薄层色谱吸附剂卵：硅胶祖、氧化塑铝展开剂虑：石油超醚，正舰己烷，闷（加少竞量的乙郊酸乙脂坚或苯）显色剂气相色程谱法GC-县MS或雷GC-矛FTI矛R§5巨挥发性成分分述析含量测定总挥发油浅含量测定挥发油炒测定器蒸馏法单一成蒜分含量鸦测定气相色售谱薄层色眠谱法高效液要相色谱GC-M洁S或GC爱-FTI愧R联用技碗术§4漂其他类策型成分分析香豆素类显色反应异羟肟找酸铁反判应与酚羟基界反应FeCl3Gib养bs试槽剂（2奖,6-娃二氯苯赵醌氯亚誉胺）反胃应→蓝尺色重氮试券剂化反口应§4沸其他类蛋型成分分析香豆素岩类定性鉴召别化学反幼应法荧光法薄层色谱缸法七宝美泛髯颗粒捎中补骨悄脂素、缓异补骨怕脂素的阔鉴别取本品稼10g亚，研细析，加醋狱酸乙酯待20m售l、盐腔酸0.贯5ml高，超声武处理20分州钟，滤过稀，滤液挥杨干，残渣裹加醋酸乙梢酯0.5咬ml使溶脾解，作为供试柔品溶液。薄层条咏件：硅墨胶G薄虫层板，殖展开剂公正已烷侨—醋酸散乙酯（占4:1因），显色剂为撇10%氢贫氧化钾甲葬醇溶液，抬紫外光灯豆365n伏m下检视伪。§4其西他类型成分分析香豆素诸类含量测乏定分光光佩度法荧光光度旁法薄层色谱密法高效液口相色谱描法气相色毫谱法§4敌其他类杨型成分分虏析有机酸概述理化性质物理性迟状（存在厌的形态护，溶解木性，挥车发性）提取分咽离有机溶剂题提取法离子交换臣法水蒸气蒸桨馏法§4其昂他类型成分分却析有机酸定性鉴刃别吸附色谱分配色丈谱含量测定酸碱滴定锄法→总有验机酸分光光嫂度法高效液相屿色谱法薄层色往谱法其他方法§4牛其他类蓝型成分分姻析环烯醚植萜类概述—特怠殊的单萜理化性顺质物理性咽状（存在的赢形态，多且苦味，稳就定性）溶解性：易溶于水确、甲醇，叔可溶于乙炮醇、丙酮昼、正丁醇薄层定性笔鉴别吸附剂划：硅胶、燥聚酰胺显色剂踏：硫酸乙醇混，茴香醛侨试液，香哥草醛硫酸锹试液，对帅二甲氨基掏苯甲醛硫躬酸试液龙胆苦给甙§4痒其他类他型成分分析环烯醚萜泳类含量测靠定高效液摆相色谱波法薄层扫描社法荧光分光他光度法分光光疮度法复方栀越子冲剂色中栀子等甙的含寇量测定精密称彻取本品庆3g，晋置索氏们提取器迁内，加绒甲醇回赵流提取蒜6小时别，回收甲羞醇至干然，加水刮10m每l溶解隙，用水忽饱和正凑丁醇提蒙取，提献取液蒸干刘，以甲割醇溶解铅，通过撕已处理晃好的活依性炭-饺中性氧拍化铝柱传，用甲醇汗100锋ml洗挖脱，收自集洗脱熄液，蒸劈燕干，残壶渣用2债ml甲障醇溶解，作考为供试抽品溶液支。薄层条件耗：硅胶G隙F254薄层板末，展开创剂氯仿红—甲醇谣—25算%氨水（4:匙1:0.殃1），检瞒测波长2全47nm坛，参比波胞长370脸nm。§4松其他类粮型成分分析单萜及搬二萜类含芍药甙团中药制剂耽的分析薄层色吧谱高效液相致色谱含穿心捆莲内酯纽奉中药制慎剂的分临析薄层色谱回滴法比色法—随总内酯薄层扫换描或高奖效液相生色谱法腐—单体月成分穿心莲内段酯§4肢其他类剃型成分分厨析多糖（poly咏sacc愤hari桌des）概述理化性质物理性状（存在形燥式，还原鸣性）溶解性链：溶于水，培低浓度的叛酸碱，盐酿溶液，不卡溶于醇、萝醚、丙酮提取分庄离水提醇稻沉※防止暮水解，助注意消绞除酶、舟酸、碱结等的影循响§4悬其他类铁型成分分析多糖（pol踢ysa碌cch揭ari街des）提取分离金属盐本沉淀法季胺氢氧荣化物沉淀柱色谱法（活性炭宫+等量它的硅藻碰土）凝胶色谱倍法（葡聚汉糖凝胶s挖epha精dex，京琼脂糖凝讨胶sep泻haro皆se，聚爹丙烯酰胺劈燕凝胶Bi顶o-ge假lP）制备型区睬域电泳§4其松他类型成分分笼析多糖（pol辛ysa虚cch枣ari枪des）定性鉴别薄层色贼谱（硅京胶、纤斑维素、烈硅藻土烧）纸色谱展开剂：另正丁醇、于水混合体截系显色剂：京苯胺-邻英苯二甲酸浮的正丁醇模饱和水溶径液等电泳法滤纸电山泳、玻洪璃纤维方纸电泳保、醋酸师纤维薄势膜电泳角、凝胶魂电泳高效液右相色谱趴法气质联用酸水解榜→中和肃→柱前莫衍生→嫁GC-嗽MS§4及其他类去型成分分析多糖（pol饭ysa造cch牢ari锻des）含量测夺定总多糖刘的测定3,5-识二硝基水辟杨酸比色舟法→棕红驼色（55堆0nm）※半微量羡定量法苯酚-硫杂酸法→蓝疗绿色（4戏80-4糠90nm待）蒽酮-硫后酸法→黄巴绿色(6摧20nm士)单体多糖谷的含量测舱定高效凝长胶液相并色谱法捆→确定签分子量高效液蓝相色谱腰法→确广定组成色谱柱且：氨基效键