【报告】实验4：某些因素对离体家兔肠肌的影响

【报告】实验4：某些因素对离体家兔肠肌的影响（浙江中医药大学第一临床医学院）一、实验目的学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响，并分析作用机制。二、实验材料（1）动物：家兔（2）器械：动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针）供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。（3）药品和试剂：HCl、NaOH、（25度）台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液三、实验方法（1）实验装置准备和仪器参数设置：麦氏浴槽中加固定量（10~15ml）的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。通气管接空气管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号采集处理系统：打开RM6240系统，“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动”（2）离体家兔肠肌标本制备：取家兔一只，用木槌击其头部致昏，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，然后将回肠剪成数段（约1~1.5cm），换以新鲜的台氏液备用。取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线并打结。（3）实验观察：1）加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。2）加入肾上腺素溶液2~5滴左右，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。3）滴加NaOH后，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。4）滴加HCl后，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。5）用25度台氏液灌流肠肌，观察其收缩幅度。四、实验结果：实验结论（1）加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋，张力增大，曲线幅度增大。（2）加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制，张力减小，曲线幅度变小。（3）滴加NaOH使家兔肠肌兴奋，张力增大，曲线幅度增大。（4）滴加HCl使家兔肠肌抑制，张力减小，曲线幅度变小。（5）用25度台氏液灌流肠肌肠肌使家兔肠肌运动减缓，到最后停止运动。五、讨论：（1）加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋，张力增大，曲线幅度增大。其主要作用机理是：1）乙酰胆碱与肠道上的平滑肌细胞上的特殊位点结合，促进钙离子在肌浆网上中的传递，从而增强平滑肌的收缩。2）乙酰胆碱可以使中间神经元或兴奋性运动神经元末梢释放的递质来调节肠段的运动，加快加剧肠段的收缩。（2）加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制，张力减小，曲线幅度变小。其主要作用机理是：肠段的活动还受到体液因素的影响，肾上腺素就是动物体内固有的一种体液，与胰高血糖素、促胰液素等的作用一样，都是对肠段活动进行抑制。（3）滴加NaOH使家兔肠肌兴奋，张力增大，曲线幅度增大。其主要作用机制是：NaOH为碱性成分，使小肠液的PH值升高，甚至偏碱性，有利于小肠内各种酶发挥作用。（4）滴加HCl使家兔肠肌抑制，张力减小，曲线幅度变小。其主要作用机理是：加入HCl后，在开始阶段，对小肠的收缩活动有增强效应，由此可见。酸性环境有助于小肠平滑肌的运动；但一段时间后，活动减弱，收缩频率和幅毒都下降，这主要是因为H+浓度上升，抑制了钙通道的激活，Ca2+内流减少，H+能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程、能与Ca2+竞争钙调蛋白结合的位点、使肌凝蛋白ATP酶活性下降，肌质网释放Ca2+的量减少。