抗生素类药物的分析专业知识培训专家讲座

第十一章抗生素类药品分析进入返回主目录抗生素类药物的分析专业知识培训第1页思索与练习第一节概述第二节β–内酰胺类抗生素

第三节氨基糖苷类抗生素第四节四环素类抗生素第五节抗生素类药品中高分子杂质检验基本要求抗生素类药物的分析专业知识培训第2页基本要求一、掌握抗生素类药品结构特点与分析方法之间关系。二、掌握抗生素类药品判别原理与方法。三、掌握抗生素类药品法定含量测定方法原理、测定方法与计算。四、熟悉抗生素类药品杂质检验方法。五、了解抗生素类药品中高分子聚合物检验。返回抗生素类药物的分析专业知识培训第3页第一节概述1.抗生素药品特点化学纯度较低活性组分易发生变异稳定性差抗生素类药物的分析专业知识培训第4页2.微生物学法与理化法比较微生物检定法理化法以抗生素对微生物杀伤或抑制程度为指标衡量抗生素生物效价

依据抗生素结构特点，利用其特有理化性质测定其含量已知或新发觉抗生素、精巧品或粗制品均能测定

测定化学结构已知、已提纯抗生素灵敏度高、样品需用量小、反应抗生素医疗价值，但操作步骤多、费时、误差大

快速、准确、专属性高、样品需用量小、操作简单、省时抗生素类药物的分析专业知识培训第5页3.抗生素活性以效价单位来表示：每ml或每mg中含有某种抗生素有效成份多少，用单位（u）或µg表示。

1mg青霉素G钠盐定为1667单位

1mg青霉素G钾盐单位（u）=1667×356.4/372.5=1595u/mg抗生素类药物的分析专业知识培训第6页分类（按结构与性质）：β–内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类林可霉素类、其它抗生素类返回抗生素类药物的分析专业知识培训第7页第二节β–内酰胺类抗生素

青霉素类NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）AB抗生素类药物的分析专业知识培训第8页头孢菌素类AB抗生素类药物的分析专业知识培训第9页青霉素（青霉素钾、钠）抗生素类药物的分析专业知识培训第10页氨苄西林

（氨苄青霉素）抗生素类药物的分析专业知识培训第11页阿莫西林

（羟氨苄青霉素）抗生素类药物的分析专业知识培训第12页普鲁卡因青霉素抗生素类药物的分析专业知识培训第13页头孢氨苄抗生素类药物的分析专业知识培训第14页头孢拉啶抗生素类药物的分析专业知识培训第15页头孢羟氨苄抗生素类药物的分析专业知识培训第16页头孢噻吩钠抗生素类药物的分析专业知识培训第17页酸性结构特点与性质一、Na与碱金属(Na+、K+)成盐

（一）羧基

易溶于水

抗生素类药物的分析专业知识培训第18页与有机碱(普鲁卡因)成盐

难溶于水普鲁卡因青霉素抗生素类药物的分析专业知识培训第19页（二）手性C

头孢菌素类

C6C7青霉素类C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡抗生素类药物的分析专业知识培训第20页

（三）共轭体系

头孢菌素类母核有共轭体系

青霉素类母核无显著UV多数有苯环取代基

UV抗生素类药物的分析专业知识培训第21页（四）β–内酰胺环

水溶液不稳定

干燥纯净稳定

不稳定性原因四元环张力大

酰胺键易水解

抗生素类药物的分析专业知识培训第22页青霉素类一些氧化剂酸、碱、青霉素酶（一些金属离子）（温度）降解失效抗生素类药物的分析专业知识培训第23页例青霉素降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2抗生素类药物的分析专业知识培训第24页头孢菌素类酸、碱、胺类-内酰胺酶降解失效抗生素类药物的分析专业知识培训第25页（一）呈色反应1.羟肟酸铁反应β-内酰胺类呈色羟肟酸衍生物Fe3+/3H+判别试验二、NaOH•2HClNOHH-b内酰胺类抗生素类药物的分析专业知识培训第26页H+Fe3+/3（红、棕、褐）抗生素类药物的分析专业知识培训第27页2.茚三酮反应α-氨基-氨基茚三酮蓝紫色抗生素类药物的分析专业知识培训第28页3.双缩脲反应似肽键（开环分解）-内酰胺类碱性酒石酸铜紫抗生素类药物的分析专业知识培训第29页4.与重氮苯磺酸反应橙黄色重氮苯磺酸--56OHHC（偶合）酚羟基头孢哌酮抗生素类药物的分析专业知识培训第30页5.与变色酸-硫酸反应活泼“-CH2-”青霉素阿莫西林氨苄西林△（分解）变色酸显色抗生素类药物的分析专业知识培训第31页1.K+、Na+火焰反应（二）各种盐反应

焰色→鲜黄色+醋酸氧铀锌→↓黄

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白

K+抗生素类药物的分析专业知识培训第32页2.沉淀反应（青霉素盐）遇酸→↓在过量HCl或有机溶剂中溶解白青霉素青霉素钠

青霉素钾

緘+H抗生素类药物的分析专业知识培训第33页3.重氮化-偶合反应

重氮化-偶合反应芳伯氨基抗生素类药物的分析专业知识培训第34页4.与三硝基苯酚反应

△二苄基乙二胺抗生素类药物的分析专业知识培训第35页mp三硝基苯酚抗生素类药物的分析专业知识培训第36页光谱法（三）1、UV法样品、分解产物Cu2+头孢氨苄λmax=262nm青霉素V钠A280nm/A264nm=1.30～1.50抗生素类药物的分析专业知识培训第37页pH3.8分子重排抗生素类药物的分析专业知识培训第38页抗生素类药物的分析专业知识培训第39页2、IR法3180cm-1N-Hβ–内酰胺C=O1780cm-13470cm-1O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1C-O以阿莫西林为例抗生素类药物的分析专业知识培训第40页色谱法（四）1、TLC法对照品对照法2、HPLC法抗生素类药物的分析专业知识培训第41页三、杂质检验

药品

检验项目

检验方法

头孢他啶聚合物HPLC法

头孢曲松钠

头孢哌酮钠

头孢噻肟钠

头孢呋辛酯相关物质和异构体HPLC法

头孢氨苄相关物质反相TLC法

青霉素钾（钠）吸收度紫外分光光度法

抗生素类药物的分析专业知识培训第42页1.头孢他啶聚合物测定

固定相：葡聚糖凝胶G-10（40~120µm）

流动相A：3.5%硫酸铵0.01mol/L磷酸盐缓冲液

流动相B：0.01%十二烷基硫酸钠

对照品溶液：头孢他啶对照品100µg/ml

抗生素类药物的分析专业知识培训第43页1）系统适用性试验：理论塔板数和拖尾因子用1mg/ml蓝色葡聚糖、流动相A测定；重复性用对照品溶液、流动相B测定。

N不低于900，拖尾因子0.75~1.5，峰面积RSD应小于5.0%。

2）测定方法

进样供试液，用流动相A；进样对照液，用流动相B。以外标法计算，含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超出0.3%。抗生素类药物的分析专业知识培训第44页2.头孢呋辛酯中相关物质和异构体检验

固定相：ODS

流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵-甲醇（62:38）

1）头孢呋辛酯Δ2-异构体制备：头孢呋辛酯对照品+流动相头孢呋辛酯Δ2-异构体。

2）系统适用性试验：各异构体之间R>1.5，以头孢呋辛酯A异构体计算n>1500。抗生素类药物的分析专业知识培训第45页

3）异构体：t‘R1

相对保留时间r12=-----1----被测物

t’R22----标准物异构体相对保留时间判断B异构体0.85供试液谱图中A异构体峰面积A异构体1.0与A、B异构体峰面积和之比应为0.48~0.55。抗生素类药物的分析专业知识培训第46页3.头孢氨苄中相关物质检验---反相TLC法

固定相：活化后硅胶G板置5%（V/V）正十四烷正己烷溶液中，展至顶部，凉干展开剂：0.1mol/L枸橼酸-0.2mol/L磷酸氢二钠-丙酮（120：80：3）

供试液：本品50mg