药物的鉴别试验

药物的鉴别试验第1页/共40页基本要求一、掌握一般鉴别试验的原理。二、熟悉一般鉴别试验的基本方法。三、了解一般鉴别试验的条件和灵敏度第2页/共40页

是药检工作的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，才能进行药物的杂质检查、含量测定。药物鉴别试验是用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所表示的药物，而非对未知物进行定性分析，因其虽有一定的专属性，但不具备进行未知物确证的条件，故不能鉴别未知物。

鉴别试验的定义鉴别试验的对象一、概述第3页/共40页二、药物鉴别的项目Testitems

性状项和物理常数确认

鉴别项下规定的试验

原料药鉴别制剂鉴别第4页/共40页二、药物鉴别的项目（一）性状（definition)定义：

反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和物理常数等。外观溶解度物理常数第5页/共40页二、药物鉴别的项目（一）性状（definition)聚集状态、晶形1、外观色泽臭、味第6页/共40页卡莫司汀

【性状】本品为无色或微黄或微黄绿色结晶或结晶性粉末；无臭。扑米酮

【性状】本品为白色结晶性粉末；无臭，味微苦。

卡波姆【性状】本品为白色疏松状粉末；有特征性微臭；有引湿性。

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极易溶：1份溶质在不到1份溶剂中溶解

易溶：1份溶质在1份~不到10份溶剂中溶解溶解:1份溶质在10份~不到30份溶剂中溶解2、溶解度

略溶:1份溶质在30份~不到100份溶剂中溶解

微溶:…..在100份~不到1000份溶剂中溶解极微溶解:在1000份~不到10000份溶剂中溶解

几乎不溶或不溶：…10000份溶剂中不完全溶

二、药物鉴别的项目（一）性状（definition)（反映纯度）第8页/共40页去乙酰毛花苷

本品在甲醇中微溶，在乙醇中极微溶解，在水或氯仿中几乎不溶丙硫氧嘧啶（抗甲亢）

本品在乙醇中略溶，在水中极微溶解，在氢氧化钠试液或氨试液中溶解。丙酸氯倍他索

本品在氯仿中易溶，在醋酸乙酯中溶解，在甲醇和乙醇中略溶，在水中不溶。第9页/共40页3、物理常数:

相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数、折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羟值3.1、熔点（分为三法）1测定易粉碎的固体药品3测定不易粉碎的固体药品(如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等)。

2测定凡士林或其他类似物质。（鉴别与纯杂）第10页/共40页3.2、比旋度：指在一定波长下，偏振光透过1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。可用于鉴别药物、检查药物的纯度和含量测定。

[α]20D=100α/CL维生素C

【性状】比旋度取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1ml中约含0.10g的溶液，依法测定(附录ⅥＥ)，比旋度为+20.50～

+21.50。第11页/共40页摩尔吸收系数ε=A/CL3.3、吸收系数

百分吸收系数（Ch.P收载的方法）E1%1cm=A/CL

替硝唑吸收系数

取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含12μg的溶液，照分光光度法(附录ⅣA)，在317nm的波长处测定吸收度，吸收系数为352～378。第12页/共40页

是指依据药物的化学结构或理化特性，通过化学反应来鉴别药物的真伪。ChP附录中有：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟类、无机金属类（Na,K,Li,Ca,Ba,Fe.,Al,Zn,Cu,Ag,Hg等）、有机酸盐类（水杨酸盐）、无机酸盐类。

（二）一般鉴别试验

（generalidentificationtest）第13页/共40页１．有机氟化物６．无机酸根２．有机酸盐３．芳香第一胺５．无机金属盐４．托烷生物碱类药品第14页/共40页1.有机氟化物有机氟氧瓶燃烧无机氟离子pH4.3

茜素氟蓝硝酸亚铈蓝紫色络合物例：氟康唑（抗真菌）【鉴别】(1)取本品，加乙醇制成每1ml中含200μg的溶液，照分光光度法(附录ⅣA)测定，在261nm与267nm的波长处有最大吸收，在264nm的波长处有最小吸收。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致。(3)本品显有机氟化物的鉴别反应(附录Ⅲ)。第15页/共40页2.有机酸盐(1)水杨酸水杨酸+FeCl3

中性条件弱酸性条件红色配位化合物紫色配位化合物例：水杨酸镁

【鉴别】(1)取含量测定项下的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定。在296nm的波长处有最大吸收。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集60图）一致。

(3)本品的水溶液显镁盐与水杨酸盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。

第16页/共40页(2)酒石酸盐供试品溶液（中性）+氨制硝酸银水浴中

银镜例：酒石酸美托洛尔（降血压）

【鉴别】(1)取本品，加乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在224nm的波长处有最大吸收。

(2)取本品约0.3g，置洁净的试管中，加水10ml溶解，加硝酸银试液过量，即生成白色沉淀，滴加氨试液恰使沉淀溶解后，将试管置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁成银镜。第17页/共40页3.芳香第一胺类供试品+

稀盐酸亚硝酸钠碱性-萘酚试液红色到猩红色例：氨苯砜（）【鉴别】(1)本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）

(2)取本品，加甲醇制成每1ml中含5μg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在261nm与296nm的波长处有最大吸收。其吸收度分别为0.35～0.38与0.59～0.62。第18页/共40页4.托烷生物碱类

此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。

例：氢溴酸山莨菪碱

【鉴别】

(1)本品显托烷生物碱类的鉴别反应（附录Ⅲ）(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集287图）一致。(3)本品的水溶液显溴化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。第19页/共40页

5.无机金属盐（Na,K,Ca)

焰色反应：Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色

铵盐：

供试品+NaOH

氨臭使湿润的红色石蕊试纸变蓝使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色例：氨苄西林钠

【鉴别】(1)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与对照品溶液的主峰保留时间一致。(2)取本品0.25g，加水5ml溶解，加2mol/L醋酸溶液0.5ml，摇匀后，于冰浴静置10分钟，用垂熔漏斗滤取析出物，用丙酮－水(9:1)混合溶液2～3ml洗涤，置60℃干燥30分钟，照红外分光光度法（附录ⅣC）测定。本品的红外光吸收图谱应与氨苄西林三水物的对照图谱（光谱集658图）一致。

(3)本品显钠盐的火焰反应（附录Ⅲ）。第20页/共40页6.无机酸根氯化物：Cl-+Ag+

AgCl

乳白色硫酸盐：SO42-+Ba2+

BaSO4

白色例1：盐酸妥卡尼【鉴别】(1)取本品约50mg，加水4ml溶解后，加盐酸溶液(9→100)1ml、重氮对硝基苯胺试液2ml、氢氧化钠试液4ml与正丁醇2ml，振摇，静置俟分层，正丁醇层显红色。

(2)本品的水溶液显氯化物的鉴别反应(附录Ⅲ)。硫酸特布他林

第21页/共40页6.无机酸根例2：硫酸特布他林（呼吸道解痉）

【鉴别】(1)取本品约1mg，置试管中，加水1ml溶解，加缓冲液(pH9.5)(取二羟甲基氨基甲烷36.3g，加水溶解并稀释至1000ml，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至9.5)5ml，加新鲜制备的2％4-氨基安替比林溶液0.5ml及新鲜制备的铁氰化钾溶液(2→25)2滴，混和，置水浴中加热，溶液显紫红色。(2)取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.1mg的溶液，照分光光度法(附录ⅣA)测定，在276nm的波长处有最大吸收。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(附录ⅣC)，如不一致时，再取本品适量，溶于无醛甲醇中，置水浴蒸干后测定。(4)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应(附录Ⅲ)。第22页/共40页（三）专属鉴别试验(specificidentificationtest)

是证实某一种药物的依据，是根据每一种药物的化学结构的差异或理化性质的不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。

1）化学鉴别法2）光谱鉴别法3）色谱法4）生物学法方法第23页/共40页三、鉴别方法（一）化学鉴别法

三氯化铁呈色反应(Ar-OH,Ar-OCOCH3)

异羟戊酸铁反应(Ar-COOH;-COOR)

1.显色反应鉴别法茚三酮呈色反应(脂肪氨基，α－氨酸）重氮化-偶合呈色反应(Ar-NH2;-NHCOR)

氧化还原显色反应及其它颜色反应与金属离子的沉淀反应第24页/共40页与硫氰化铬铵的沉淀反应其它沉淀反应(如生物碱沉淀剂）

例：呋塞米（速尿）

【鉴别】(1)取本品约25mg，加水5ml，滴加氢氧化钠试液使恰溶解，加硫酸铜试液1～2滴，即生成绿色沉淀。(2)取本品25mg，置试管中，加乙醇2.5ml溶解后，沿管壁滴加对二甲氨基苯甲醛试液2ml，即显绿色，渐变深红色。

(3)取本品，加0.4％氢氧化钠溶液制成每1ml中含5μg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在228nm与271nm的波长处有最大吸收。

2.沉淀生成鉴别法

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药物本身在可见光下发射荧光药物溶液加硫酸后在可见光下发射荧光

3.荧光反应鉴别法药物与溴反应后，在可见光下发出荧光药物与间苯二酚溴反应后，发射出荧光药物其它反应后，发射出荧光

制备衍生物：药物＋试剂具有荧光的衍生物第26页/共40页例：硫酸奎宁

【鉴别】(1)取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即显蓝色荧光。

(2)取鉴别(1)项剩余的溶液5ml，加溴试液3滴与氨试液1ml，即显翠绿色。(3)取鉴别(1)项剩余的溶液5ml，加盐酸使成酸性后，加氯化钡试液1ml，即发生白色沉淀。(4)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集488图）一致。第27页/共40页

①胺类、酰脲类、酰胺类药物经强碱处理生成氨气(NH3

；NH(C2H5)2)

②含硫药物经强酸处理后，加热，生成硫化氢气体(H2S+Pb2+PbS+2H+)

③含碘有机药物，加热，生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺类药物酸水解后加乙醇可产生乙酸乙酯4.气体生成反应鉴别法第28页/共40页例：氯氮平

【鉴别】(1)取本品约100mg，加碳酸钠等量搅拌均匀，置干燥试管中灼烧，管口覆以用1％1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液湿润的试纸，试液显紫蓝色。

(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集504图）一致。

第29页/共40页制备衍生物测定熔点法

药物＋试剂新化合物有一定mp;

药物酸化或碱化生成游离酸或碱。操作繁琐费时间，应用较少。m.p.约182℃（分解）例：缩氨基脲的生成苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙缩氨脲H2NCONHNH2第30页/共40页（二）光谱鉴别法

测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度

1.紫外光谱鉴别法规定吸收波长和吸收系数法规定吸收波长和吸收度比值法经化学处理后,测定其反应产物吸收光谱特性

第31页/共40页例：维生素Ｂ2

【鉴别】(1)取本品约1mg，加水100ml溶解后，溶液在透射光下显淡黄绿色并有强烈的黄绿色荧光；分成二份，一份中加无机酸或碱溶液，荧光即消失；另一份中加连二亚硫酸钠结晶少许，摇匀后，黄色即消褪，荧光亦消失。

(2)取含量测定项下的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在267nm、375nm、与444nm的波长处有最大吸收。375nm波长处的吸收度与267nm波长处的吸收度的比值应为0.31～0.33；444nm波长处的吸收度与267nm波长处的吸收度的比值应为0.36～0.39。第32页/共40页

压片法2.红外光谱鉴别法糊法膜法溶液法例：棕榈氯霉素【鉴别】(1)取本品，加无水乙醇制成每1ml中含20μg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在271nm的波长处有最大吸收，其吸收度为0.35。(2)取本品（Ａ晶型或Ｂ晶型），用糊法测定，其红外光吸收图谱应与同晶型对照的图谱（光谱集37图或38图）一致。(3)取本品约0.1g，加乙醇制氢氧化钾试液2ml使溶解，注意防止乙醇挥散，置水浴中加热15分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。

第33页/共40页

TLC法（Rf样＝Rf对）

3.色谱鉴别法

PC法

HPLC法（tR样＝tR对）

GC法例：硫酸阿米卡星

【鉴别】(1)取本品与阿米卡星标准品适量，分别加水制成每1ml中含10mg的溶液，照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶Ｈ薄层板上，以氯仿－甲醇－浓氨溶液－水(1:4:2:1)为展开剂，展开后，晾干，喷以0.2％茚三酮的水饱和正丁醇溶液，在100℃加热10分钟，供试品溶液与标准品溶液所显主斑点的颜色与位置应相同。第34页/共40页

4.生物学法

是利用微生物或实验动物鉴别法仪器鉴别方法增加快（2：1）

UV,IR,HPLC(USP),TLC,(BP)

5.药物鉴别方法新动向

制剂广泛采用IR法鉴别

鉴别方法简练，专属性强平均每个品种收载2个鉴别反应第35页/共40页四、鉴别试验条件（一）溶液的浓度

溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。