实验诊断学ppt课件 实验诊断学概论

实验诊断学

LaboratoryDiagnostics

费鲜明

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Wechatnumber:feixm001Questions你是否记得到医院就诊后曾做过哪些检查?你有抽血检查的经历吗?你是否记得抽血时有什么要求吗?为什么要抽血？---抽血-检验以你对医学知识的了解，你如何理解实验诊断学的概念和内容?一、实验诊断学的概念临床医学检验主要是运用物理学、化学和生物学等技术和方法，通过感官、试剂反应、仪器分析等手段，对病人的血液、体液、分泌液、排泄物以及组织细胞等标本进行检测，以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料(实验诊断方法学)。实验诊断指医师通过其医嘱得以执行，到样本经临床实验室检测得到患者的基本检验资料，并将其用于疾病的诊断、预防、治疗及预后判断的临床过程（临床检验诊断学）实验诊断学不同于临床医学检验学，前者是包括实验室前、中、后3个部分的临床过程

，后者主要是实验诊断的方法和技术。

血液、体液、分泌液、排泄物、组织细胞等物理学、化学、生物学技术感官、试剂反应、仪器分析结果和数据临床资料结合其他辅助检查逻辑分析和科学思维临床检验实验诊断诊断、治疗和预防疾病、科学研究、人群保健与临床诊疗息息相关二、实验诊断的内容（一）、临床血液学检查（二）、临床生化检查（三）、体液与排泄物检查（四）、临床免疫学检查（五）、临床病原学检查（六）、临床细胞学检查、分子生物学检验（一）、临床血液学检查指血液和造血组织原发性血液病及血液学变化血液学一般检查（红细胞、白细胞、血小板的常规检验、血型鉴定和交叉配血试验）血栓与止血检查（止血、凝血、抗凝、纤溶等检验）骨髓细胞学检查（骨髓细胞形态和组织化学检验）（二）、临床生化检查是指对人体固有的生理成分、代谢功能、病理性成分、毒物及药物浓度的检查肝、肾功能血脂、血糖电解质酶学内分泌激素血气（酸碱平衡）维生素微量元素药物浓度分析（三）、体液与排泄物检查对以下标本的常规检查尿、粪胃液、脑脊液、胆汁等痰液、白带等各种分泌物胸水、腹水等积液（四）、临床免疫学检查细胞免疫功能体液免疫功能感染免疫自身免疫性疾病肿瘤标志物其他可用免疫学方法检测的蛋白（五）、临床病原学检查感染性疾病的常见病原体：细菌、病毒、真菌、寄生虫、支原体、衣原体、螺旋体（STD病原体）等检验医院感染常见病原体检验细菌耐药性检验（六）、细胞学检查各种组织脱落细胞穿刺细胞刮取物冲洗物手术标本印片等

（六）、细胞遗传学分子生物学检查染色体检查基因突变检测肿瘤基因检测产前诊断新生儿筛查独特的面部和身体畸形，如小头，枕部扁平，项厚，眼裂小，外侧上斜，内眦深，眼距宽，马鞍鼻，口常半开，舌常口外，手指短粗，掌纹有通贯，小指内弯等。可发生神经系统发育迟缓，心脏和其他器官的先天畸形。21三体(唐氏综合征)AML-M3基因异常：PML-RARɑ（RNA）融合基因

（15q22早幼粒细胞白血病基因与17q12维甲酸ɑ基因易位,形成融合基因）三、实验诊断的应用范围基础医学在临床中的应用（转化医学）临床诊断与鉴别诊断临床治疗观察疗效，判断预后疾病预防科学研究（基础和临床）为健康咨询服务四、样本采集及处理最重要样本：血液标本（一）血液标本种类（1）全血：血液一般检查、血气分析（2）血清：临床生化与免疫学检查（3）血浆：主要用于血栓与止血检查（二）采血部位毛细管采血：急诊和床旁检验静脉采血：需血量较多时（绝大多数检验项目）采用。肘部静脉注射器干燥、忌大量气泡、先拔针头、缓慢注入容器、硅化管、禁止输液侧/管采血等动脉采血：血气分析时（股动脉）。隔绝空气、立即送检（三）标本采集的时间1.空腹：禁食后8-12小时，一般晨起早餐前采血肝功能、空腹血糖、血脂（避免饮食和活动影响）2.指定时间：肾上腺皮质功能试验、糖耐量试验、药物浓度监测、血培养检查、血液常规检查(固定时间)3.急诊：根据患者需要血常规、电解质、血气、心肌损伤标志物、凝血试验等（四）标本采集后的处理（检验前）1.抗凝：抗凝剂选择极为重要（1）EDTA-K2

（orNa2

）:结合钙离子，血液一般检查、流式细胞检查（2）枸橼酸三钠：结合钙离子，血栓与止血检验、血沉、血液保存液（3）肝素：与AT结合增强其抗凝功能1000倍，血浆电解质、血液流变学、红细胞脆性试验等2.及时送检：离体血细胞仍维持代谢（乳酸增加，PH升高，血糖消耗，离子转移，凝血因子和血小板活化，溶血等）3.微生物样本：血培养样本立即送检五、影响实验诊断结果的因素（一）实验室前因素（检验结果错误原因60%来自实验室前，主要是样本的采集和处理）⒈生理影响因素（个体差异）⑴遗传因素：人种，民族，家族⑵生活习惯：居住条件，嗜好，饮食，激烈运动，精神状态⑶环境因素：地区，海拔⑷时间：年龄因素、日内差异、季节差异⑸性别：男女差别、月经周期变化

(6)体位、药物等年龄对生化指标的影响

体位

从立位卧位血液中化学成分测定值有下降趋势钙下降4%(2-7%)

TP下降9%(7-10%)

Alb下降9%(6.2-14%)

Chol下降9%(5-15%)

TG下降10%(2-20%)

ALP下降9%(5-11%)

ALT下降7%(4-14%)采血时应保持体位的一致性

止血带的使用：系止血带三分钟后Alb，ALP，钙，AST，Chol，铁等浓度升高5-10%、凝血因子活性增强。

药物干扰：

⑴药物中含有待测物质：输入葡萄糖液：测血糖输液补钾：测血钾⑵药物中含有直接干扰测定过程中的酶如VitC是很强的还原剂，口服避孕药、雌激素

⑶药物含有色素：在化学显色反应测定中可使结果偏高。

VitB2，利福平2.样本因素（影响结果的最重要因素）

（1）样本采集与处理不当（实验室前），无法真实反映患者病情，导致误诊、误治

（2）检验结果与临床明显不符合时，排除病人和实验室原因后，应从样本因素考虑，重新采集样本复检。（二）实验室和实验室后因素

实验室：检验过程的影响，较小实验室后：结果的正确分析，非常重要六、实验诊断的临床应用和评价参考范围与医学决定水平（一）参考值与参考范围1.参考值和正常参考范围是应用统计学方法产生。2.参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的平均值；所有抽样组测得值的平均值±1.96个标准差即为95%参考范围。3.正常值提法词义不清、概念欠精确、已被参考范围代替。

4.参考范围因实验室、仪器、试剂、方法不同而不同，由临床实验室设定5.参考范围是用于判断某项目结果是否异常6.测定结果超出参考范围可能有或无诊断价值或临床意义（二）医学决定水平概念：其为一个（或多个）界值，通过观察测定结果是否高于或者低于该值，从而对诊断或排除疾病、判断病情、观察疗效、评估预后以及疾病分级等有价值，其由临床和实验诊断医师共同制定。医学决定水平不同于参考范围，后者只是判断某指标是否异常，超出范围表示可能有临床意义，能反映患者相关机能异常，可以提示进行相关的检查以明确诊断，但不一定有医学决定水平那样的价值。医学决定水平包括临界值、诊断界值（cutoff值）、危急值等危急值：指某结果超过某一界值时，可能危及患者生命，医生必须采取紧急处理。注意其它客观因素尤其是样本分析前因素造成的假象。凝血试验实例凝血试验参考范围正常对照值诊断界值危急值PT(10~13)s11.2s(11.2+3)s>30sAPTT(20~30)s25.5s(25.5+10)s>70sTT(14~20)s17.6s(17.6+3)sD-D(0~550)ng/ml无500ng/ml

DVT低风险500~1800

中风险1800~3600

高风险3600~6600

极高风险>6600贫血诊断临床表现：症状和体征实验室检查：参考范围（>100/110/120g/L）男性：Hb<120g/L,hct<0.4,RBC<4.0(x1012/L)女性：Hb<110g/L,hct<0.3,RBC<3.5(x1012/L)贫血程度：以Hb浓度为标准轻度（90~110/120），中度（60~90）重度（30~60），极重度（<30）贫血类型：MCV、MCH、MCHC等初步分类病因诊断：其他检查注意：检验结果无论是否超过参考范围或者超出/低于医学决定水平，与病情不符时首先要排除非患者病理因素的影响，确保结果是病情的真实反映。检验项目的选择原则1.针对性：诊断/鉴别诊断、疗效观察、预后判断（明确检验目的）2.有效性：（1）项目的有效性和局限性（灵敏度和特异度评价）（2）不可能灵敏度和特异度均100%（3）筛查和排除：高灵敏度（防止漏诊）（4）确诊：高特异度（防止误诊）3.经济性：减轻患者经济负担4.及时性：急诊、重症病人诊断性试验的评价指标实验诊断项目（试验）不断增加，其在临床中应用价值需要进行评估。诊断价值大小需要有客观的评价指标。3.主要评价指标：敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性和阴性似然比、ROC曲线等。如何进行评价？评估方法（项目）参考方法（金标准）

有病无病阳性a(真阳性)b（假阳性）阴性c(假阴性)d（真阴性）

敏感度=a/(a+c),真阳性率特异度=d/(b+d)，真阴性率正确率=(a+d)/(a+b+c+d)：符合率假阳性率=b/(b+d)，误诊率假阴性率=c/(a+c)，漏诊率ROC曲线：用于两种方法诊断价值比较，可以寻找指标的诊断界值（敏感度和特异度之和最大或漏诊和误诊率最小处）检验结果解释与临床结合1.检验结果是过去某时刻的静态结果，生理或病理状况可随时间而改变；2.相同疾病可出现不同检验结果，相似检验结果可存在于不同的患者或疾病中；3.在保证实验数据为患者真实反映基础上，应结合临床资料，做到具体病人具体分析，才能充分发挥实验诊断的价值4.检验结果处于临界状态时，需要动态观察指标的变化。七、实验诊断的现状及发展趋势仪器自动化：全自动、工作站、流水线方法多样化：多项目、多方法、新技术方法标准化：完善的质量管理体系检测分子化：大