如何做好临床微生物的质量控制专家讲座

怎样做好临床微生物质量控制苏州大学从属第二医院检验科

周惠琴如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第1页

临床微生物检验是对人体各种物质进行微生物学检验，整个检验过程包含病人样品采集、运输、处理，样品中致病微生物分离、培养、判定，药品敏感试验，出具检验汇报。临床微生物检验，在感染性疾病及相关病患诊疗治疗预防及研究工作中起着越来越主要作用，为了保障检验结果准确性和可靠性，日常工作中要注意开展质量控制。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第2页临床微生物检验质控工作特点步骤多包括知识面广复杂性高、需要超强责任心如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第3页临床微生物质控内容检验前阶段:指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序开启时终止步骤，包含：检验申请；标本采集与运输检验中阶段:标本分析检验后阶段:危急值汇报,汇报产生,汇报修正,汇报判读。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第4页全部检验流程产生检验错误有资料表明检验前阶段:46-68.2%检验中阶段:4-15%检验后阶段:18.5-47%如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第5页标本采集有意义汇报来自于质量好标本。要想取得敏感性与特异性微生物检验汇报,是始于病人并非来自微生物试验室门口。微生物试验室与标本搜集者应及时沟通并制订标本质量采集手册。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第6页标本采集标本质量采集手册，包含：患者准备不一样部位标本采集方法标本运输要求（时间、温度等）延迟运输时标本贮藏方法安全运输标本方法（密闭容器等符合生物安全要求）标本标识标本采集指南应方便标本采集、运输者取阅！如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第7页微生物标本搜集质量标准标本搜集应尽可能靠近感染部位，并将污染可能降至最低。必须于适当初机搜集标本，以发觉感染相关病原体。执行医嘱检验项目，必须取得足量标本。使用适当搜集标本容器，以确定能得到全部病原体。在使用抗生素前搜集全部微生物检验标本。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第8页微生物标本搜集质量标准标本容器运输时必须有适当标示与密封。运输期间会造成部分病原体降低故应尽可能缩短标本运输时间，尽可能使用运输培养基。对于不适当搜集标本及不恰当检验医嘱应作退件处理。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第9页血液呼吸道分泌物脓液及无菌体液粪便尿液微生物标本起源如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第10页血液标本采集临床上疑为败血症、脓毒血症或其它血流感染患者，需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效地抗菌治疗，从而有利于提升治愈率和降低医疗费。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第11页时机应在用抗菌素治疗前,最好在患者发冷发烧前半小时采血为宜。次数与间隔发烧原因不明患者

24-48h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。采血急性感染患者

从两臂分别采2份血样。感染性心内膜炎患者

24h内采血3次,每次间隔不少于30分钟。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第12页脓液标本采集

要尽可能防止病灶表面细菌污染。开放性脓肿，采样前无菌盐水冲洗伤口，拭去表面污染脓液，挑取病灶深部脓液；封闭性脓液，严格对病灶皮肤或黏膜表面消毒后用无菌干燥注射器穿刺抽取，置无菌容器内送检,同时应注意对厌氧菌培养，切开排脓时用无菌拭子采集深部脓液。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第13页呼吸道标本采集

标本留取质量好坏直接影响到对下呼吸道病原学诊疗标本采集要尽可能降低上呼吸道正常菌群干扰应在用药前或停药1天后留取标本。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第14页泌尿道标本采集应在用药前或停药5天后留取标本,并使尿液在膀胱内停留6-8h以上。尽可能防止或降低尿道口正常菌群干扰。采集中段尿液。尿量不宜太多，容器盖子与尿液不应直接接触留取导尿管尿要排空导尿管内陈旧尿液，若留置尿管超出三天应防止采取。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第15页粪便标本采集

应在发病早期而且尽可能在用抗生素治疗前采集，稀便不少于1ml，固体便不少于1克，无便患者可用直肠拭子采集标本。要尽可能挑取含脓、黏液、血等病理改变或水样粪便送检。直肠拭子采样量要足够，拭子上肉眼应可见粪便。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第16页检验过程试剂

设备人员培养基

检验中质量确保

如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第17页人员一、人员资质 工作人员要有医学、医学检验专业背景，接收微生物学基本理论和基本技能培训。二、人员比对为了规范试验室人员结果判读统一性需进行人员间各种比对常有：各种涂片结果识别K-B法抑菌环直径测量各种生化反应结果判读各种培养基上生长菌落区分等如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第18页试剂质控临床微生物试验室惯用试剂包含染色液、诊疗血清以及各种生化反应试剂等。天天对氧化酶、触酶，每七天需对各种染色液，需要时对诊疗因子进行质控。

应每3个月对诊疗血清进行一次质控。不使用过期血清。惯用生化试剂应注意试剂在贮存时避光、冷藏等要求，确保试剂稳定性。不使用过期试剂。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第19页培养基明确标识： 能够取得生产日期、保质期、质量控制、贮存条件等信息。自制培养基： 检测每批号对应性能，如无菌试验、生长抑制试验等。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第20页１、普通性状外观透明、清亮、无混浊、无沉淀，颜色符合要求，表面湿润但无水汽、平整、光洁无凹坑和气泡。整块平板厚薄均匀。厚度

普通厚度在3mm，但MH平板厚度不得小于4mm。斜面长度不得超出试管长度2/3。pH

是细菌生长主要条件之一，合格培养基pH应在要求值上下0.2范围内。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第21页2、无菌试验

新制备培养基要随机抽取一定数量样品作无菌试验。对于压力蒸气灭菌后倾注固体培养基，抽样后放35℃±1℃温箱培养24h；灭菌后经无菌操作分装液体培养基要全部放入35℃±1℃温箱内培养24h；对有些无需高压灭菌只需煮沸消毒选择性培养基要取部分琼脂，放入无菌肉汤管培养24h。上述试验证实无细菌生长时才算合格。若有细菌生长，说明培养基制备过程中已受杂菌污染，除了寻找原因外，不应再使用。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第22页3、细菌生长试验

全部培养基在使用前除了做无菌试验外还必须用已知标准菌株做细菌生长试验以测定培养基性能是否符合要求。标准菌株分2种：一个是已知可在某种培养基上生长并产生经典生物学性状，对培养基中某种物质产生阳性反应菌株；另一个是用已知不能在某种培养基上生长或对培养基中某种物质产生阴性生化反应菌株。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第23页苏州大学从属第二医院检验科

细菌室培养基质控及储存细则编号XJ-SOP-051表02如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第24页苏州大学从属第二医院检验科

细菌室生化判定管质控及储存细则编号XJ-SOP-051表03如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第25页纸片药敏试验室内质控基础质控：连续做30天，如失控超出3次还需继续，如失控低于3次可改为每七天1次。纠控：每七天质控中发生失控应纠控，方法：连续5天，天天1次，每次重复5个纸片，如找到明确失控原因，可马上改为每七天1次，不然继续。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第26页设备制订并执行标准操作程序定时实施维护、保养、监测，并统计。新设备或经搬运、维修后设备：性能评定及功效验证，确保试验结果准确性。温度依赖检测设备：定时监测温度，使用过程中注意温度改变。定时监测特殊设备性能：CO2孵育箱内CO2浓度；生物安全柜内气流；压力灭菌器灭菌效果等。专用设备使用、维护、保养、监测等需遵照制造商提议。

如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第27页性能评定及功效验证全自动血培养仪用10-20株质控菌株（包含肺炎链球菌嗜血杆菌等苛养菌）制备不一样浓度菌液培养，统计报阳时间及检出情况。全自动细菌判定仪用ATCC标准菌株检测其判定及药敏正确性。每一次室间质评也能够对仪器进行验证。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第28页检验质量不停完善以我科粪培养为例统计表明粪便中致病菌检出总例数沙门菌属所占百分比志贺菌属所占百分比2900%620.7%4100%614.6%46510.9%510.9%551221.8%59.1%411946.3%614.6%粪便培养致病菌检出率统计结果-用S.S培养基。用XLD培养基替换S.S培养基。以来用SBG替换NG增菌液。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第29页不完全溶血金葡菌不完全溶血金葡菌正常β溶血金葡菌如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第30页不完全溶血金葡菌我们对当前本市医院惯用三个品牌（梅里埃、安图、科玛嘉）成品及我室自配哥伦比亚血平板进行对照试验，同时用十株不完全溶血金葡菌分别接种于上述血平板上，结果在24h均未得到透明β溶血环，48h后只有梅里埃生产血平板产生了β溶血环。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第31页不完全溶血金葡菌我们对9月份检出全部金葡菌统计发觉有27.8%(15/54)出现该现象。全部不完全溶血金葡菌均为MRSA株,占全部MRSA48.4%。是平板质量?细菌生物学特征改变?如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第32页关于自动化判定仪

任何一个微生物判定仪对微生物判定都不是100%正确，我们常从下面几个方面来防止错误产生：规范操作流程，尽可能统一试验室内每个工作人员对细菌菌落等描述。注意药敏结果与所判定细菌是否匹配。与标本起源,临床表现是否相符合等。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第33页汇报单审核

1.药敏结果与细菌判定结果是否协调；熟悉细菌天然耐药情况。弗劳地枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌对一代头孢、氨基青霉素、氨基青霉素/β-内酰胺酶复合抑制剂、头孢西丁、头孢替坦、头孢呋辛天然耐药。变形杆菌属对多粘菌素、四环素、呋喃妥因天然耐药，普通变形杆菌同时对氨苄西林耐药。铜绿假单胞菌对四环素、一代头孢、二代头孢、氨基青霉素、氨基青霉素/β-内酰胺酶复合抑制剂、厄他培南、头孢唑肟、头孢噻肟、头孢曲松、氯霉素、甲氧苄啶、复方新诺明、卡那霉素天然耐药。如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第34页汇报单审核2.某个药结果是否符合它在本类药中活性等级。对第三代头孢菌素耐药肠杆菌科细菌，一样对第一代和第二代头孢菌素（除了头霉素类）耐药，因为它们可能含有有效beta-内酰胺酶对氨基青霉素/beta内酰胺抑制剂复合抗生素耐药肠杆菌科细菌，一样对对应beta内酰胺抗生素单独耐药。

如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第35页汇报单审核3.一些菌对某种药是否尚无或极少有耐药汇报。肠杆菌科（任何种）碳青霉烯类—I或R。嗜麦芽窄食单胞菌碳青霉烯类—S。任何细菌对全部常规试验中抗生素都R。肠球菌属万古霉素—R、利奈唑胺—R。粪肠球菌氨苄西林或青霉素—R、奎奴普汀-达福普汀—S。金黄色葡萄球菌利奈唑胺—NS、奎奴普汀-达福普汀—I或R、万古霉素—I或R如何做好临床微生物的质量控制专家讲座第36页了解各种耐药规则金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药，则不应使用青霉素、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物、头孢菌素（含有抗MRSA活性头孢菌素类抗生素除外）和碳青霉烯类药品治疗。肠球菌不应采取头孢菌素、氨基糖甙类、克林霉素和复方新诺明进行治疗，因其临床无效。D试验阳性：大环内酯耐药葡萄球菌如对克林霉素敏感和中介，则有可能含有对克林霉素诱导性耐药（MLSb耐药)，菌株需报为克林