药敏试验及药敏试验结果介绍

药敏试验及药敏试验结果分析药敏试验及药敏试验结果介绍1/84一、药敏试验MIC：在与微生物生长速率相关特定时间间隔内，通常是18－二十四小时，能够抑制被测菌生长最低药品浓度。对倍稀释优点：操作轻易敏感株MIC呈正态分布区分异常(R)与敏感(S)菌群药敏试验及药敏试验结果介绍2/84药敏试验折点建立1.MIC分布

2.药代动力学和药效学

定MIC折点3.临床疗效和细菌去除率4.抑菌圈直径分布…定抑菌圈折点统计学线性回归计算错误率：尽可能降低极主要误差(假敏感率)药敏试验及药敏试验结果介绍3/84MIC分布药敏试验及药敏试验结果介绍4/84药代动力学和药效学药代动力学：药品吸收，分布，代谢，排泄药效学：药品对机体作用时间依赖型（％T>MIC〕：β－内酰胺类，大环内酯类浓度依赖型（AUC/MIC比率〕：AGS,FQ这些参数可用于计算含有最正确药效给药方案药敏试验及药敏试验结果介绍5/84MIC与抑菌圈直径线性关系耐药中介敏感RISLog2.MICD1d2抑菌圈直径（mm)v药敏试验及药敏试验结果介绍6/84抑菌圈直径与MIC关系药敏试验及药敏试验结果介绍7/84不一样国家判定折点

－可能不一样原因：用药剂量不一样，服药间隔不一样评价敏感时较保守更强调检测出耐药株（即特定耐药群）技术原因：接种、培养基药敏试验及药敏试验结果介绍8/84敏感性分类(NCCLS定义)敏感（Susceptible）用常规用量治疗有效常规用药时到达平均血药浓度超出细菌MIC5倍以上。耐药（Resistance）用常规用量治疗不能抑制细菌生长MIC高于药品在血、体液中可能到达浓度药敏试验及药敏试验结果介绍9/84敏感性分类（2）中介(Intermediate)MIC靠近血、体液中药品浓度，治疗反应率低于敏感株药品生理浓集部位有效(尿－FQ)加大用药剂量可能有效缓冲区：预防操作系统误差造成重大结果判定错误药敏试验及药敏试验结果介绍10/84药敏试验方法学半定量…纸片扩散法(抑菌圈直径)MIC法：稀释法(肉汤、琼脂)自动化仪法抗生素连续梯度法(Etest)流式细胞仪药敏试验及药敏试验结果介绍11/84药敏试验方法选择纸片法有独特之处选药灵活、廉价、易懂MIC法：商品肉汤法(自动化法)↑可用于厌氧菌、苛氧菌计算机管理快速，但可能有错误（如诱导型菌）新药评价药敏试验及药敏试验结果介绍12/84药敏试验方法1（纸片扩散法〕材料：浸有一定Abs干燥园滤纸片步骤：制备菌悬液－涂平板－贴纸片－孵育－卡尺测量抑菌圈直径－判定R、I、S优点：选药灵活、廉价、一个平皿可测多个药缺点：影响原因多适合用于快生长菌、部分苛养菌药敏试验及药敏试验结果介绍13/84纸片扩散法－影响原因MIC接种菌量细菌生长率抗生素含量、扩散性平皿厚度温度，预孵育时间药敏试验及药敏试验结果介绍14/84纸片扩散法－标准化NCCLS：美国试验室标准化委员会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)每年修订更改包含质控新药判定标准特殊耐药性检测药敏试验及药敏试验结果介绍15/84NCCLS法规要求纸片含量、接种浓度、培养基、平皿厚度、判定标准、质控要求常规测试汇报抗生素不一样药判定标准不一样不一样菌判定标准也不一样药敏试验及药敏试验结果介绍16/84常规测试并汇报药品分组(1)

肠杆菌科

绿脓和非肠杆菌科一级氨苄 头孢他啶唑林，庆大 庆大，替卡，哌拉二级阿米卡星 阿米卡星氨苄/舒，阿莫/克 吡肟，哌酮，氨曲南头孢肤肟，头霉 环丙，亚胺培南，替卡/克噻肟，曲松，环丙 妥布，磺胺亚胺培南，替卡，哌拉三级氨曲南，头孢他啶 头孢曲松卡那，奈替，妥布 氯霉素，奈替四环素，氯霉素 药敏试验及药敏试验结果介绍17/84常规测试并汇报药品分组(2)

葡萄球菌

肠球菌一级苯唑，青霉素 青霉素，氨苄二级红霉素类 万古霉素克林，万古三级氯霉素 庆大药敏试验及药敏试验结果介绍18/84常规测试并汇报药品分组(3)

流感嗜血杆菌

肺炎链球菌一级氨苄，青霉素 青霉素，红霉素TMP/SMZTMP/SMZ二级头孢肤肟，噻肟 氧氟，四环素他啶，氯霉素万古霉素三级阿奇，头孢克罗 氯霉素，利福平环丙，亚胺培南 利福平，四环素药敏试验及药敏试验结果介绍19/84预报用药(一)

测试药 菌名 推测其它药品敏感性

苯唑西林 葡萄球菌 全部β－内酰胺类四环素 全部（除葡 多西环素，米诺环素

萄球菌和不 动杆菌〕红霉素 G＋球菌 罗红，克拉，阿奇克林霉素 全部 林可霉素药敏试验及药敏试验结果介绍20/84预报用药(二)测试药 菌名 推测其它药品敏感性氨苄西林 肠球菌 青霉素青霉素G 葡萄球菌 氨苄，美洛，替卡头孢噻吩 肠杆菌科 拉定，头孢氨苄，克罗奈啶酸s

肠杆菌科 全部FQs万古霉素s

全部 替考拉宁s药敏试验及药敏试验结果介绍21/84纸片扩散法操作规程(一)培养基：MH(重复性好，低抑制剂，营养好)厚度：4mmPH：7.2~7.4pH低时，氨基糖甙,大环内酯↓pH高时，青霉素类活性↑离子浓度(Ca2+,Mg2+)影响氨基糖甙类、四环素对Pae活性高时，抑菌圈↓；药敏试验及药敏试验结果介绍22/84纸片扩散法操作规程(二)接种：纯新鲜菌落，0.5号麦氏比浊管菌悬液在15分钟内种入平皿内纸片中心间距>=24mm孵育：CO2影响Ags,Tet,Macrolides质控:ATCC25922,35218ATCC27853,ATCC25923药敏试验及药敏试验结果介绍23/84纸片扩散法结果判定1.

先看菌名（判定到种〕2.不一样药品使用不一样折点药名 菌名 R S 菌株1 菌株2Pip/Taz 绿脓 ≤17 ≥18 16R

30SCAZ 绿脓 ≤14 ≥18 16I

19S3.同是S时，偏离敏感折点越高药,

MIC越低，活性也越高药敏试验及药敏试验结果介绍24/84抑菌圈分布药敏试验及药敏试验结果介绍25/84抑菌圈分布药敏试验及药敏试验结果介绍26/84非NCCLS系统扩散试验方法 国家 学会 培养基 评论比较法 UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsStokes UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsSFM 法国 SFM MH 与NCCLS相近DIN 德国 DIN MH 与NCCLS相近SIR 瑞典 SMS PDM－ASM MIC相关值低Neo-sensitabs丹麦、比利时 MH 药片，易保留双歧 澳大利亚 Sensitest 无中介药敏试验及药敏试验结果介绍27/84药敏试验错误起源(一)每个系统特有不足（快生长菌〕培养基（成份、厚度、pH、离子浓度）各种材料正确保留(纸片－20℃)操作步骤纯菌、35℃、16－28h葡萄球菌、肠球菌24h药敏试验及药敏试验结果介绍28/84药敏试验错误起源(二)体内、体外试验不一致性一些菌测一些药，结果有误头孢菌素、氨基糖甙类：沙门菌、志贺菌头孢菌素：李斯特菌属头孢菌素、氨基糖、克林、TMP/SMZ：肠球菌Beta－内酰胺类：MRS即使敏感，也应汇报耐药药敏试验及药敏试验结果介绍29/84问题菌和耐药机制有些菌无标准化药敏试验棒杆菌、芽胞杆菌、气单胞菌、巴斯德菌一些耐药机制需要各种检测方法诱导型：VanB,BushI型酶MRS异质型表示ESBL药敏可能无法检出新出现耐药，VISA药敏试验及药敏试验结果介绍30/84药敏试验方法2－肉汤稀释法4 8 16 32 64128256ug/ml混

混清抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml，孵育35℃，16-20h，判读药敏试验及药敏试验结果介绍31/84药敏试验方法2－肉汤稀释法调整离子浓度MH肉汤宏量肉汤法（2ml,13x100mm） 微量肉汤法（0.1ml,微量板）自动化仪优点：准确，可靠，可用于研究缺点：劳动强度大细菌生长情况不可查药敏试验及药敏试验结果介绍32/84药敏试验方法3－琼脂稀释法

浓度16 32 64128256ug/ml制备含对倍抗生素浓度梯度平板，制备菌悬液，点种菌，104/每个点，孵育，判读结果药敏试验及药敏试验结果介绍33/84药敏试验方法3－琼脂稀释法优点：金标准准确可靠可同时测定多株菌（40株）细菌生长情况可查缺点：测多个药时劳动强度大制备平皿费时费劲药敏试验及药敏试验结果介绍34/84药敏试验方法4－Etest法

细菌生长区Etest塑料条椭圆形细菌生长抑制区2561288016判读抑菌浓度（MICug/ml)药敏试验及药敏试验结果介绍35/84药敏试验方法4－Etest法优点连续浓度梯度，与琼脂稀释法相关性好影响原因少，稳定性高操作简单，省时缺点：昂贵用途：快生长菌，苛养菌，厌氧菌，酵母菌， 分枝杆菌药敏试验及药敏试验结果介绍36/84评价药品体外抗菌活性指标MIC50,MIC90,MIC均值，MIC范围，R，I，SMIC50/MIC90：MIC从小到排列，位于第50/90百分位菌株MIC值单纯比较MIC50，MIC90是片面，还要同时看平均MIC及MIC范围同时结合R，I，S，（不一样药品血浓度不一样，安全范围不一样〕药敏试验及药敏试验结果介绍37/84抗生素细菌人体RESISTANCEPHARMACODYNAMICSINFECTIONIMMUNITYSIDEEFFECTSPHARMACOKINETICS抗生素、细菌、人体药敏试验及药敏试验结果介绍38/84药敏试验及药敏试验结果介绍39/84TimeaboveMIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

TimeaboveMICTimeAntibioticconcentration(ug/ml)2DrugADrugBABDrugApresentatconcentrationof2ug/mlfor50%ofdosingintervalDrugBpresentatconcentrationof2ug/mlfor30%ofdosinginterval468040Slideno药敏试验及药敏试验结果介绍40/84RelationshipbetweenTimeaboveMICand

efficacyinanimalinfectionmodels020406080100020406080100TimeaboveMIC(%)PenicillinsCephalosporinsMortalityafter4daysoftherapy(%)Craig.DiagnMicrobiolInfectDis1996;25:213–217药敏试验及药敏试验结果介绍41/84Antibiotic

concentrationMIC

TimeAreaunderthecurveoverMIC24-hrAUC/MICiscorrelatedwithoutcomeofinfection,themagnituderequiredforsuccessandMICatwhichthisoccursbecomesthePDbreakpoint

24-hrAUC/MIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

42Slideno药敏试验及药敏试验结果介绍42/84Therelationshipbetween‘timeaboveMIC90’andbacteriologicalcureinS.pneumoniae(red)and

H.influenzae(blue)inotitismediaandsinusitisOtitismediaSinusitis‘TimeAboveMIC’(%ofdosinginterval)Bacteriologicalcure(%)020406080100020406080100Craig,ECCMID,Stockholm,Sweden43Slideno药敏试验及药敏试验结果介绍43/84抗生素选择时需考虑原因药品感染部位浓度对细菌MIC结果微生物学抗菌机制抗菌谱药代动力学吸收、分布、代谢、排泄给药方案药效学时间/浓度依赖型杀菌剂/抑菌剂组织渗透抗菌时效临床效果细菌去除患者依从性耐受性耐药产生药敏试验及药敏试验结果介绍44/84抗生素治疗失败主要原因病人相关原因依从性差不适当给药路径免疫抑制病灶药品原因给药剂量与方式不妥药效学考虑欠妥药品失活微生物相关原因病原确立错误治疗中出现耐药抗菌活性不足接种效应其它原因非感染（误诊）基础疾病药敏试验及药敏试验结果介绍45/84抗生素药效学与药代动力学关系研究

PK/PD—药代条件下药效

PARAMETERS：PK：Cmax、AUC、T1/2

PD：MIC

PK/PD：AUC/MICCmax/MICT>MIC药敏试验及药敏试验结果介绍46/84抗生素药效学与药代动力学关系研究

抗生素PK/PD分类抗生素分类PK/PD参数药品时间依赖型（短PAE）T>MIC青霉素类、头孢菌素类、氨曲南、碳青霉烯类、大环内酯类、克林霉素、恶唑烷酮类、氟胞嘧啶时间依赖型（长PAE）AUC24/MIC链阳霉素、四环素、万古霉素、替考拉林、氟康唑、阿齐霉素浓度依赖型AUC24/MICorCmax/MIC氨基糖苷类、氟喹诺酮类、daptomycin、酮内酯、甲硝唑、两性霉素B药敏试验及药敏试验结果介绍47/84抗生素药效学与药代动力学关系研究

PK/PD研究应用—给药方案制订与优化药敏试验及药敏试验结果介绍48/84抗菌药品合理应用药理学考虑药动学/药效学参数与抗菌效力（动物模型）参数 药品 高于MIC时间 青、头孢、碳青烯、氨曲、大环、克林 24hAUC/MIC 氨基糖苷、氟喹酮、阿奇 峰值/MIC 四环、万古、链阳

氨基糖苷、氟喹酮

药敏试验及药敏试验结果介绍49/84

第一大类：

时间依赖杀菌作用（连续后效应------无或轻、中度）-LAbx（P、Cef、氨曲、碳烯类），克林和大环

（红、克）、四环在MIC4-5倍时杀菌率即处于饱合杀菌范围主要依赖于接触时间超出MIC时间是与临床疗效相关主要参数药敏试验及药敏试验结果介绍50/84氨基糖苷类属于浓度依赖性抗生素体内外研究证实Cmax/MIC为10左右为最正确治疗参数对革兰阳性、阴性菌均含有PAE（0.75~7.5hr）。第二大类:氨基糖苷类一日一次给药药敏试验及药敏试验结果介绍51/84低浓度易诱导适应性耐药高浓度不易选择耐药高剂量少次数给药可防止耐药氨基糖苷类一日一次给药药敏试验及药敏试验结果介绍52/84氨基糖苷类药品每日一次给药理论依据充分临床疗效不变或更加好毒副反应少更具经济学价值氨基糖苷类一日一次给药药敏试验及药敏试验结果介绍53/84二、药敏试验结果分析药敏试验及药敏试验结果介绍54/84分类方式不可能结果罕见结果（值得注意）罕见矛盾结果有提醒意义结果，结果需要修正

药敏试验及药敏试验结果介绍55/84肠杆菌科细菌结果

A.假如三代和四代头孢菌素R/I，而一代，二代头孢或头孢克肟、头孢泊肟、氨基青霉素敏感。这么结果不可能B.脲基青霉素R/I，而氨基和/或羧基青霉素S。这么结果不可能。C.粘质沙雷菌和斯氏普罗威登斯菌：四环素或呋喃妥因S，这里细菌对这两类抗生素天然耐药，结果不可能。药敏试验及药敏试验结果介绍56/84罕见结果（值得注意）-重作!

肠杆菌科细菌：亚胺培南/美洛培南R（沙雷菌中可能）阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和弗枸：头孢西丁S奇异变形菌：呋喃妥因和四环素S普通变形杆菌：头孢噻吩，氨基青霉素，头孢呋辛S沙雷菌：头孢呋辛S对全部受试抗生素均R，不可能结果药敏试验及药敏试验结果介绍57/84罕见矛盾结果假如奈替米星R/I而妥布霉素S（通常二者同时耐药）假如丁氨卡那R/I，而妥布霉素/奈替米星S（对丁氨卡那耐药肠杆菌科细菌对其它氨基糖苷类抗生素耐药）β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂R，而该种β-内酰胺类抗生素S，不可能结果。药敏试验及药敏试验结果介绍58/84有提醒意义结果，结果需要修正

A.非ESBL大肠埃希菌，全部氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸I/S，氨苄西林/舒巴坦I/S，全部三代头孢S，羧基青霉素R/I，脲基青霉素R/I，说明该菌耐药性可能是因为取得性β-内酰胺酶引发。结果应修正为全部青霉素R，全部一代头孢R。药敏试验及药敏试验结果介绍59/84B.大肠埃希菌，志贺菌或小肠结肠炎耶尔森菌：任何一代头孢R/I，全部羧基青霉素S，或全部脲基青霉素S，且全部三代头孢S，说明耐药性可能是由低水平头孢菌素酶引发。结果修正为全部一代头孢为R，全部氨基青霉素R/I，阿莫西林/克拉维酸R/I，氨苄西林/舒巴坦R/I。药敏试验及药敏试验结果介绍60/84C.大肠埃希菌：全部氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸或氨苄西林/舒巴坦R，全部一代头孢菌素R，全部二代头孢菌素R/全部头霉素R，全部三代头孢菌素R/I，说明耐药性由内在高水平头孢菌素和/或ESBL引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂，头孢菌素和单环类活性降低。结果修正为全部三代头孢R，全部青霉素R，氨曲南R，全部二代头孢R，全部青霉素/酶抑制剂R/I，全部口服三代头孢R，头孢哌酮R，全部头霉素R。药敏试验及药敏试验结果介绍61/84D.大肠埃希菌：全部氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸R/氨苄西林/舒巴坦R，全部一代头孢菌素R，全部羧基青霉素/全部脲基青霉素R/I，全部三代头孢菌素S，说明耐药性由内在低水平头孢菌素和/或高水平取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂，二代头孢菌素活性降低。结果修正为全部青霉素R，全部青霉素/酶抑制剂R/I。药敏试验及药敏试验结果介绍62/84E.奇异变形杆菌、沙门菌：全部氨基青霉素R，全部三代头孢菌素S。修正结果为：全部青霉素R，全部一代头孢菌素R/I。F.ESBL型大肠埃希菌，结果修正为全部青霉素R，全部头孢菌素，除头霉素外R，氨曲南R。

药敏试验及药敏试验结果介绍63/84G.普通变形杆菌：全部氨基青霉素R，全部一代头孢菌素R，全部羧基青霉素R/I或全部脲基青霉素R/I，全部三代头孢S。说明可能由内在头孢菌素酶和取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂、一代二代头孢菌素活性下降。结果修正为全部青霉素R，全部二代头孢R/I，全部青霉素/酶抑制剂R/I。药敏试验及药敏试验结果介绍64/84H.普通变形杆菌：全部氨基青霉素R，任何一代头孢R，全部羧基青霉素或脲基青霉素S，全部三代头孢菌素S。说明耐药性由内在头孢菌素酶引发，使一代、二代头孢菌素抗菌活性下降。结果修正为：全部一代头孢R，全部二代头孢R/I。I．肠杆菌科细菌：对环丙沙星耐药细菌对全部三代喹诺酮类抗生素耐药。

药敏试验及药敏试验结果介绍65/84J.志贺菌：全部氨基青霉素R，全部三代头孢S，任何羧基青霉素或任何脲基青霉素R/I，说明耐药性可能由取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素和一代头孢菌素抗菌活性下降。结果修正为全部青霉素R，全部一代头孢菌素R/I。药敏试验及药敏试验结果介绍66/84K．奇异变形菌、沙门菌：全部氨基青霉素R，全部一代头孢和全部脲基青霉素R/I，全部头霉素S，任何三代头孢菌素R/I或头孢泊肟R，或氨曲南R/I，说明耐药性可能由ESBL引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂、头孢菌素和单环类抗生素抗菌活性下降。结果修正为：全部青霉素R，全部头孢菌素（除头霉素外）R，氨曲南R。

药敏试验及药敏试验结果介绍67/84非发酵菌铜绿假单胞菌/不动杆菌药敏试验及药敏试验结果介绍68/84不可能结果

A.假如三代和四代头孢菌素S/I，而一代，二代头孢或头孢克肟、头孢泊肟、氨基青霉素敏感。这么结果不可能B.全部氨基青霉素，或阿莫西林/克拉维酸，或氨苄西林/舒巴坦，或任何一个一代或任何一个二代头孢，或任何头霉素，或任何四环素，或任何一代喹诺酮类，或复方新诺明S。这么结果很罕见，铜绿假单胞菌对上述抗生素呈多重耐药性药敏试验及药敏试验结果介绍69/84C.鲍曼不动杆菌或无硝不动杆菌：全部氨基青霉素或一代二代头孢或氯霉S，这个结果不可靠，这两个菌对以上抗生素天然耐药。D.洋葱伯克霍尔德菌：氨基糖苷类抗生素或亚胺培南S，这个结果不太可能，该菌对以上抗生素天然耐药。药敏试验及药敏试验结果介绍70/84罕见结果（值得注意）

A.铜绿假单胞菌：假如亚胺培南R，而头孢他啶S，替卡西林S，说明耐药性最大可能为细菌细胞壁通透性下降所致，不指示与其它β-内酰胺类抗生素交叉耐药。B.不动杆菌属（洛菲不动杆菌和琼氏不动杆菌），气单胞菌属（嗜水、豚鼠、维罗纳气单胞菌温和生物变种），支气管炎博德特菌，浅黄金色单胞菌，多杀巴斯德菌，多食鞘氨醇杆菌，洋葱伯克霍尔德菌，施氏假单胞菌：对复方新诺明R。这种结果不太可能，这些细菌对该药通常是敏感。

药敏试验及药敏试验结果介绍71/84罕见矛盾结果

A.丁氨卡那R/I，庆大霉素或奈替米星S。结果矛盾B.妥布霉素R/I，庆大霉素S。结果矛盾C.假单胞菌：派拉西林R/I，任何氨基青霉素S或替卡西林S，该结果不可能，因为对脲基青霉素耐药细菌通常交叉耐受氨基和羧基青霉素。药敏试验及药敏试验结果介绍72/84有提醒意义结果，结果需要修正

A.非发酵菌：假如对环丙沙星R，则说明对其它喹诺酮类抗生素耐药，结果修正为：全部喹诺酮类抗生素R。B.铜绿假单胞菌：头孢他啶R/I，替卡西林/克拉维酸R或全部脲基青霉素R，说明细菌对全部三代头孢、青霉素、青霉素/酶抑制剂及单环类交叉耐药。汇报修正为：全部三代头孢R/I，全部青霉素R/I，全部青霉素/酶抑制剂R/I，全部单环类R/I。药敏试验及药敏试验结果介绍73/84C.铜绿假单胞菌：替卡西林R，替卡西林/克拉维酸R或派拉西林R或阿洛西林R，头孢他啶S，氨曲南S。说明耐药性是由取得性β-内酰胺酶引发。结果修正为全部青霉素R。药敏试验及药敏试验结果介绍74/84葡萄球菌

药敏试验及药敏试验结果介绍75/84

不可