Ube基础与血液肿瘤研究

主要内容肿瘤微环境与CD13白血病与CD13CD13抑制剂—乌苯美司乌苯美司双重作用机制的基础研究乌苯美司在血液肿瘤治疗中应用现在是1页\一共有69页\编辑于星期一肿瘤微环境肿瘤微环境就是指在肿瘤在生长、浸润和转移过程中，由肿瘤细胞及细胞外间质相互作用后形成的肿瘤细胞生长的特殊环境。肿瘤微环境中的各种成份相互作用，通过多种途径刺激肿瘤细胞生长和转移。2现在是2页\一共有69页\编辑于星期一肿瘤血管生成是肿瘤微环境中的重要环节内皮细胞周细胞成纤维细胞基底膜细胞外间质免疫细胞肿瘤微环境中的各个成份通过多种途径调节肿瘤血管的生长和形态肿瘤微脉管系统是决定其内部微环境的主要因素血管内血管生成调节因子...................................................................................................................................................VEGF3现在是3页\一共有69页\编辑于星期一肿瘤微环境与肿瘤侵袭、转移4现在是4页\一共有69页\编辑于星期一降解基板和细胞外基质是肿瘤转移的关键步骤纤溶酶原(组织液中高浓度存在)纤溶酶原激活剂纤溶酶降解细胞外基质和基板基质金属蛋白酶前体基质金属蛋白酶降解基板和细胞外基质所涉及的蛋白酶5现在是5页\一共有69页\编辑于星期一T细胞:TIL/CTLNK单核巨噬细胞肿瘤转移微环境肿瘤微环境—肿瘤转移的关键内皮细胞降解周围基质血管生成因子血小板、血管内皮细胞血管壁和细胞外基质现在是6页\一共有69页\编辑于星期一金属蛋白酶——氨肽酶N，CD13

氨肽酶N(APN，CD13)属于结合Zn的金属蛋白酶超家族，广泛分布于造血细胞、成纤维细胞、脑细胞和肠、肾、肝细胞等，参与蛋白水解，参与细胞和器官的正常蛋白代谢。在多种肿瘤细胞表面高水平表达，如白血病、前列腺癌、结肠癌、非小细胞肺癌等，被称作肿瘤细胞标记物。现在是7页\一共有69页\编辑于星期一子宫内膜腺癌、卵巢癌组织中APN/CD13的表达

子宫内膜腺癌粘液性囊腺癌浆液性囊腺癌阴性对照APN/CD13在肿瘤细胞表达较强，间叶组织较弱

Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250现在是8页\一共有69页\编辑于星期一氨肽酶N—CD13作用一、促进肿瘤细胞侵袭与转移CD13通对基底膜成分(基膜和Ⅳ型胶原蛋白)的水解作用,进行组织消化穿透;一种辅助的粘附分子，促进肿瘤细胞附着，参与细胞信号传导、炎症驱化；促进肿瘤新生血管的形成：

在血管形成刺激因素如缺氧、VEGF作用下,新生血管内皮CD13mRNA及表达上调,而成熟血管内皮无CD13表达。现在是9页\一共有69页\编辑于星期一氨肽酶N—CD13作用CD13连续降解：多的肽调节因子，其中包括免疫活性物质，从而降低了机体免疫；抑制免疫细胞对肿瘤细胞表面抗原的识别和直接杀伤细胞的能力。二、

免疫负调节现在是10页\一共有69页\编辑于星期一胰腺癌患者体内CD13的表达量与肿瘤血管密度的关系IMD：intratumormicrovesseldensity(肿瘤内微血管密度)结论：CD13的表达与肿瘤血管生成成正相关IkedaN,etal.ClinCancerRes,2003,9∶1503现在是11页\一共有69页\编辑于星期一CD13表达阴性(-)胰腺患者生存期

明显延长IkedaN,etal.ClinCancerRes,2003,9∶1503现在是12页\一共有69页\编辑于星期一CD13表达低的NSCLC患者总生存率显著延长A：90例NSCLC患者生存期CD13表达量关系B：40例Ⅳ期NSCLC患者生存期与CD13表达量关系HaruyasuMurakami，ClinCancerRes

,2005，11：

8674现在是13页\一共有69页\编辑于星期一主要内容肿瘤微环境与CD13白血病与CD13CD13抑制剂——乌苯美司乌苯美司双重作用机制的基础研究乌苯美司在血液肿瘤治疗中应用现在是14页\一共有69页\编辑于星期一CD13在白血病中表达CD13最初作为髓细胞表面标志被发现，表达于GM-CFU和髓细胞分化发育的各阶段、成熟的单核细胞和巨噬细胞、树突状细胞(DC)以及急性髓细胞白血病细胞（AML）、慢性髓细胞白血病（CML）急变危象期细胞以及少数淋巴细胞白血病细胞，多年来作为白细胞抗原被用于白血病免疫分型，提示对髓细胞的分化发育有重要作用。PuttiMC,etal.Blood,1998,92(3):795-80115现在是15页\一共有69页\编辑于星期一CD13在AML患者中的表达NadaKraguljac,AmJClinPathol2000;114:29-3480%以上的患者高表达CD1316现在是16页\一共有69页\编辑于星期一CD13在B-ALL白血病的表达方法：90例B-cellALL，免疫表型分析符合早期B淋巴细胞白血病。分离出具有高度增殖性B细胞亚群，免疫标志与正常人B细胞相似（表达CD10、CD19、CD22、CD24、Tdt，共表达CD13)。用CD13抗体作用细胞后，观察细胞的生长。CancerImmunolImmunother2010Jan.59(1)125-3517现在是17页\一共有69页\编辑于星期一结果与结论结果：阻断白血病细胞表面CD13，能抑制其增殖结论：①CD13促进该阶段的恶性转化

②CD13也许是该阶段急性B淋巴细胞白血病新

的分子治疗的一个重要靶点CancerImmunolImmunother2010Jan.59(1)125-3518现在是18页\一共有69页\编辑于星期一CD13通过降解IL-8，抑制白血病细胞凋亡血管内皮细胞互相接触释放（凋亡因子）高表达CD13抵抗诱导白血病细胞凋亡作用被

IL-8是CD13/APN

的底物，很可能CD13／APN通过降解IL-8，抑制血细胞凋亡，起到促进血细胞增殖发育的作用。MishimaY.etal.JNatlCancerInst,2002,94:1020—102819现在是19页\一共有69页\编辑于星期一主要内容肿瘤微环境与CD13白血病与CD13CD13抑制剂——乌苯美司乌苯美司双重作用机制的基础研究乌苯美司在血液肿瘤治疗中应用现在是20页\一共有69页\编辑于星期一CD13抑制剂—乌苯美司

1976年,日本的梅泽滨夫等人从网状橄榄链霉菌培养液中发现了一种具有抗菌作用和免疫增强作用的小分子二肽化合物,为氨基肽酶N的特异性抑制剂，具有直接和以宿主为中介的抗肿瘤活性作用。

万乐乌苯美司片（专利创新剂型）于2009年上市。现在是21页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司—CD13抑制剂

提高机体免疫力抑制CD13123123现在是22页\一共有69页\编辑于星期一现在是23页\一共有69页\编辑于星期一不同蛋白酶抑制剂对ATRA诱导NB4细胞分化的作用(*P<0.05)只有Ube在1ng/ml浓度下可增强ATRA对NB4细胞的分化作用不加10-7MATRA加10-7M

ATRAAmastatinA:抑氨肽酶AAntipain:抗蛋白酶素Chymostatin:糜蛋白酶抑制素Leupeptin:亮肽酶素Pepstatin:胃酶抑素UbenimexUbenimex现在是24页\一共有69页\编辑于星期一主要内容肿瘤微环境与CD13白血病与CD13CD13抑制剂——乌苯美司乌苯美司双重作用机制的基础研究乌苯美司在血液肿瘤治疗中应用现在是25页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司体外作用

金属蛋白酶CD13抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长抑制肿瘤新血管的形成

提高机体免疫力现在是26页\一共有69页\编辑于星期一

金属蛋白酶CD13抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长抑制肿瘤新血管的形成

提高机体免疫力现在是27页\一共有69页\编辑于星期一不同细胞株CD13金属蛋白酶的活性RichardA.etal.Blood,1990,75(2):pp462-469现在是28页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司对细胞表面CD13活性的抑制UbenimexRichardA.etal.Blood,1990,75(2):pp462-469phosp、D,L、N-carb:CD10抑制现在是29页\一共有69页\编辑于星期一

金属蛋白酶CD13抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长抑制肿瘤新血管的形成

提高机体免疫力现在是30页\一共有69页\编辑于星期一抑制K562细胞，诱导细胞凋亡SawafujiK,etal.Leukemia&Lymphoma2003;44(11):1987-1996现在是31页\一共有69页\编辑于星期一氨肽酶(APN)/CD13抑制剂乌苯美司增强卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250MamoruYamashitaetal现在是32页\一共有69页\编辑于星期一不同卵巢癌细胞株APN/CD13的表达和紫杉醇IC50值的相关性

Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250APN/cd131expressionIC50(ng/ml)SKOV395.233±11HEY692.443±8.2ES-2987.342±4.2NOS-25.05.0±3.2TAOV7.47.2±4.2NOS48.222±3.2PMG-16.25.0±3.21MeanfluorescenceintensityinFACSanalysis现在是33页\一共有69页\编辑于星期一不同卵巢癌细胞株APN/CD13的表达和紫杉醇IC50值的相关性

APN/CD13在肿瘤细胞表达越强，紫杉醇的IC50值越高，肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性越低。Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250现在是34页\一共有69页\编辑于星期一c、

含有PAC(100ng/ml)或/和乌苯美司(100ug/ml)处理24hr，ES-2形态学改变d、PAC或/和乌苯美司对ES-2细胞凋亡的影响PACPAC+UBEcontrol凋亡凋亡乌苯美司能增强紫杉醇诱导凋亡作用Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250现在是35页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司作用引起的凋亡相关分子改变Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250现在是36页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司对裸鼠体内腹膜转移OVCA肿瘤生长的影响PACPAC+UBE四组裸鼠的生长曲线A:PBSB:PACC:UBED:PAC+UBEB和D组生存时间：

27.1±6.6,37.7±7.0d,D组生存时间明显长于B组(p<0.05)乌苯美司联合紫杉醇作用裸鼠体内结果Int.J.Cancer.2007,120,2243–2250现在是37页\一共有69页\编辑于星期一

金属蛋白酶CD13抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长抑制肿瘤新生血管的形成

提高机体免疫力现在是38页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司对血管内皮细胞生长的影响（相差显微镜图）血管生成是肿瘤生长和转移的关键步骤，CD13/APN是重要调节因子，Ube作为CD13的功能性抑制剂，与CD13单抗相似，可抑制HUVEC的生长，与对照组有显著差异。UBETheangiogenicregulatorCD13/APNisatranscriptionaltargetofRassignalingpathwaysinendothelialmorphogenesisBhagwatSV,etal.Blood.2003

;101(5)

:1818-1826现在是39页\一共有69页\编辑于星期一

金属蛋白酶CD13抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞的生长抑制肿瘤新血管的形成

提高机体免疫力现在是40页\一共有69页\编辑于星期一UBE100ug、500ug能显著上调IL-2

、IFN-γ。乌苯美司改变抗原刺激免疫淋巴细胞因子分泌量ClinExpImmunol1998;111:30–35现在是41页\一共有69页\编辑于星期一不同浓度的乌苯美司对NK细胞活性的影响BS浓度在0.01-1ug/ml范围内，对NK细胞活性的影响不明显（P﹥0.05）当BS浓度大于10ug/ml时，能显著增强小鼠脾NK细胞活性，并随浓度提高而增强。乌苯美司对小鼠脾脏天然杀伤细胞活性的增强作用.中国医药工业杂志，1995，26（6）：255-257浓度（ug/ml)NK细胞活性（%）E/T100:150:1037.45±5.824.09±7.50.0136.91±8.724.81±9.50.138.57±9.626.50±8.4139.73±11.227.41±12.31058.32±14.8※※46.89±18.9※※10065.73±17.4※※52.75±15.6※※※※

P<0.01,与相应的对照组比较现在是42页\一共有69页\编辑于星期一主要内容肿瘤微环境与CD13白血病与CD13CD13抑制剂——乌苯美司乌苯美司双重作用机制的基础研究乌苯美司在血液肿瘤治疗中应用现在是43页\一共有69页\编辑于星期一KazuoOTA,etal.JpnJCancerChemother.1986,13(4):1017-25乌苯美司治疗成人AML临床研究44现在是44页\一共有69页\编辑于星期一方法患者101例，年龄15-65岁先后进行诱导/巩固/强化和维持治疗，随后随机分组：对照组：维持治疗仅用化疗53例试验组：化疗+Ube（30mg/d，早餐前）48例两组患者基本信息具有可比性。最后评价两组患者的缓解时间和远期生存率。45现在是45页\一共有69页\编辑于星期一46结果：4年生存率比较4年OS:Ube46%----对照25.5%现在是46页\一共有69页\编辑于星期一15-49岁组4年生存率比较4年OS:46.3%4年OS:31.5%MST:23.4MST:39.5Ube46.3%-----31.5%(对照)47现在是47页\一共有69页\编辑于星期一50-65岁组4年生存率比较4年OS:44.5%4年OS:15.8%MST:14.5MST:32.6Ube44.5%----15.8%(对照)48现在是48页\一共有69页\编辑于星期一49两组复发后再次缓解率比较结果显示：乌苯美司组复发后再次缓解率53.6%，优于对照组30.8%

。现在是49页\一共有69页\编辑于星期一50比较两组复发后再次缓解的患者生存率结果显示：乌苯组中位生存时间为8.4个月，优于对照组7.1个月。乌苯组3年生存率为18.0%，有优于对照组3.3%

的趋势。现在是50页\一共有69页\编辑于星期一51结论

乌苯美司联合化疗治疗成人非淋巴细胞白血病疗效确切，尤其是对于50岁以上患者，4年生存率显著提高。现在是51页\一共有69页\编辑于星期一王晓桃,等.白血病·淋巴瘤,2013,22(10):623-626.乌苯美司联合CAG方案治疗老年及难治性AML的临床分析52现在是52页\一共有69页\编辑于星期一方法患者56例，年龄32~75岁，中位年龄63岁随机分组：联合组（29例）：CAG+Ube（30mg/d，早餐前或分3次口服）单用组（27例）：CAG两组患者基本信息无统计学差异。评价两组疗效、WBC变化、IL-2及免疫细胞百分比的改变。53现在是53页\一共有69页\编辑于星期一54结果：缓解率CRRRNR联用组55.17%（16/29）86.21%（25/29）4/29单用组40.74%（11/27）62.96%（17/27）10/27P>0.05<0.05现在是54页\一共有69页\编辑于星期一结果：WBC变化55现在是55页\一共有69页\编辑于星期一结果：免疫学指标变化56现在是56页\一共有69页\编辑于星期一57结论乌苯美司联合CAG方案治疗老年及难治性AML患者有较好的疗效，乌苯美司能减轻化疗后骨髓抑制和促进免疫恢复作用。现在是57页\一共有69页\编辑于星期一

ARandomizedTrialComparingIndividualizedVs.Non-IndividualizedTreatmentforElderlyAcuteMyeloidLeukemia:JALSGGML200Study

AtsushiWakita,MDet.Al.Blood(ASHAnnualMeetingAbstracts)2008112:Abstract2961AmericanSocietyofHematology现在是58页\一共有69页\编辑于星期一研究设计enocitabine(BH-AC)200mg/㎡ond1–8,3hinfusiondaunorubicin(DNR)40mg/㎡ond1–3,30mininfusion新诊断为AML患者244例，年龄均大于65岁

接受诱导化疗达到CR后随机分组UBE安慰剂UY组UN组巩固治疗：包括含BH-AC、MIT、DNR、ACR等方案AtsushiWakita,MDet.Al.Blood(ASHAnnualMeetingAbstracts)2008112:Abstract2961AmericanSocietyofHematology现在是59页\一共有69页\编辑于星期一结果与结论结果：CR率65%，女性>男性（P<0.05)

3年OS组UY和组UN:43.1%、26.9%(p=0.073).结论：对于老年AML达到CR者，服用UBE有更多的生存获益。AtsushiWakita,MDet.Al.Blood(ASHAnnualMeetingAbstracts)2008112:Abstract2961AmericanSocietyofHematology现在是60页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司联合化疗治疗慢性髓性白血病CML的主要目标是达到细胞遗传学的完全缓解。方法：

乌苯美司与马利兰联合治疗23例慢性髓性白血病(CML)

结果：全部达到血液学完全缓解。其中细胞遗传学CR6例(26%)，PR1例(4%)，PD6例(26%)。细胞遗传学转为正常中位持续220个月(60～410)。YUzukaetal.GanToKagakuRyoho,1993;20(2):207-14.现在是61页\一共有69页\编辑于星期一生存结果3年生存率为(86.6土9.0)(95%可信限)，对照64土9.6%P(<0.01)加速期患者生存期也得到延长。YUzukaetal.GanToKagakuRyoho,1993;20(2):207-14.Ube现在是62页\一共有69页\编辑于星期一乌苯美司联合化疗治疗CML研究方法：Ph染色体及bcr-abl融合基因均(+)40例CML（初治31例,复治10例）化疗方案：Ara-C50mg×7-10d,HU1.0tid，口服至wbc降至10×109/L～20×109/L之间,停用Ara–C随机分成两组：

IFN-α和乌苯美司30mg,每日1次清晨空腹口服，至6个月所有病例均取治疗6月后的检测值欧阳敏.江西省人民医院;白血病·淋巴瘤2001,10（4）:422-425现在是63页\一共有69页\编辑于星期一结果乌苯美司组全部达完全血液学缓解,6例获得细胞遗传学反应,经t检验,IFN治疗组及乌苯美司治疗组均可使Ph量下降(p<0.05),两组下降幅度无明显差别(p>0.05)。组别n治疗前