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文档简介

碱性磷酸酶Km值的第1页/共10页底物浓度酶浓度pH温度激活剂抑制剂※

研究一种因素的影响时，其余各因素均恒定。影响酶促反应的因素第2页/共10页底物浓度对反应速率影响在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速率的影响呈矩形双曲线关系。[S]V第3页/共10页[S]：底物浓度V：不同[S]时的反应初速度Vmax：最大反应速度(maximumvelocity)Ｋm：米氏常数(Michaelisconstant)ＶVmax[S]

Km+[S]

＝──第4页/共10页

Km值①Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。②意义：a)

Km是酶的特征性常数之一；b)

Km可近似表示酶对底物的亲和力；c)

同一酶对于不同底物有不同的Km值。第5页/共10页

KmKm＝[S]2＝Km+[S]

Vmax

Vmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2第6页/共10页双倒数作图法

Vmax[S]Km+[S]V=（林－贝氏方程）+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]两边同取倒数Ｋm值与Ｖmax值的测定第7页/共10页注意事项1底物和酶取样准确2保温时间准确

1234567加入酶的时间加入碱性溶液终止反应的时间9:00:009:00:309:01:309:02:009:02:309:03:009:01:009:15:009:15:309:16:009:16:309:17:009:17:309:18:00保证每个试管的反应时间为15分钟第8页/共10页实验报告1绘制矩形双曲线图2绘制双倒数图，并通过双倒数图读出碱性磷酸酶对磷

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