实验三细菌的革兰氏染色_第1页
实验三细菌的革兰氏染色_第2页
实验三细菌的革兰氏染色_第3页
实验三细菌的革兰氏染色_第4页
实验三细菌的革兰氏染色_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验三细菌的革兰氏染色第1页，共12页，2023年，2月20日，星期六一、实验目的与要求:1、了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性2、学习并掌握革兰氏染色法第2页，共12页，2023年，2月20日，星期六二、实验原理：

革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。

第3页，共12页，2023年，2月20日，星期六G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。第4页，共12页，2023年，2月20日，星期六三、实验仪器及材料1.仪器：显微镜、酒精灯等2.实验材料：菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌染色剂：草酸铵结晶紫染液、碘液、番红、95%乙醇

第5页，共12页，2023年，2月20日，星期六四、内容与方法

1.涂片2.晾干3.固定4.结晶紫染色：加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟；5.水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。第6页，共12页，2023年，2月20日，星期六6.媒染：碘液，媒染1min；7.水洗：用水洗去碘液。8.脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色10s-18s至流出液无色，立即水洗。9.复染：滴加番红复染1min；10.水洗：用水洗去涂片上的番红染色液。11.晾干：将染好的涂片用吸水纸吸干。12.镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。

第7页，共12页，2023年，2月20日，星期六第8页，共12页，2023年，2月20日，星期六革兰氏染色流程图涂片干燥结晶紫染色碘液媒染水洗95%酒精脱色

水洗番红染色水洗晾干镜检1分钟10秒1分钟固定水洗

1分钟第9页，共12页，2023年，2月20日，星期六注意事项：1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。2.菌龄也有影响。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。3.不要涂片太厚，会造成假阴性或假阳性。

第10页，共12页，2023年，2月20日，星期六五、实验结果：紫色菌：革兰氏阳性菌红色菌：革兰氏阴性菌第11页，共12页，2023年，2月20日，星期六六、思考题1.你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？2.现有一株细菌宽度明显大于大肠杆菌的粗壮杆菌，请你鉴定其革兰

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论