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文档简介
实验三线粒体和液泡系的
超活染色与观察一实验目的1观察动、植物活细胞内线粒体、液泡的形态、数量和分布2了解细胞和细胞器的超活染色技术。二实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒的一种染色方法。活体染色可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据染色剂性质和染色方法不同,分为体内活染和体外活染。活体染色之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分,主要是染料的“电化学”特性起重要作用。碱性燃料的胶粒表面带阳离子,酸性染料的胶粒表面带有阴离子,而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子,这样,他们彼此就发生了吸引作用。但不是任何染料都可以作为活体染色剂之用,应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料,而且总要配成稀淡的溶液来使用。一般是以碱性染料最为适用,可能因为它具有溶解在类脂质的特性,易于被细胞吸收,JanusgreenB和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料,对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。三实验用品1.器材:显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸2.试剂:Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红3.材料:人口腔上皮细胞洋葱鳞茎内表皮细胞小麦或黄豆幼根根尖四实验方法一线粒体的超活染色与观察詹纳斯绿B能专一对线粒体进行超活染色,呈蓝绿色。洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的
超活染色载玻片→滴一滴詹纳斯绿B染液→撕取一小片洋葱鳞茎内表皮→染色10-15分钟吸去染液→加一滴Ringer液→盖上盖玻片→观察小麦液泡系的超活染色与观察小麦根尖细胞液泡系的中性红染色观察双面刀片→小麦或黄豆幼苗根尖→切一纵切面→中性红染色5-10分钟吸去染液→加一滴Ringer液→盖上盖玻片→镊子轻轻下压盖玻片→观察五
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