生长控制的教案

生长控制的教案第1页/共35页理化因子抑菌还是杀菌作用的相关因素：理化因子的强度或浓度；同一浓度理化因子作用时间的长短；不同种类的微生物；同种微生物的不同生长时期；第2页/共35页一、环境对微生物的影响影响微生物的主要因素营养物质水的活性温度pH氧第3页/共35页1、营养物质机体降低或停止细胞物质合成，避免能量消耗通过诱导合成特定的运输系统，充分吸收环境中微量的营养物质以维持机体的生存机体对胞内某些非必要成分或失效的成分进行降解以重新利用当环境中营养物质不足时：第4页/共35页2、水的活性

在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量，一般用在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比表示，即：

αw=Pw/Pow式中Pw代表溶液蒸汽压力,POw代表纯水蒸汽压力。纯水αw为1.00；溶液中溶质越多,αw越小。微生物一般在αw为0.60～0.99的条件下生长,αw过低时,微生物生长的迟缓期延长,比生长速率和总生长量减少。微生物不同，其生长的最适αw不同。第5页/共35页3、温度表7-3微生物生长的温度范围微生物类型最低温度最适温度最高温度嗜冷微生物0以下1520兼性嗜冷微生物020—3035嗜温微生物15—2020—4545以上嗜热微生物4555—6580超嗜热或超嗜温微生物6580—90100以上第6页/共35页温度对微生物生长的影响：影响酶活性；影响细胞质膜的流动性，进而影响细胞对营养物质的吸收与代谢产物的分泌；影响物质的溶解度第7页/共35页4、pH微生物最低pH最适pH最高pH细菌3—56.5—7.58—10酵母菌2—34.5—5.57—8霉菌1—34.5—5.57—8表7-5一般微生物生长的pH范围第8页/共35页5、氧微生物类型最适生长的氧体积分数好养等于或大于20%微好养2%—10%氧的忍耐型2%以下兼性厌氧有氧或无氧专性厌氧不需要氧、有氧时死亡表7-6微生物与氧的关系第9页/共35页自由基（freeradical）：凡是具有不成对电子的原子或基团，称为自由基或游离基。在书写时，一般在原子符号或者原子团符号旁边加上一个“·”表示没有成对的电子。自由基极易发生反应（二聚反应，夺氢反应，氧化反应，歧化反应等）自由基的共同特征：最外层的电子不成对第10页/共35页自由基非常活跃，非常不安分。就象我们人类社会中的不甘寂寞的单身汉一样，如果总也找不到理想的伴侣，可能就会成为社会不安定的素。当一个稳定的原子的原有结构被外力打破，而导致这个原子缺少了一个电子时，自由基就产了。于是它就会马上去寻找能与自己结合的另一半。它活泼，很容易与其他物质发生化学反应。

当它与其他物质结合的过程中得到或失去一个电子时，就会恢复平衡，变成稳定结构。这种电子得失的活动对生物可能是有益的也可能是有害的。

第11页/共35页二、控制微生物的化学物质抗微生物剂(Antimicrobialagent)生物合成的天然产物人工合成的化合物一类能够杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质第12页/共35页化学物质的抗微生物能力的测定液体培养法最低抑制浓度（minimuminhibitoryconcentration（MIC））实验平板培养法抑菌圈（zoneofinhibition）试验杀菌?抑菌?抗微生物剂的杀菌或抑菌作用无法区分!第13页/共35页抗微生物剂抑菌：抑菌剂(Bacteriostaticagent)杀菌杀菌剂(Bactericide)溶菌剂(Bacteriolysis)待测化学物质对数生长培养物定时测定总菌数和活菌数第14页/共35页抗微生物剂非选择性（对所有细胞均有毒性）有选择性（对病原微生物毒性更强）消毒剂(Disinfectant)防腐剂(Antisepsis)抗代谢药物抗生素中草药有效成分（化学治疗剂）第15页/共35页（一）防腐剂和消毒剂特点：对一切活细胞都有毒性，不能用于人或动物体内的化学治疗。消毒剂：可杀死微生物，通常用于非生物材料的灭菌或消毒。防腐剂：能杀死微生物或抑制其生长，但对人及动物的体表组织无毒性或毒性低，可作为外用抗微生物药物。抗微生物剂又称杀菌剂(Germicide),通常又将它们分为消毒剂(Disinfectant)和防腐剂(Antisepsis)，（P150第二大段）非选择性的抗微生物剂通常分为消毒剂(Disinfectant)和防腐剂(Antisepsis)，本段中后面的“杀菌剂”均改为“消毒剂”（P150第二大段）第16页/共35页各种抗微生物化学制剂杀菌能力的比较标准：一般规定：处理时间为10分钟，供试菌定为Salmonellatyphi（伤寒沙门氏菌）。

在临床上最早使用的消毒剂----石炭酸由于各种微生物化学制剂的杀菌机制各不相同，故石炭酸系数仅有一定的参考价值。待测制剂最高稀释度达到同效的石炭酸的最高稀释度石炭酸系数：

=第17页/共35页（P150第二大段消毒剂广泛用于一些热敏感的或无法进行高温灭菌的物品或场所的灭菌：温度计、带有透镜的仪器设备、聚乙烯管或导管等；墙壁、楼板与仪器设备等表面和自来水；空气；防腐剂通常作为人体的外用品！第18页/共35页（二）抗代谢物(Antimetabolite)一类化合物：与必需的代谢物具有相似的结构；→可和特定的酶结合；→阻碍酶的功能；→干扰代谢的正常进行；叶酸对抗物（磺胺）、嘌呤对抗物（6-巯基嘌呤）、苯丙氨酸对抗物（对氟苯丙氨酸）、尿嘧啶对抗物（5-氟尿嘧啶）、胸腺嘧啶对抗物（5-溴胸腺嘧啶）等等第19页/共35页磺胺药物是最早发现，也是最常见的化学疗剂，抗菌谱广，能治疗多种传染性疾病。大多数革兰氏阳性细菌（如肺炎球菌、溶血性链球菌等）某些革兰氏阴性细菌（如痢疾杆菌、脑膜炎球菌、流感杆菌等）对放线菌也有一定的作用。1934年，德国I.G.Farben染料厂的G.Domagk一种红色染料（prontosil），白鼠静脉注射，可治疗因链球菌引起的感染，但在体外却无作用。1935年，进一步证明prontosil对人的链球菌病也有效。法国人Trefouel和英国人Fullerprontosil在体内转化成了具有抑菌作用的磺胺第20页/共35页磺胺是叶酸组成部分对氨基苯甲酸的结构类似物作用机理：磺胺的抑菌作用是因为很多细菌需要自己合成叶酸而生长。磺胺对人体细胞无毒性，因为人缺乏从对氨基苯甲酸合成叶酸的相关酶----二氢叶酸合成酶，不能用外界提供的对氨基苯甲酸自行合成叶酸，而必须直接利用叶酸为生长因子进行生长。第21页/共35页是由某些生物合成或半合成的一类次级代谢产物或衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或影响它种生物的生命活动，如杀死微生物或抑制其生长。抗生素(Antibiotic)：1、概念自上世纪40年代以来，已找到上万种新抗生素，合成了近10万种半合成抗生素，但其中在临床上常用的仅几十种。（三）抗生素第22页/共35页（参见P151图6-14）2、作用机制抑制细菌细胞壁合成、破坏细胞质膜、作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化、抑制蛋白质和核酸合成

（P151第二大段）抑制微生物的生长或杀死它们第23页/共35页由于不同微生物之间的细胞化学结构和代谢的差异，不同的抗生素的抗菌谱各异。第24页/共35页抗性菌株特点：细胞质膜透性改变，使抗生素不进入细胞或进入细胞后被细胞主动排出；药物作用靶改变；合成了修饰抗生素的酶；抗性菌株发生遗传变异，导致合成新的多聚体，以取代或部分取代原来的多聚体；第25页/共35页（参见P152）避免出现细菌的耐药性的措施：(1)第一次使用的药物剂量要足（用药时间足）；(2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素；(3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用；(4)对现有抗生素进行改造；(5)筛选新的更有效的抗生素；（P152第二大段）

尽量避免使用抗生素！第26页/共35页三、控制微生物的物理因素杀灭或抑制微生物的物理因素温度辐射作用过滤渗透压干燥超声波第27页/共35页（参见P143）（一）温度当温度超过微生物生长的最高温度或低于生长的最低温度都会对微生物产生杀灭作用或抑制作用第28页/共35页高温使蛋白质、核酸等重要生物大分子发生变性、破坏，以及破坏细胞膜上的类脂成分，导致微生物死亡。温度愈高，十倍致死时间（D）愈短（P152倒数第一段）D：在一定的温度下，微生物数量十倍减少的时间D值大小还随微生物的种类、生长时期、检测培养基的性质等因素有关。

高温的杀菌时间与样品中的微生物浓度有关。当微生物的浓度一致时，可以通过比较热致死时间长短来衡量不同微生物的热敏感性。第29页/共35页（参见P153）1、干热灭菌烘箱内热空气灭菌火焰灼烧干热灭菌160℃，2小时第30页/共35页2、湿热灭菌湿热比干热灭菌更好：更易于传递热量；更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构；湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件：多数细菌和真菌的营养细胞：在60℃左右处理5-10分钟；酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上温度处理；细菌的芽孢：121℃处理15分钟以上；第31页/共35页2、湿热灭菌1）巴斯德消毒（pasteurization）60-85℃处理15秒至30分钟2）煮沸消毒3）间歇灭菌（fractionalsterilizationORtyndallization）4）常规高压灭菌（autoclaving）5）连续加压灭菌（continuousautoclaving）121℃，15分钟；115℃，30分钟；135-150℃，5-15秒，工业上发酵培养基135-150℃，2-6秒，牛奶或其它液态食品（超高温灭菌）第32页/共35页（二）辐射作用辐射灭菌(RadiationSterilization)是利用电磁辐射产生的电磁波杀死大多数物