实验五福医大计数课件

实验五血小板计数（临检指导P48）目的掌握普通光学显微镜直接血小板

1.概述

血小板是由骨髓中成熟巨核细胞的胞质分割而生成。其生成受血小板生成素（TPO）的调节。正常静息状态下，血小板为双面微凸的圆盘形，直径2～4μm、平均体积7.2fl的非细胞结构成分。

染色后镜下可见血小板的胞质呈淡蓝色，内含较多的紫红色嗜天青颗粒。血涂片上，为红细胞数的1/30~1/20，通常每个油镜视野可见7~35个，分散或3~5成群分布。

由于血小板易黏附、聚集以致破坏，优质的血小板稀释液应具备的条件是：（1）有效地阻止凝血。（2）很快地固定血小板，防止血小板聚集和变形。（3）溶血稀释液要求红细胞破坏完全。（4）组成简单、容易保存、不长细菌。

根据所采用的稀释液不同而又分为破坏红细胞稀释法（溶血法）：

草酸铵溶血法：对红细胞破坏力强，血小板形态清楚。为首选常规计数方法。

复方尿素溶血法：尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防腐，稀释后血小板胀大易辨认，尿素容易分解，试剂容易失效。尿素不能完全破坏红细胞。

高铁氰化钾溶血法：试剂稳定易于长期保存但不能完全破坏红细胞。不破坏红细胞稀释法：复方碘稀释液。红细胞未破坏及试剂易细菌生长，干扰计数，已被淘汰。实验五血小板计数（2）操作步骤1）吸取稀释液：准确吸取10g/L草酸铵溶血剂0.38ml于小试管内。2）采血：准确采血20μl加入上述试管，立即充分混匀。3）静置：待完全溶血后再混匀1min。4）充池：混匀血小板悬液，并取1滴充入血细胞计数池，静置10min。5）计数：用高倍镜计数中央大方格内的中央及四角共5个中方格内的血小板数量。实验五血小板计数（4）注意事项1）稀释液必须符合优质的血小板稀释液，因此稀释液必须新鲜、洁净，无杂物和细菌污染；定期检查稀释液的质量，实验前应先做稀释液空白计数，符合仪器使用说明方可使用。2）器材及操作必须标准化和规范化①所用器材必须校准、洁净、干燥。②采血、充液、计数均应规范，避免血小板激活或破坏。③血小板悬液充入计数池后必须静置15min再计数，并在采血后1h内完成计数。时间过短或过长则可导致血小板未完全下沉或失去光泽，使计数结果偏低。3）及时核准血小板计数结果由经验丰富的检验人员进行。

常用的方法有：①用同1份血标本制备良好的血涂片，观察血小板数量、形态和分布情况，进行核对。②用血小板计数的参考方法核对计数结果。③每份标本最好做2次计数，若2次计数误差小于10%，取其均值报告；若计数误差大于10%，应做第3次计数，取2次相近结果的均值报告。4）排除非技术因素的影响某些病理情况可干扰计数，出现血小板假性减少或增多。①血小板聚集或凝集、异常蛋白血症、巨大血小板、卫星现象、高脂血症导致血小板假性减少。②HbH包涵体病人的红细胞碎片、慢性淋巴细胞性白血病病人的淋巴细胞核和细胞质碎片、小红细胞等可被误认为血小板，导致血小板假性增多。5）标本采集

最好清晨采血，采集过程中应避免反复握拳、拍打采血部位、扎止血带的时间过长（＜1min），以免血小板激活而影响计数结果。采血后立即进行血小板检测。3）血细胞分析仪计数法：简便、快速、重复性好，可同时测定血小板、MPV及PDW等多个指标的特