(32)-7.3灭菌与无菌操作

知识点七：灭菌与无菌操作1.掌握灭菌与无菌操作的方法及分类2.熟悉灭菌与无菌操作的相关概念知识内容及学习要求

灭菌和无菌操作技术是灭菌制剂和无菌制剂质量控制的重要保证，是必不可少的环节。1.灭菌（sterilization）系指用适当的物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。2.无菌（sterility）系指在指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。一、概述定义：

用物理或化学方法杀灭或除去物体上或物品中活的微生物（包括繁殖体和芽孢）或利用与控制一定条件，避免被微生物污染的方法与技术。3.灭菌与无菌操作的主要目的杀灭或除去微生物繁殖体和芽孢，最大限度地提高药物制剂的安全性，保证制剂的临床疗效。

保证绝对无菌比较困难，以最终无菌产品的微生物存活概率作为评价灭菌效果的一个指控指标，称为无菌保证水平。（sterilityassurancelevel,SAL）

微生物存活概率：

SAL≤10-6即一百万件产品中可能存在活微生物的几率为1。

火焰灭菌法药液灭菌法物理灭菌法化学灭菌法湿热灭菌法过滤除菌法微波灭菌法紫外线灭菌法辐射灭菌法流通蒸气灭菌法煮沸灭菌法低温间歇灭菌法射线灭菌法灭菌方法气体灭菌法干热空气灭菌法干热灭菌法热压灭菌法无菌操作法

利用物理方法破坏微生物体内蛋白质、核酸中氢键，使蛋白质变性，核酸破坏，酶失活，从而导致微生物的死亡。1.干热灭菌法

火焰灭菌物品与用具(耐火焰）：金属、玻璃、瓷器

干热空气灭菌温度要求高，玻璃、金属制品、油脂类及粉末药品；不适用于橡胶、塑料和大部分药品。（一）物理灭菌法2.湿热灭菌法流通蒸汽灭菌：消毒、不耐热制剂辅助灭菌（非可靠）煮沸灭菌：注射器及针头等消毒低温间歇式灭菌：对热敏感制剂可加适量抑菌剂3.热压灭菌法最为常用的方法热源：高压饱和水蒸汽；特点：灭菌可靠，能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢。适用范围：适于耐高温和高压蒸气的药物制剂、玻璃及金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等。原理：蒸气潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或者凝固。影响灭菌的因素：1.微生物的种类与数量：芽孢>繁殖体>衰老体2.蒸汽性质：饱和蒸汽>湿饱和蒸汽>过热蒸汽3.灭菌温度与时间4.液体介质性质：pH（酸>碱>中）、营养程度等在达到有效灭菌的前提下，尽可能降低灭菌温度和缩短灭菌时间！原则灭菌1.必须使用饱和蒸气；2.必须排尽灭菌柜内空气；3.以全部药液温度达到所要求温度时开始计时；4.灭菌毕先停止加热，逐渐减压使柜内压力与大气压相等，稍稍打开灭菌柜，10～15min后全部打开。思考使用热压灭菌柜时应该注意的问题？4.过滤除菌法（机械除菌）≤0.22μm微孔滤膜滤器,菌体>1μm，

G6号垂熔玻璃漏斗（芽胞≤0.5μm）、热原1-5nm？适于对热不稳定的药物溶液、气体、水等灭菌。5.射线灭菌法紫外线灭菌（254nm）空气灭菌、液体灭菌、物料表面灭菌微波灭菌：300MHz-300GHz，液体、固体物料灭菌(延长保质期1/3）辐射灭菌：γ射线，不耐热（不升高制品温度）；生物大分子？（二）化学灭菌法(Chemicalsterilization)

主要目的：减少微生物数目，控制一定无菌状态。

1.气体灭菌法用于环境消毒、不耐热器具、设施设备、粉末注射剂灭菌

环氧乙烷、甲醛、臭氧、甘油、丙二醇、过氧乙酸

2.药液灭菌法主用于皮肤、无菌器具与设备消毒

0.1%～0.2％苯扎溴胺、2%酚或煤酚皂、75%酒精（三）无菌操作法整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作。适用对象：不耐热药物的注射剂、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂制备。步骤：1.无