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实验二十三激素对鱼类排卵和产卵的影响实验五激素对鱼类須E卵和产卵的影响［实验类型】：瀏合型了解激素控制［实验原理】:实验目的】爲0学时和产啊晌如类人唯了解激素控制［实验原理】鱼类排卵和产卵的机理；掌握鱼类人工催产的基本方法。隹类性腺的最后成熟和排卵受下丘脑-脑垂体-性腺轴分泌的激素所控制。下丘脑分泌的两种因子，促性腺激素释放激素（GnRH）和促性腺激素释放抑制因子（GRIF,即多巴胺）共同控制脑垂体促性腺激索（GtH）的释放；GtH又作用于性腺，引起类固醇激素的释放，从而诱导卵母细胞成熟和排卵。本实验使用哺乳类促性腺激素释放激素的类似物（LHRH-A）,多巴胺受体拮抗物domperidone（以消除GRIF对GH分泌的抑制作用），鲤角脑垂体提取液和人体绒毛膜促性腺激素（HCG）对鱼类进行催产，苴机理可简单表示为：GnRH(LHRH-A)GR1F（多巴胺）GnRH(LHRH-A)GR1F（多巴胺）GtH-十"性类固醇激素一排卵（脑垂体提取液.HCG）Domperidone+刺激作用-抑制作用排卵后，在雄鱼、鱼巢等因素的刺激下，可发生产卵行为。【实验材料、试剂和器材】金鱼、LHRH-A2、HCG、鱼用生理盐水、一次性注射器（1ml）、水族箱、加热棒2

LHRH-A(即促排卵素2号)。雌鱼的注射剂量为0.05pig/g,用鱼用生理盐水配成10pig/mL的溶液。Domperidone(DOM)o雌创注射剂量为1pLg/g,用角用生理盐水配成1mg/mL的溶液.人体绒毛膜促性腺激素(HCG)。雌鱼注射剂量为10IU/g,用鱼用生理盐水配成1000IU/mL的溶液。鲤鱼脑垂体提取液。雌鱼注射剂臺为鲤鱼脑垂体1个/尾；每个用0.2niL鱼用生理盐水磨成匀浆。以上四种药物在雄鱼的剂量减半。【实验方法、步骤】1、 选取大小相似的性成熟金鱼雌、雄各8尾，分成4组，并称重；2、 根据下表分组，分别注射各类激素和药物，注射剂量为5ul/g体重，注射方式是背鳍基部肌肉注射。注射后按雌雄鱼1：1的比例分别放入4个水族箱中，水温控制在22〜26°C，加些水草作为鱼巢。注射药物宅理盐水HCC脑垂体LHRH-A-A+DOM3、注射8h左右，注意观察鱼的发情和产卵行为::雌雄相互追逐，之后,雌鱼排卵、雄鱼排精。。次也可从泄殖孔处挖卵镜检屛观察卵母细胞在最后成熟和排卵过程的变化(如下图比.阶段1：核位于卵细胞正中阶段2：核移到卵细胞的一侧阶段阶段1：核位于卵细胞正中阶段2：核移到卵细胞的一侧阶段3：核贴近卵细胞的细胞膜阶段4：核融化消失图23-1卵母细胞在最后成熟和排卵过程的变化示意图4、记录4组鱼催产到产卵的效应时间、、产卵雌鱼的数量，并进行分(4)如条件许可，还可在注射8h和24h后从尾部血管抽取血样，测定各组色类血液的促性腺激素(GtH)含量。(测定方法见本书实验十七“鱼类促性腺激素的放射免疫测定”)析讨论，筛选出催产效果最好的催产剂。备注:也可选用不同鱼作为实验动物，采用不同剂量的

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