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第3节

胚胎工程第1课时:胚胎工程的理论基础第2章

我国奶牛的单产水平无法满足国民对牛奶的需求。拥有人气明星“黑白花”奶牛之称的美国荷斯坦奶牛泌乳量高居各乳用牛之冠,母牛一般产乳量高达7000kg(305天)。引进一头成年荷斯坦奶牛奶牛往往需要数万元;同时,牛的生育率很低,一生约生育四五次。你有什么方案可以实现荷斯坦奶牛的快速大量繁殖呢?核移植技术进行克隆可以通过体外受精、胚胎分割等技术获得多个良种奶牛胚胎,然后移植给代孕母牛生下后代。1.概念:

指对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理,然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。胚胎工程技术包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等。操作对象

目的2.常用技术:3.操作水平:主要集中在细胞水平上国家统计局数据显示,我国结婚登记女性的年龄占比中,35岁及以上非最佳育龄妇女的占比正逐年增加。晚婚晚育与不孕不育增加的趋势也高度重合。目前,我国育龄夫妇的不孕不育率已经攀升至约12%-18%。这些夫妇特别想要一个自已的孩子,有什么好的建议能让他们实现心愿么?试管婴儿1978年世界首例试管婴儿露易丝.布朗1988年中国首例试管婴儿郑萌珠中国首例试管婴儿思考1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤?①体外受精②胚胎的早期培养③胚胎移植思考2.试管婴儿培育和正常怀孕有何异同?相同:都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。不同:受精作用在体外,在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。精子与卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。1.概念:细胞膜的功能:进行细胞间信息交流细胞膜具有:一定的流动性2.场所:哺乳动物的输卵管内。3.过程准备阶段受精阶段准备阶段1:精子获能准备阶段2:卵子的准备场所:睾丸内的曲细精管时期:从初情期开始直到生殖机能衰退形成过程:精原细胞次级精母细胞初级精母细胞精细胞精子(4个)(整个过程连续进行,不间断)必修二减数分裂与受精作用知识回顾精子的形态:不同动物精子形似蝌蚪,但其大小略有不同与动物体型大小无关。(细胞核——遗传物质的储存场所)(线粒体——为精子运动提供能量)(是精子代谢和运动的器官)精子的结构注意:①精子获能实质是指精子获得受精的“能力”,而不是获得能量。②精子获能的场所:雌性动物的生殖道。方法:①利用雌性生殖道让精子受精。②将精子培养在人工配置的获能液中使其获能等。

常用有效成分:Ca2+载体、肝素等顶体(含有多种水解酶)精核细胞质中心体中段线粒体尾部含有“9+2型”微管准备阶段1—精子获能知识回顾2、卵子的发生场所:时期:形成过程:雌性动物的卵巢中胎儿性别分化到生殖机能衰退分裂过程不连续,有两次暂停。02卵细胞的形成是一个不连续的过程形成过程:排卵:卵子从卵泡中排出。卵泡:由卵母细胞和周围的卵泡细胞组成。卵子:一般指雌性动物的生殖细胞。第一极体卵母细胞膜卵丘细胞卵母细胞核透明带(1)卵子一般在排出

后才能被精子穿入(2)动物排出的卵子成熟度不同;有的可能是

,如马、犬等;有的可能是

,如猪、羊等。(3)卵子成熟的场所:排出的卵子都要在

内进一步成熟。(4)卵子具备与精子受精能力的时期:2~3h初级卵母细胞次级卵母细胞输卵管MⅡ(减数第二次分裂中期)准备阶段2—卵子的准备(2)获能的方法直接利用

使精子获能;将精子培养在

中使其获能;准备阶段1:

精子获能准备阶段2:卵子的准备(1)机理:

刚排出的精子

(“有”或“无”)受精能力,

必须在雌性动物生殖道内发生相应相应生理变化后,才能获得受精能力的现象。

卵子要在

内进一步成熟,达到减数第二次分裂中期(MⅡ中期)时,才具备与精子受精的能力。雌性动物生殖道人工配制的获能液生物种类不同成分有差异;常见有效成分有肝素、Ca2+载体等。无输卵管具备受精能力的卵子结构准备阶段自主阅读课本P57“受精阶段”文字部分,回答以下问题1.受精时,精子依次穿过了哪些结构?2.防止多精入卵的机制有哪些?这有什么意义?3.入卵后,精子和卵子发生了哪些变化?4.卵细胞受精的标志是什么?受精完成的标志是什么?受精阶段1.精子穿越卵细胞膜外的结构获能后的精子与卵子相遇时,首先它释放出多种酶,以溶解卵细胞膜外的一些结构,同时借助自身的运动接触卵细胞膜。2.精子接触卵细胞膜在精子触及卵细胞膜的瞬间,卵细胞膜外的透明带会迅速发生生理反应,阻止后来的精子进入透明带,发生透明带反应。阻止多精入卵的第一道屏障。受精阶段3.精子进入卵细胞膜(精子入卵)精子与卵细胞膜接触时,立即被微绒毛抱合,精子外膜与卵细胞膜融合,精子入卵。阻止多精入卵的第二道屏障。4.雌雄原核形成精子入卵后,尾部脱离,原有核膜破裂并形成一个新的核膜,最后形成一个比原来精子核还大的核,叫做雄原核。精子入卵后,被激活的卵子完成减数分裂II,排出第二极体后,形成雌原核。受精阶段5.雌雄原核融合形成受精卵雄、雌原核充分发育后,相向移动,彼此靠近,核膜消失。这个含有两个染色体组的合子就是受精卵。受精过程结束后,受精卵的发育也就开始了。

精子穿越卵细胞膜外的结构,如透明带精子释放多种酶溶解膜外结构

精子接触卵细胞膜透明带反应精子触及卵细胞的瞬间,透明带会迅速发生生理反应,阻止后来的精子进入透明带精子入卵

精子形成雄原核、卵子完成减数分裂Ⅱ,释放第二极体,形成雌原核卵细胞膜反应精子入卵后,卵细胞膜会立即发生生理反应,拒绝其他精子再进入卵内精子入卵后,尾部脱离,原有的核膜破裂并形成一个新的核膜,最后形成一个比原来精子的核还大的核——雄原核防止多精入卵的两个屏障总结雌、雄原核靠近核膜消失,形成受精卵。第一次卵裂即将开始雌雄原核充分发育后,相向移动,彼此靠近,核膜消失。这个含有两个染色体组的合子就是受精卵。受精过程结束后,受精卵的发育也就开始了。受精的标志:观察到两个极体或雌雄原核受精完成的标志:两个极体雌雄原核受精标志雌雄原核形成合子1)多数哺乳动物的第一极体不会进行减数分裂Ⅱ,因而不会形成两个第二极体。2)精子入卵后,卵子完成减数第二次分裂,释放出第二极体。卵子的发生小结:卵子发生在卵巢内完成,正常情况下,1个卵泡只能形成1个成熟的卵子胚胎性别分化后,胎儿时期卵原细胞增殖,演变为初级卵母细胞(形成卵泡)动物排卵前后完成减数第一次分裂,排卵是指卵子从卵泡中排出卵子的发生小结:刚排出的卵子尚未完全成熟,仅完成减数第一次分裂,需要在输卵管内进一步成熟(极体也进入)减数第二次分裂的中期,次级卵母与精子在输卵管内结合完成受精过程第二次分裂在精子和卵子结合的过程中完成判断卵子是否受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到2个极体发生时间场所子细胞数目变形形状精子卵子重要区别两次分裂连续,在睾丸曲细精管两次分裂不连续,在卵巢和输卵管初情期以后胎儿时期4个精子细胞1个卵细胞2个极体是否蝌蚪形圆形哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备是在出生前完成的;精子是从初情期开始的关于体内受精应注意的几个问题(1)精子获能是指精子获得受精“能力”,而不是获得能量;排卵是指卵子从卵泡中排出,而不是卵泡从卵巢中排出。(2)动物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是次级卵母细胞,如猪、羊等;有的可能是初级卵母细胞,如马、犬等。但它们都要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂的中期时,才具备与精子受精的能力。(3)受精的标志≠受精完成的标志:受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体;而受精完成的标志是雌、雄原核的融合。(4)受精卵遗传物质的来源:核遗传物质来自精子的细胞核与卵细胞的细胞核(即精卵各提供1/2),而细胞质的遗传物质几乎全部来自卵细胞。例.下列细胞,哪一个代表已经完成受精的卵子()C透明带和卵细胞膜之间的两个极体是不同的,分别是第一极体和第二极体人卵细胞受精到受精卵卵裂后植入的过程自主阅读课本P58,回答以下问题1.胚胎发育的场所在哪里?2.胚胎发育过程主要包括哪几个阶段?3.发育的每个阶段各有什么特征?卵裂期①细胞分裂方式是__________

②细胞数目_______

③胚胎总体积___________________④每个细胞的体积_________

⑤胚胎总有机物_________

⑥胚胎总DNA数________⑦每个细胞具有________________有丝分裂增加不增加或略有减小减小减小增加发育的全能性桑葚胚受精卵的早期分裂称为卵裂桑葚胚胚胎细胞数目在32个左右;胚胎形成致密的细胞团,形似桑葚;该阶段前的每一个细胞均未分化,属于

细胞。全能概念:当卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团,形似桑葚时,这时的胚胎称为桑葚胚。囊胚细胞开始出现分化,_____________将来发育成胎盘和胎膜;___________将来发育成胎儿的各种组织滋养层滋养层内细胞团内细胞团囊胚腔透明带细胞开始出现分化。囊胚进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫做孵化。原肠胚囊胚孵化后,内细胞团表层的细胞形成外胚层,下方的细胞形成内胚层,出现由内胚层包围的空腔叫做原肠腔。由原肠胚的三个胚层进一步发育为不同的组织、器官、系统外胚层内胚层原肠腔滋养层中胚层原肠胚三胚层的发育外胚层:表皮及其附属结构、神经系统、感觉器官中胚层:皮肤真皮、脊索、肌肉、骨骼、内脏器官外膜、循环系统、排泄系统、生殖系统内胚层:消化道、呼吸道上皮、肝胰等腺体扩展:受精后6星期,人形已隐约可见。这时,胚胎的心跳每分钟140—150下.是母亲心跳的两倍。

人类胚胎第8周时在子宫内的照片此时胎儿已长到20周,他移动手臂,把手指放在唇边,这可以促进它对吮吸的反映。拓展:了解胚后发育(幼体——成体)拓展了解——胚胎发育和个体发育全能细胞细胞分化幼体继续分化出生发育性成熟个体孵化卵裂期胚胎发育个体发育内细胞团滋养层细胞囊胚腔外胚层中胚层内胚层(原肠腔)胎后发育(1)胚胎发育的起点是受精卵的分裂,在输卵管内完成受精时即已开始。(2)卵裂期:细胞分裂使细胞数目增加,但胚胎的总体积并不增加,或略有缩小,因此每个细胞的体积会随着分裂的进行不断缩小,但细胞核内遗传物质并未减少。(全能细胞)(3)桑椹胚期:细胞未分化,全能细胞,是胚胎分割的最佳时期。

(4)囊胚期:出现囊胚腔,细胞开始分化,聚集在胚胎一端,个体较大的细胞称为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织;沿透明带内壁扩展排列的、个体较小的细胞,称为滋养层细胞,将来发育成胎膜和胎盘。细胞全能性仍很高,也可用于胚胎分割(5)原肠胚期:早期胚胎发育过程中分化程度最高的阶段。原肠胚时期的细胞进一步发育,内细胞团表层的细胞形成外胚层,发育成神经系统、感觉器官、表皮及其附属结构;下方的细胞形成内胚层,发育成肝、胰等腺体,以及呼吸道、消化道上皮;滋养层则发育为胎儿的胎膜和胎盘。(分化程度最高)动物种类受精卵发育/h进入子宫时发育天数和发育阶段2细胞4细胞8细胞16细胞桑棋胚天发育阶段小鼠24~3838~5050~6060~7068~803桑棋胚山羊24~3848~607272~9696~120410~16细胞绵羊36~38424867~72963~416细胞猪21~5151~6666~7290~110110~1142~2.54~6细胞马2430~3650~607298~1066囊胚牛27~4244~6546~9096~120120~1444~58~16细胞不同动物受精卵发育的比较

不同动物受精卵发育及其进入子宫的时间有明显的差异。请分析下表,讨论相关问题(注:马牛为排卵后时间,其他动物为交配后时间)P591.表中哪种动物的胚胎在进入子宫时发育程度最高?马的胚胎进入子宫时,发育程度最高,它处于囊胚阶段讨论2.将体外培养的小鼠胚胎移植到母鼠子宫时,应选择至少发育到什么阶段的胚胎?如果换成牛又该怎样处理?

小鼠应选择至少发育到桑葚胚阶段的胚胎进行移植。牛在自然情况下,胚胎虽然最早可在8~16细胞阶段进入子宫,但为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率,在实践中通常用发育到囊胚阶段的胚胎进行移植。P59不同动物受精卵发育的比较动物种类受精卵发育/h进入子宫时发育天数和发育阶段2细胞4细胞8细胞16细胞桑棋胚天发育阶段小鼠24~3838~5050~6060~7068~803桑棋胚山羊24~3848~607272~9696~120410~16细胞绵羊36~38424867~72963~416细胞猪21~5151~6666~7290~110110~1142~2.54~6细胞马2430~3650~607298~1066囊胚牛27~4244~6546~9096~120120~1444~58~16细胞

胚胎工程的许多技术都是在了解了哺乳动物在自然条件下受精和胚胎早期发育规律的基础上实现的。人们正是在认识了这些自然规律的基础上,在体外进行有效的模拟,才使卵母细胞能在体外成熟,精子能在体外完成获能,获能的精子和培养成熟的卵子能在试管内完成受精,获得的受精卵能在人工培养条件下继续发育等。讨论3.为什么说关于动物的体内受精和胚胎发育的研究,会为胚胎工程提供理论基础?请结合所学习的内容举例说明。P59不同动物受精卵发育的比较4.图2-3-6表示的是哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段,请据图回答问题:(1)写出各个阶段的名称:A:

,B:

,C:

囊胚原肠胚桑葚胚(2)写出图中各标号的名称:②

,④

,⑤

,⑧

(3)A时期的细胞具有

性,B时期开始出现

,C时期开始出现

(4)②将来发育成

囊胚腔外胚层全能内胚层内细胞团细胞分化胚层分化胎儿的各种组织受精胚胎早期发育胚胎工程的理论基础准备阶段1—精子获能准备阶段2—卵子的准备受精卵裂桑葚胚囊胚原肠胚精子穿越卵细胞膜外的结构精子接触卵细胞膜精子入卵雌、雄原核形成雌、雄原核靠近核膜消失,形成受精卵练习与应用(P59)1.判断下列有关哺乳动物受精的表述是否正确。(1)在自然条件下,受精在子宫中完成。(

)(2)精子需要获能才能与卵子结合,而卵子一经排出就具备受精能力。(

)(3)精子入卵后,卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵。(

)2.下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述,错误的是(

)A.在桑葚胚阶段,胚胎的内部开始出现含有液体的腔B.胚胎干细胞是一类未分化的细胞,可以从早期胚胎中分离获得C.桑葚胚的细胞一般都具有全能性,囊胚的细胞逐渐分化D.受精卵早期分裂时,胚胎中细胞数目不断增加,但胚胎的总体积并不增加××√A一、概念检测1.精母细胞在变成精子的过程中,很多结构会消失,而细胞核与线粒体都保留了下来,请尝试用你所了解的哺乳动物受精的相关知识来解释这一现象。2.精子在雌性动物的生殖道内是如何获能的?除了教材中介绍的,防止多精入卵的机制还有哪些?感兴趣的话,请通过查阅相关资料或请教专家来进行了解。关于受精作用,你还能提出其他问题吗?提示:细胞核和线粒体都是精子的重要结构。其中,细胞核是遗传物质储存的场所,决定后代的遗传特性,它参与受精过程。线粒体是精子进行有氧呼吸的主要场所,为精子的生存和运动提供能量。提示:出题的目的不是让学生准确地答出精子获能的机制和防止多精入卵的具体机制,而是鼓励有兴趣的学生去查阅资料或请教专家,并引导他们去查阅相对专业的书籍,这是学习的深入过程。这里涉及的问题,在普通生物学或者一般的细胞工程专著中可能找不到答案,需要查阅生殖生物学相关书籍。通过查阅专业资料,学生能了解到,精子获能的机制很神奇,防止多精入卵的机制同样神奇而且非常复杂,这都是机体在长期进化的过程中形成的、用来保障本物种延续的机制。二、拓展应用练习与应用(P59)第2课时:胚胎工程技术及其应用1.概念:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术。2.过程:试管动物技术精子卵子受精卵早期胚胎胚胎移植“代孕”母体幼体体外受精早期胚胎培养1.卵母细胞的收集和培养1.如何采集实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等的卵子?用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后从输卵管中冲取卵子,又叫(冲卵)。2.如何采集大家畜或大型动物的卵子?从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。活体采卵:超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜直接从卵巢直接吸取卵母细胞。3.采集的卵子是否马上可以受精?不可以,体外培养至MII中期。思考·讨论采集方法适用范围采集过程采集后的操作举例输卵管冲取法实验动物利用促性腺激素促使雌性动物排出更多的卵子,从输卵管冲取卵子可直接与获能的精子在体外受精小鼠、兔、猪、羊等已屠宰动物卵巢内采集大型动物或大家畜从已屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞采集后的卵母细胞都要在体外经过人工培养成熟后,才能与获能的精子受精牛活体采卵借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等仪器,直接从活体动物卵巢中采集卵母细胞卵母细胞采集和培养方法比较(2)体外精子获能的方法:培养法:化学诱导法:如:啮齿动物、家兔和猪等如:牛、羊等放入人工配制的获能液中放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中获能方法概念适用动物培养法将精子放入人工配制的______中培养,使其获能啮齿动物、家兔、猪等化学法将精子放在一定浓度的____或钙离子载体A23187溶液中,用_________诱导精子获能牛、羊等家畜获能液肝素化学药物精子体外获能的方法在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。3.受精注意:获能前,精子离心处理的目的是,去除精清中的抑制获能物质。精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分:有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等胚胎的早期培养早期胚胎培养的培养液成分巧记为:①“两盐”:无机盐和有机盐;②“两素”:维生素和激素;③“两酸”:氨基酸和核苷酸;④水和血清。培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存不同动物胚胎移植时间不同牛、羊:小鼠、家兔:试管婴儿:桑椹胚或囊胚阶段可在更早的阶段移植8~16个细胞阶段注:胚胎发育的主要场所是母体保存剩余的卵子和精子的方法是什么?二氧化碳培养箱作用:1.起保温作用,使温度控制在合适范围内。2.作为缓冲液,维持PH值。3.促进细胞分裂,促进呼吸作用。资料1荷斯坦奶牛产奶量很高,但成年荷斯坦奶牛售价十分高昂。资料2牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了。你能结合所学知识,提出繁育良种奶牛的思路吗?胚胎移植:将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。胚胎的来源:动物体细胞核移植体外受精转基因胚胎移植同种动物发情排卵后,在一段时间内供体、受体具有相同的生理环境;早期胚胎一定时间内处于游离状态;同种动物之间基本上不发生免疫排斥反应;胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特性不受受体的影响。胚胎移植的生理学基础生理学基础意义胚胎移植的生理学基础同种动物的供体和受体排卵后,生殖器官的

是相同的生理变化为供体的胚胎移入受体提供相同的

。生理环境早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于

状态。为胚胎的收集提供了可能游离受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生

。免疫排斥反应供体胚胎可与受体子宫建立正常的

联系,但其

不受影响。生理组织遗传特性为胚胎在受体内的存活提供了可能为移植后的胚胎继续发育提供了营养等方面的保障胚胎移植1.胚胎移植的基本程序①对供体、受体进行选择供体:遗传性能和生产性能优秀的个体。受体:健康和正常繁殖能力的个体。处理:同期发情具体做法:注射相关激素(孕激素)供体:

提供胚胎的个体。受体:

接受胚胎的个体。应对供体和受体母畜进行同期发情处理,使它们的生理条件达到同步或一致,这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件,这是胚胎移植成功与否的关键。因此,必须做到供、受体母畜的发情时间一致。②超数排卵具体做法:注射促性腺激素③配种或人工授精精子来源:同种优良的雄性动物。

在配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)冲洗瓶收集瓶④胚胎的收集冲卵是把母牛的卵子冲出来吗?

不是,冲卵是将供体母畜体内的胚胎冲出来。你知道检查的目的吗?此时胚胎处于什么时期?

检查胚胎的发育状况,处于桑椹胚或囊胚时期⑤对胚胎进行质量检查将胚胎和冷冻液装入冷冻管中,经过慢速(第2-3天的胚胎)和快速(第5-6天的囊胚)两种降温方式使胚胎能静止下来并可在-196度的液氮中保存的一种方法。目前应用比较广泛的是程序冷冻法和玻璃化冷冻法.⑥胚胎的保存或移植⑦胚胎的移植方法一:手术法引出受体子宫和卵巢,将胚胎注入子宫角,缝合创口。方法二:非手术法将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位,注入胚胎。非手术法移胚手术法移胚对受体母牛进行是否妊娠的检查受体母牛产下胚胎移植的犊牛供体后代还是受体后代?⑧对受体母牛进行是否妊娠的检查选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数排卵供体公牛配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩(胚胎移植的犊牛)胚胎移植基本过程雌激素促性腺激素桑椹胚或囊胚胚胎移植中的四个关键点胚胎移植的现状及意义1)现状:

我国部分地区已进入生产应用阶段2)意义:A、充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力B、加速育种工作和品种改良C、大量节省购买种畜的费用D、人为生产双胎或多胎E、保存品种资源和濒危物种胚胎移植的实质胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转换,而胚胎本身的遗传物质并不发生改变,因此各种性状均能保持其原来的优良特性。

试管动物胚胎移植动物受精获取生殖细胞试管动物与胚胎移植不同点:体外受精体内自然受精从供体获得卵子和精子获得受精卵或胚胎体外受精与人工受精异同二者都是有性生殖,人工受精和体外受精都需要人参与,但参与具体任务不同。①体外受精中,人的作用主要是采集精子和卵子,受精场所在体外,即“试管动物”②人工受精中,人的作用主要是将雄畜精子导入雌畜生殖道内,受精场所在体内。人工受精能更有效发挥公畜优良特性,体外受精能更有效发挥母畜繁殖潜能。拓展:比较试管动物和克隆动物胚胎分割理论基础:动物胚胎干细胞的全能性。概念:采用显微手术(机械方法)的方法将早期胚胎分割成2等分胚,4等分胚或8等分胚,经体内或体外培养后植入受体,以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。实质:胚胎分割的动物后代具有_________________,其实质是_______________________。动物的无性生殖即克隆相同的遗传物质分割对象:发育良好,形态正常的______________。操作:用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的空_________中,或直接将裸半胚移植给受体。主要仪器:实体显微镜和显微操作仪。桑椹胚或囊胚透明带操作注意事项:①对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将内细胞团均等分割。原因:内细胞团一般到囊胚阶段才出现,它是发育为胚胎本身的基础细胞,其他细胞为滋养细胞,只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割,会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强,少的部分发育受阻或发育不良,甚至不能发育等问题。②胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小,只有在显微镜下才能看到;再者,细胞数目是有限的。分割的份数越多,不但难以做到均等分割,每一份的细胞数会越少,而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此,分割的份数越多,技术的难度会越大,移植后的恢复和发育的难度会越大,移植成功率自然会降低。胚胎分

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