G蛋白与信号转导课件

第四章G蛋白与信号转导

【目的要求】1．掌握G蛋白、小G蛋白的概念；G蛋白基本结构。2．熟悉G蛋白的种类；G蛋白通过AC和PLC的信号转导机制。3．了解G蛋白的发现和意义；G蛋白通过某些受体门控离子通道和cGMP-PDE的信号转导机制；小G蛋白的特点。

G蛋白：是鸟苷酸结合蛋白（guanosinenucleotide-bindingprotein）的简称，是指能与GTP或GDP结合，与膜受体偶联而具有信号转导作用的蛋白质。

吉尔曼（AlfredG.Gilman）1941.7.1~

德克萨斯大学西南医学中心药学系

发现G蛋白的意义：它揭示了细胞外信号如何转换为细胞内信号的真正机制，从而开辟了细胞信号跨膜转导研究的新时代。

G蛋白：与细胞膜受体偶联的G蛋白由3个不同的亚基组成，又称为异三聚体G蛋白。

小G蛋白：分散在细胞内有类似G蛋白作用的单体蛋白，因分子量小而得名。如ras表达产物。

G蛋白由三个亚基组成：G：39~46kD，20多种，有GTP或GDP结合位点、GTP酶活性、ADP核糖基化位点、毒素修饰位点及受体和效应器结合位点等。G：36kD，6种。G：7~8kD，10多种。

G蛋白有两种构象形式：活化型：G与GTP结合，与G分离。非活化型：G与GDP结合，与G结合成三聚体。

活化型非活化型

Gs型与Gi型G蛋白的作用

3.Gt型G蛋白分布在视网膜的感光细胞，与视紫红质结合，激活cGMP-PDE，传递光反应冲动。

5.G蛋白的βγ亚基活化的βγ亚基复合物也可直接激活胞内靶分子，具有传递信号的功能。如心肌细胞中G蛋白偶联受体在乙酰胆碱刺激下，活化的βγ亚基复合物能开启质膜上的K+通道，改变心肌细胞的膜电位。二、G蛋白信号转导机制（一）G蛋白通过AC的信号转导机制1.信号分子结合改变受体构象；2.受体与G蛋白结合并使其激活；3.GTP取代GDP，G游离；4.G结合并激活AC，产生cAMP；5.GTP水解，G与再结合。

Gs型G蛋白的亚基通过与受体和AC的结合和解离达到信号跨膜传递的介导和终止，GDP与GTP的互变起触媒作用。实验一、用非水解GTP类似物GMP-P(NH2)P代替GTP。

实验二、霍乱毒素（choleratoxin）实验霍乱毒素能催化ADP核糖基共价结合到Gs的亚基上，致使亚基丧失GTP酶的活性，使亚基处于持续活化状态，腺苷酸环化酶永久性活化。导致霍乱病患者细胞内Na+和水持续外流，产生严重腹泻而脱水。

GsNAD+ADP-ribosylation

Nicotinamide22-kDsubunitofcholeratoxin腺苷腺苷

（二）G蛋白通过某些受体门控离子通道的信号转导机制

G蛋白神经递质受体ACcAMPPKA离子通道

receptorGproteinSubunitbreaksaway,bindswithionchannelandopensitReceptoractivatesGproteinMoleculeoftransmittersubstancebindswithreceptorIonsentercell,producepostsynapticpotential

（三）G蛋白通过PLC的信号转导机制G蛋白激活PLC，PLC催化膜磷脂PIP2产生IP3和DAG两种第二信使，再分别调节细胞中Ca2＋的浓度和PKC的活性。

钙通道

（四）G蛋白通过cGMP-PDE的信号转导机制发生在视网膜上。

Gt光刺激视紫红质PDEcGMP5-GMP

通过激活GTP酶活性中止G蛋白信号的机制：1.磷脂酶G蛋白磷脂酶C磷脂酶A2第二信使GTP酶

2.G蛋白信号调节因子（regulatorofG-proteinsignaling，RGS）RGS能在Mg2＋的存在下，激活G蛋白的GTP酶，因此又叫GTP酶激活蛋白（GTPaseactivatingprotein，GAP）。

（五）小G蛋白小G蛋白是一个家族的总称，其成员有60多种，与信号转导有关的典型代表有Ras、Rho等。特点：1.分子量小：20~30kD2.结构相对简单：一条肽链。

3.受体调节的范围有限：主要受控于酪氨酸蛋白激酶受体的调节。4.信号转导时还需要其他蛋白辅助：接头蛋白（adaptor）将酪氨酸蛋白激酶受体连于鸟苷酸释放因子（guanine-nucleotidereleasingfactor，GRF）上，然后GRF再作用于小G蛋白。

GRF：包括正调控因子GDS（GDPdissociationstimulator）和负调控因子GDI（GDPdissociationinhibitor）。还需GTP酶激活蛋白（GTPaseactivatingprotein，GAP）提高GTP酶活性，并将小G蛋白转导过来的信号往下游传递。

Ras

三、G蛋白与临床疾病（一）G蛋白与心脏疾病G蛋白的信号转导在心脏心肌收缩力、心率、心律和心肌细胞生长的调节方面起着重要作用。

1.心脏G蛋白亚单位的种类及功能Gs型G蛋白：心脏中主要表达42kD和52kD两种亚型。它们主要通过AC-cAMP-PKA通路介导肾上腺素能受体的信号转导途径。生理情况下，起到增加心肌收缩力和频率的作用。

Gi型G蛋白：Gi1、Gi2、Gi3心脏中主要表达Gi2。它与2肾上腺素能受体偶联，抑制AC的活性。它还介导M2-胆碱能受体激动剂的钾离子通道激活作用，还能与钙通道蛋白直接偶联，调节心率。

Gq型G蛋白：心脏中表达两种亚型。均激活磷脂酶C-，介导血管紧张素Ⅱ、1肾上腺素能受体的信号传递。

G12型G蛋白：G12主要调节细胞生长和激活Na＋-H＋交换体系。G蛋白和亚单位在心肌细胞中也一定程度地影响AC、PLC-、PLA2、-肾上腺素能受体激酶（-adrenergicreceptorkinase，-ARK）、K＋通道以及Ras-MAPK信使通路。

2.心脏疾病中G蛋白的改变（1）心肌肥大：Gi的含量和功能明显增加，是造成肥大心肌脱敏的主要原因。应用血管转化酶抑制剂可以降低Gi的含量，缓解脱敏反应。

（2）心力衰竭：Gs的生物活性降低。

Gi亚基的含量增加。

（3）心肌缺血与心律失常：急性心肌缺血初期，交感神经应激性兴奋，血中儿茶酚胺浓度急剧上升，AC活性短暂增加。急性缺血后，Gs和Gi的含量均降低，活性下降。

（二）G蛋白与疼痛G蛋白偶联受体的部分成员与痛觉递质结合，形成痛觉的信号转导过程。脊髓的G蛋白受体如代谢型谷氨酸和神经肽受体在伤害性信号转导过程中发挥重要的作用。如给予抑制剂则能降低痛的感觉程度。

阿片类药物的大多数受体与G蛋白偶联产生信号转导。因此它们的镇痛与成瘾都与G蛋白有关。

（三）G蛋白与创伤应激状态下的免疫抑制在创伤、手术等应激状态时，大量应激激素如ACTH、皮质酮、儿茶酚胺及内啡肽等被释放，它们均通过其受体与G蛋白偶联，导致免疫功能抑制。

G蛋白导致免疫功能抑制的机制：淋巴细胞的发育、分化与G蛋白的表达关系密切，巨噬