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文档简介

微量铁的测定

可见分光光度法1OBJECTIVE掌握分光光度法的基本原理2学会光度法测定物质的含量3学习可见分光光度计的使用方法2PRINCIPLE有色物质对光的吸收具有选择性，溶液的不同颜色是由于溶液中有色物质选择地吸收各种颜色的光引起的。有色溶液的颜色实质上是它所选择吸收的光的互补色：当一束白光通过铁黄色络离子溶液时，兰色光大部分被吸收，其它色光透过.3Beer-Lamber：物质对单色光吸收的强弱与吸光物质浓度和厚度关系的定律Beer：吸光与浓度的关系Lamber：吸光与厚度间的关系II0透光率(transmitance,T)A=-lgT吸光度(absorbance)E吸光系数(absorptivity)5吸收光谱(吸收曲线)6标准曲线A=ELCA=K’C71显色反应及其条件因素：试剂与溶剂、酸碱度、时间、温度及其它故操作时，必须在平行原则的条件下进行2测定方法：标准曲线法(空白溶液作对照)：消除溶剂或其它物质对入射光吸收等因素

溶剂空白：显色剂及制备试液的其它试剂均无色；可用溶剂作空白溶液

试剂空白：显色剂有色；按显色反应相同条件下加入各种试剂和溶剂(不加试样溶液)

试样空白：试样基体有色，显色剂无色；不加显色剂但按显色反应相同条件进行操作9显色剂：磺基水杨酸

pH1.8~2.5淡紫色

4.0~8.0橙红色8.0~11.5黄色

12沉淀吸收波长：380~480nm范围内，选择最大吸收波长λmax(425nm)实验条件：10112标准曲线的制作波长425nm下，以空白溶液为参比溶液，分别由稀至浓测定一系列标准溶液的吸光度．以Fe3+含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线．编号空白123456Fe3+含量(mg/ml)吸光度(A)波长425nm133试样注入比色皿，插入试样槽调节波长盖上试样盖，将空白试样移入光路MODEA明亮COARSESET-REF钮，使A值在0.000~－0.176内任一数值SET-REF使A值为0.000(即置空白试样为0.000)推或拉SAMPLE依次测试标准系列溶液1POWER键，接通电源，预热15min2开启试样室盖，调ZEROT钮,使T0.000可见分光光度计操作：140ACC样品A样品相同条件下，测定未知溶液的吸光度，然后从标准曲线上查出Fe3+的含量.3未知铁盐溶液中F

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