实验三精液品质常规评定精子密度的计算

实验三精液品质常规评定精子密度的计算第1页，共31页，2023年，2月20日，星期四直观检查项目射精量色泽气味云雾状PH值美兰退色试验微观检查项目精子活力估测精子活力计数密度测定:计数板计数、比色计测定畸形率：形态畸形率、顶体畸形率第2页，共31页，2023年，2月20日，星期四(1)射精量的测定方法概念:射精量是指每次射精的体积测定:以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表测定方法:可用体积测量容器如刻度试管或量筒,也可用电子秤称重近似代表体积1射精量第3页，共31页，2023年，2月20日，星期四(2)公畜的正常射精量畜种奶牛水牛马猪绵羊山羊射精量ml5-103-630-100200-3000.8-1.20.5-1.5影响射精量的因素:种类、睾丸大小质地、季节、健康状况第4页，共31页，2023年，2月20日，星期四（3）射精量不正常的原因现象原因过少采精过频、性机能衰退、睾丸炎、发育不良过多副性腺发炎、假阴道漏水、尿潴留、采精操作不熟练第5页，共31页，2023年，2月20日，星期四2.色泽指精液的颜色及其浓厚程度，它某种程度反应精液是否正常，精子的浓度高低。正常的精液：猪：浅灰白至白色牛羊：乳白色或乳黄色第6页，共31页，2023年，2月20日，星期四不正常精液原因分析正常精液特征依从浓到稀：乳黄-乳白-白色-灰白淡红（鲜红）生殖道下段出血或龟头出血淡红（暗红）副性腺或生殖道出血绿副性腺或尿生殖道化脓褐混有尿液第7页，共31页，2023年，2月20日，星期四4.云雾状是指新鲜精液在33-35℃温度下，精子成群运动所产生的上下翻卷的现象。云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。云雾状分级标准+++翻明显而且较快++翻明显但较慢+仔细看才能看到精液的移动-无精液移动3.气味正常的精液：应没有很浓的气味，或略带动物特有的腥膻味腥味：有脓液臊味：有尿液或包皮液第8页，共31页，2023年，2月20日，星期四1.活力的估测(1)概念:37℃下,精液中前进运动精子占总精子数的百分率(2)主要测定方法:估测法（二）微观项目检查第9页，共31页，2023年，2月20日，星期四第10页，共31页，2023年，2月20日，星期四(1)密度的概念及表示方法单位体积精液中所含的精子数表示方法:个/ml或亿/ml2.精子的密度检查第11页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子密度检查（估测法）取一小滴精液滴在清洁载玻片上，用另一载玻片轻推，使精液成一薄层，400×镜下观察密：视野中精子密度很大，彼此间隙很小，看不清楚各精子运动状况（约≥10亿/ml)中：精子间空隙明显，彼此间约有一个精子长度的空隙（约2亿～10亿/ml)稀：精子间空隙超过1个精子长度（约≤2亿/ml）第12页，共31页，2023年，2月20日，星期四第13页，共31页，2023年，2月20日，星期四(2)各种家畜精液的精子密度畜种牛羊猪马鸡密度亿/ml8-1220-302-31.5-330-50第14页，共31页，2023年，2月20日，星期四(4)精子密度的测定方法精子密度计数板(器)简介精液的稀释精液注入计数室精子计数精子密度计算第15页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子密度计数板(器)简介精子计数室长宽各1mm,面积1mm2高度0.1mm,体积0.1mm3由双线或三线组成25个(5X5)中方格每个中方格内有16个小方格(4X4)共计400个小方格第16页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子密度计数板(器)简介精子计数室长宽各1mm,面积1mm2高度0.1mm,体积0.1mm3由双线或三线组成25个(5X5)中方格每个中方格内有16个小方格(4X4)共计400个小方格第17页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子计数室及一个中方格返回第18页，共31页，2023年，2月20日，星期四密度测定之精液稀释将精液注入计数室前必须对精液进行稀释,以便于计数稀释的比例根据动物精液的密度范围确定稀释方法:用5-25ul移液器和100-1000移液器,在小试管中进行组合不同的稀释.如牛精液稀释100倍,为5ul原精+500ul稀释液稀释液:3%氯化钠溶液,用以杀死精子,便于计数第19页，共31页，2023年，2月20日，星期四注入计数室前

各种家畜精液建议稀释比例畜种牛羊猪马鸡稀释倍数10020040404003%氯化钠ul原精液ul5005100051000-2525200-5520005返回第20页，共31页，2023年，2月20日，星期四精液注入计数室将洁净的计数板放在载物台上固定好,盖上干净的盖玻片取25ul稀释后的精液,将吸咀放于盖玻片与计数板的接缝处缓慢注入精液,使精液依靠毛细作用吸入计数室第21页，共31页，2023年，2月20日，星期四注意：让稀释后的精液通过毛细作用自行吸入！用吸管稀释后精液注入计数室共有两个对称的计数室第22页，共31页，2023年，2月20日，星期四用移液器注入精液第23页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子计数将计数板固定在显微镜的推进器内，用100倍放大找到计数室，再用400倍找到计数室的第一个中方格。计数左上角至右下角五个中方格的总精子数，以精子的头部为准，依数上不数下，数左不数右的原则进行计数格线上的精子。第24页，共31页，2023年，2月20日，星期四进行精子计数的中方格数可以是四角一中心共5个中方格也可以是从左角到右下角五个中方格第25页，共31页，2023年，2月20日，星期四以图示次序计数，精子的头部为准，依数上不数下，数左不数右的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数第26页，共31页，2023年，2月20日，星期四计算精子密度精子密度=5个中方格总精子数×5×10×1000×稀释倍数第27页，共31页，2023年，2月20日，星期四例：牛精子密度测定程序放计数板于载物台上取样稀释精液精液注入计数室镜检精子计数密度计算计数板和盖玻片一定要清洁取500ul3%氯化钠于小试管中,加入5ul原精液,混合均匀取25ul小心地从计数板与盖玻片的接缝中加入,使其自行吸入计数室中用100倍和400倍观察计数五个中方格的总精子数,计数以头部为准,在格线上的数上不数下,数左不数右精子密度=5个中方格总精子数5×10×1000×100结束第28页，共31页，2023年，2月20日，星期四精子畸形率检查精子畸形率：是指畸形精子占视野中总精子数的百分率。精子畸形分为四类：头部畸形：头部巨大、瘦小、细长、缺损、双头、皱缩等。颈部畸形：颈部膨胀大、纤细、曲折、双颈等。中段畸形：膨大、纤细、带有原生质滴等。主段畸形