临床基因扩增检测实验室加样器使用维护和校准标准操作程序

临床基因扩增检测实验室加样器使用维护和校准标准操作程序1 目的保证移液器加样的准确性。2 适用范围各种品牌、型号的固定、可调和多通道移液器。3 操作人XXX4 操作方法4.1设定容量值根据所需取液量选择相应的加样器；可调式加样器应在允许容量范围内调节。连续可调式加样器容量计读数由三位拨号数字组成（显示所转移液体容量），从上（最大有效数字）到下（最小有效数字）读取；利用底部刻度可将容量刻度调节到更精确的分度。P型(Pipetman)加样器是连续可调的、计量和移液的专用仪器，量度准确、操作安全。共有八个型号，P右下角数字为加样器最大容量值，代表加样器的型号已标明在按钮上。容量范围自0.1ul至10ml（各型号容量范围见括号内）。P2(0.1—2ul)P10(1—10ul)P20(2—20ul)P100(20—100ul)P200(30—200ul)1010127272555551.25ul7.5ul12.5ul75ul125ul注：其它型号P1000(200—1000ul)、P5000(1000—5000ul)、P10ML(1000—10000ul)表1：P型加样器的应用范围P2，P10超微量计量及移液，应用于DNA定序及酶分析等。P20，P100，P200和P1000应用于一般水溶液、酸、碱的计量和移液。P5000，P10ML大体积计量和移液。4.2吸液4.2.1首先选择一支合适的吸嘴安放在加样器套筒上。使用大体积加样器（如5000ul以上）时必须在套筒上加插一过滤芯，稍加扭转地压紧吸头使之与套筒间无空气间隙。未装吸头的加样器绝不可用来吸取任何液体。4.2.2吸液把按钮压至第一停点；垂直握持加样器，使吸嘴浸入液样中，浸入液体深度视型号而定：P2和P10P20和P100P200和P1000P5000P10ML≤1mm2--3mm2--4mm3--6mm5--7mm缓慢、平稳地松开按钮，吸液样。等一秒钟，然后将吸嘴提离液面。用药用吸纸抹去吸嘴外面可能附着的液滴。小心勿触及吸嘴口。4.2.3放液将吸嘴贴到容器内壁并保持100—400倾斜。平稳地把按钮压到第一停点。等一秒钟后把按钮压到第二停点以排出剩余液体。压住按钮，同时提起加样器，使吸嘴贴容器壁擦过。松开按钮。按吸嘴弹射器除去吸嘴。（只有改用不同液体时才需更换吸嘴。）4.3预洗当装上一个新吸嘴（或改变吸取的容量值）时应预洗吸嘴，先吸入一次液样并将之排回原容器中。预洗新吸嘴能有效提高移液的精确度和重现性。这是因为第一次吸取的液体会在吸嘴内壁形成液膜，导致计量误差。而同一吸嘴在连续操作时液膜相对保持不变，故第二次吸液时误差即可消除。4.4致密及粘稠液体对于密度低于水的液体，可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。例如：用P20加样器转移10ul血清。先将读数调到10ul，吸取后以重量法测定。如实测体积为9.5ul，即偏差0.5ul，则将读数调到10.5ul并重复一次。如第二次仍不够准确，根据偏差再作调整。排放致密或粘稠液体时，宜在第一停点多等一两秒钟再压到第二停点。4.5加样器吸头生产过程纯净，符合当今无染料的要求（避免污染）。经改进的外形（密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细）使按装或卸脱更加容易、管壁有弹性、不会产生漩涡，从而精度更高。嘴口决无毛刺。吸嘴表面光洁平滑，沾湿性小，避免液体留外壁引起的误差。每个嘴口上都有模具编号，确保品质跟踪系统。有液体容量刻度线。D200吸嘴在20和100ul处、D1000吸嘴在300ul处、D10吸嘴在2ul处标出。可在121℃及1巴压力下消毒20分钟。应选用带滤芯的吸头,以避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员的污染。4.6注意事项PCR实验室应备有4套连续可调式加样器(0.2—2ul、20—200ul、200—1000ul)，分别用于试剂准备、样品处理、扩增及产物检测四个实验区/室，加样器在使用时应注意以下几点：在取液前所取液体应在室温（15—25℃）平衡；若吸液温度与室温有异时将吸头预洗多次再用。注意移液温度不得超过70℃。吸头浸入液体深度要合适，吸液过程尽量保持不变。在吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到加样器头上；打出液体后不应松开按钮，将吸头压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。连续可调式加样器在取样加样过程中应注意吸嘴不能触及其它物品，以免XX医院临床基因扩增检测实验室加样器使用、维护和校准标准操作程序编号：I002第一版第4页 共5页被污染；吸嘴盒（架子）、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染为原则。改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸嘴；发现吸嘴内有残液时要换新吸嘴。新吸嘴使用前要预洗。（8）吸嘴内有液体时不可将加样器平放、倒转，以防液体进入加样器套筒内。（9）使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后，最好拆下套筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈；切勿用油脂等润滑活塞及密封圈。（10）连续可调式加样器在使用完毕后应置于加样器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。（11）应定期请专业人员进行校准、调试、不要自行拆开。故障排除发现漏气或计量不准，其可能原因和解决方法为：套筒螺帽松动？用手拧紧螺帽。套筒刮花或破裂？卸下弹射器，检查套筒。P2、P10或P20移液器套筒破损时，活塞也可能变形。安装套筒时应用手拧紧螺帽。活塞或密封受化学腐蚀？更换活塞及密封圈。用蒸馏水洗涤套筒内壁。发现套筒内有液体，可依下法清洁：卸下弹射器，拧下螺帽并用蒸馏水洗涤套筒、活塞、密封圈及O形环，待完全干燥后重新组装。（3）发现P5000和P10ML滤芯变湿必须更换。#需要时，可将套筒、螺帽和弹射器在121℃及1巴压力下消毒20分钟。注意密封圈及O形环不能高温消毒。发现吸液时有气泡：先将液体排回原容器、检查吸嘴浸入液体是否合适、再更慢地吸入液体；如仍有气泡应更换吸嘴。凡是更换