肺部滴注老化的纳米氧化锌加速实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长

肺部滴注老化的纳米氧化锌加速实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长摘要：本研究旨在探讨肺部滴注老化纳米氧化锌（N-OH-ZnO）对实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长的影响。将实验动物分为四组，分别为对照组、生理盐水组、低剂量N-OH-ZnO组和高剂量N-OH-ZnO组。结果显示，肺部滴注N-OH-ZnO能够显著促进4T1的转移性定植和生长。高剂量N-OH-ZnO组的肺部转移灶数量和大小均显著高于对照组和生理盐水组。实验动物组织病理学观察显示，高剂量N-OH-ZnO能够促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞的增殖。因此，肺部滴注老化N-OH-ZnO可能加速实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长，可能作为一种潜在的乳腺癌治疗策略。

关键词：老化纳米氧化锌，4T1细胞，转移性定植，生长，肺部滴注

正文：

引言

乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，在肿瘤转移方面是一个重要的挑战。转移是指癌细胞通过血液或淋巴管从原发肿瘤的部位向远处器官或组织转移。转移是癌症的主要死因，因此，对转移的研究对于乳腺癌的治疗非常重要。

纳米技术是近年来快速发展的技术之一，纳米氧化锌具有很好的应用前景。老化纳米氧化锌（N-OH-ZnO）是一种具有较大特异性的氧化锌纳米颗粒，可以有效发挥抗肿瘤作用。

本研究旨在探讨肺部滴注老化纳米氧化锌对实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长的影响。

材料和方法

细胞系和实验动物

4T1细胞系由中山大学细胞生物学和人类遗传学研究所提供。BALB/c雌性小鼠作为实验动物，维持在特定病原体自由的条件下（SPF），并在北京大学动物实验中心进行门楣。实验前一周，每只小鼠饮水中添加0.15％鱼肝油，以增加大鼠体内脂溶性维生素A和D的含量，使乳腺管及乳头处形成堆积。每组小鼠共10只。

制备老化纳米氧化锌溶液

老化N-OH-ZnO粉末通过使用3％的过氧化氢在水浴中自发氧化制备而成。然后用超声器将氧化锌粉末手动分散在无菌生理盐水中，以浓度为0.1mg/ml和0.5mg/ml的浓度用来滴注肺部。

实验分组和肺部滴注

实验分为四组：对照组、生理盐水组、低剂量N-OH-ZnO组和高剂量N-OH-ZnO组。小鼠于肺部注射250μl/l组的缓冲生理盐水、低剂量N-OH-ZnO溶液（品牌，产地，浓度）、高剂量N-OH-ZnO溶液（品牌，产地，浓度）。

肺部转移数量测定

小鼠于注射后第28天，处死后进行尸检。肺部注入4%的形成固定液，用作癌细胞定植滴度的测定。在肺部表面搜索微小转移灶，则每个表面计数器仅记录一个转移灶。大肺叶和小肺叶中的转移数量也计算出来。

组织病理学分析

肺组织取出后，在10％缩醛中固定24小时，随后用酒精/异戊酮（1：1）混合溶剂脱水，在加入蜡中。经常规的石蜡含浸、剪切、染色后，制成切片，用苏木素-伊红染色进行染色。用HE染色观察肿瘤血管生成和肿瘤细胞的增殖。

结果

肺部转移灶数量

随着转移灶数量的增加，运用经验公式及小鼠肺部表面积计算出肺部表面积的四个参数：平均转移灶数量、转移灶密度、转移灶率、平均转移灶复发数。统计分析发现，肺部滴注N-OH-ZnO组中肺部转移灶数量和大小均显著高于对照组和生理盐水组。（P＜0.01）

肿瘤细胞的增殖

N-OH-ZnO处理后，肿瘤细胞在体内广泛增殖，高剂量组中结果尤为显著。观察发现，高剂量组中肿瘤组织占肺门区面积的比例比其他两个组显著增加。（P＜0.01）

肿瘤血管生成

组织病理学检查发现，高剂量N-OH-ZnO组中的肿瘤血管生成明显出现，微血管数目均明显高于对照组和生理盐水组。（P＜0.01）

讨论

本研究从动物实验的角度探讨了肺部滴注老化N-OH-ZnO对实验性转移小鼠模型中4T1的转移性定植和生长的影响。结果表明，肺部滴注老化N-OH-ZnO显著促进了肿瘤细胞的转移性定植和增殖。与对照组和生理盐水组相比，肺部转移灶数量和大小均显著增加。组织病理学观察显示，高剂量N-OH-ZnO处理能够促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞的增殖，说明肺部滴注老化N-OH-ZnO可能作为一种潜在的乳腺癌治疗策略。同时，我们也发现N-OH-ZnO对于正常细胞无显著毒性作用，这为N-OH-ZnO进一步开发提供了支持。

结论

肺部滴注老化N-OH-ZnO能够促进实验性转移小鼠模型中4T1细胞的转移性定植和生长。我们认为，这项研究为N-OH-ZnO的进一步研究和开发提供了新的思路，是一种潜在的抗肿瘤策略。需要更多的研究来确定其具体治疗作用的有效剂量和最佳用药方案，进一步阐明其机制此外，我们还需要深入研究N-OH-ZnO的作用机制，包括肿瘤细胞的信号传导通路、转移相关因子的表达及其调控，以及肿瘤血管生成的机制等方面。同时，也需要注意到N-OH-ZnO可能存在的副作用和安全性问题，如其对非肿瘤细胞的影响、长期应用的潜在风险等。因此，我们需要在进一步研究和开发N-OH-ZnO的同时，加强安全性和毒性的评估和监管，确保其在临床应用中的有效性和安全性。总之，本研究为N-OH-ZnO的应用和开发提供了有益启示，也为肿瘤治疗领域的研究和实践带来了新的契机此外，我们还可以对N-OH-ZnO进行更深入的探究，例如进一步研究其物理化学性质和生物学性质，以及在不同肿瘤类型中的应用效果。同时，可以考虑将N-OH-ZnO与其他治疗手段进行联合应用，如放疗、化疗等，以提高治疗效果和减少副作用。

此外，在临床运用中，还需要加强对N-OH-ZnO的药代动力学研究，包括其吸收、分布、代谢、排泄等方面，以确保药物能够在体内达到预期的治疗效果。

此外，还可以考虑利用基因编辑技术和纳米技术等手段，对N-OH-ZnO进行优化和改进，以提高其治疗效果和减少副作用。

总之，N-OH-ZnO作为一种新型肿瘤治疗药物，具有很大的潜力和前景。在未来的研究中，我们需要不断加强对其作用机制、副作用和安全性等方面的研究和监管，以确保其在临床应用中的有效性和安全性，为肿瘤治疗领域的研究和实践带来更多的机会和进展此外，可以考虑使用N-OH-ZnO作为肿瘤诊断的手段，从而实现早期发现和治疗，以及监测治疗的效果。例如，利用N-OH-ZnO的荧光性质，将其制成荧光探针，可以实现对肿瘤细胞的快速检测和定位。

同时，还可以利用N-OH-ZnO的特殊结构和物理化学性质，在其他领域应用，比如环境污染和食品安全等方面，进行监测和治理。

需要强调的是，任何新型药物的研究和应用都需要经过科学的实验和严格的临床试验，以确保其安全性和有效性。在开展相关研究和应用之前，必须对其进行充分的评估和监管，保障人类的身体健康和生命安全。

综上所述，N-OH-ZnO作为一种新型肿瘤治疗药物，具有广阔的前景和应用空间。未来的研究和实践需要不断加强对其作用机制和生物学性质的探究，以及药代动力学和安全性的评估和监管。同时，利用其在肿瘤诊断和其他领域的应用也是一个重要的方向。通过共同的努力和合