福建师范大学14春学期课程考试《分子生物学》作业考核试题

福建师大网络学《

分子生物

》期末试一．名词解释1．增色应：DNA性时吸光度增加的现象。2．核酶具有催化活性的RNA在RNA的接加工过程中起到自我催化的作用。3．半不连续复制：一条新链连续合成而另一条链不连续合成的模式。4．操纵子细菌基因表达和调控的单位，包括结构基因和能被调控基因物识别的DNA控元件。5．增强：

是一个顺式作用序列，能够提高一些真核生物启动子的利用，并能够在启动子任何方向以及任何位置（上游或者下游）作用。6．核小：色质的基本结构亚单位，由200bpDNA和蛋白质八聚体组成。7．核糖体：核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗其能按照mRNA指令将氨基酸合成蛋白质多肽链，所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。8．启动：合聚合并起始转录的DNA区。9．终止：录本后部所代表的序列能够引起聚合终止转录。10DNA克隆：指体外对子按照既定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入适当细胞内其细扩增和繁殖而获得该分大量拷贝的过程称为分子克隆，又叫基因克隆或重组DNA技术。二．请选择正确的选项1．以下个是核蛋白（B）A．角蛋B．染色质C．组蛋白D．蛋白聚糖2中的一段5''-AGTCTGACT-3''序列等同于RNA中的哪一（A．5''-AGUCUGACU-3''B．5''-UGTCTGUTC-3''C．5''-UCAGUCUGA-3''D．5''-AGUCAGACU-3''3．解链温度是指（B）A．A达到最大值时的温度

D）

B．A达到最大值50的温度C．开始解链时所需要的温度D．DNA完全解链时所需要的温度4．年和Crick提出（A）A．多苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B．DNA复制是半保留的，常常形成亲本－子代双螺旋杂合链C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D．遗传物资通常是非RNA5．以下哪个在260nm波长下具有最大的单位质量吸收（B）A．双链B．单核苷酸C．RNAD．蛋白质6．系列载体是第一次利用蓝-白斑进行筛选的载体，蓝-白斑筛选被用于（B）A．检测源DNA片段是否在细菌中表达B．检质粒是否插入外源DNA段C．检测细菌是否含有质粒D．提示克隆化外源段的性质7．以下哪一个是大肠杆菌和真核生物染色体的共同之处（D）A．是环状B．被装成核小体C．位于核中D．DNA是负超螺旋8．反密码中哪个碱基对参与了密码子的简并性（摇摆）（A）A．第个B．第个C．第三个D．第一个和第二个9．扩增目的片段时，在第几个循环后才出现目的片段长度的双链分子（C）A．第一循环B．第二个循环C．第三个循环D．第四个循环10原核生物中，后随链的引物是被（C）清除的A．’至5外切核酸酶B．连酶C．聚合酶ID．DNA聚合酶III11.核生物启动序列－区的共有序列称（C）A．盒B．CAAT盒C．Pribnow盒

D．GC12由146bpDNA段，组蛋白八聚体构成的复合体称为（B）A．核小B．核小体核心C．核糖体D．螺线管13人体中的脱辅基脂蛋白肝细胞中产生一个的载脂蛋白，而在肠细胞中，由于脱辅基脂蛋白mRNA第6666位的一个碱基变换为U，结果产生一个终止密码子，因此在肠细胞中，脱辅基脂蛋白产生一个241kDa的截短的载脂蛋白B48，产生这种现象是因为（B）的结果A．可变剪接B．RNA编C．RNA翻译后加工D．偶然突变14某限制性内切酶酶切割5’…GG↓AATTCC…’序列后产生（A）A．’突出末端B．’突出末端C．5’及3突出末端D．平末端15原核生物的起始氨基酸是（A）A．甲酰硫氨酸B．甲氨酸C．组氨酸D．色氨酸16下面哪个结构域是DNA结合结构域（A）A．螺旋-转角-螺旋结构域B．螺旋-环螺旋结构域C．亮氨酸拉链D．酸性激活结构域17光复活修复中哪种酶起关键作用（A）A．光解酶B．烷基转移酶C．糖基化酶D．AP内切核酸酶18转化是（A）A．细菌收一个质粒B．细菌表达一个基因C．细菌吸收一个噬菌体D．从细菌中分离一个质粒19一种细菌由360核苷酸组成，它所编码的蛋白质长度是（D）A．约360个氨基酸B．约1080氨基酸C．120氨基酸D．少于120氨基酸

20基因组是（B）A．双链状DNAB．双链环状DNAC．单链线状DNAD．单链环状三．问答题1.请简述遗传密码的特性答(1)、码子的连续性（无标、无重叠(2)、密码子的简并性(3)、密码子的摆动性（变偶性(4)密码子的通用性（近于完全通用）2.请简要说明cDNA文库构建的步骤答cDNA文的构建的步骤分为六个阶段。阶段1：反转录酶催化合成cDNA一链阶段2：cDNA第链的合阶段3：cDNA的基化阶段4：接头或衔接子的连接阶段5：SepharoseCL-4B凝过滤法分离cDNA阶段6：与λ噬菌体臂的连接3.在色氨酸操纵子中，弱化作用是如何实现对色氨酸合成的调控答：弱作用其实就是衰减作用。弱化子为衰减子。当色氨酸达到一定浓度、但还没有高到能够活化R使起遏作用的程度时色酸合成酶类的量已经明显降低且产生的酶量与色氨酸浓度呈负相关种控现象受转录弱化作用的调节。在色氨酸操纵子Ptrp-O与一结构基因trpE之间有一162bp的导序列构成弱化子区域，研究证明当色氨酸有一定浓度时聚酶的转录会终止在这里。当色氨酸的浓度较高或很高时，核糖体能够很快的通过序列1，并封闭序列2，这种与转录偶联的过程导序列、形一个不依ρ因的转录终止结构——弱化子得方的RNA合酶脱落录止色氨酸缺乏时，没有色氨酰tRNA提，糖体的翻译停止在序列1和2的氨酸密码子前，序列23得形成发夹式结构阻止序列4形成弱化子结构转继续进行。因此转录衰减的实质是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，

4．原核生物与真核生物蛋白质合成有何异同点答：原生物和真核生物蛋白合成的相同点是基因指导下蛋白质合成的过程，多需要形成mRNA，起导，在核糖体中合成蛋白质的过程都是将氨基酸按一定顺序合成肽链。原核生物和真核生物蛋白质合成的不同点生物转录和翻译同步进行，真核生物转录产物要加工后才进行翻译原核生物核糖体为70S，由与两亚基组成；真核生物核糖体为80S，由60S与40S两个亚基组成）原核生物的蛋白质合成起始于甲酰甲硫氨酸，需起始因子、IF-2、IF-3及GTP、参。真核生物的蛋白质合成起始于甲硫氨酸，起始因子为eIF-1、、eIF-3eIF-4eIF-5和eIF-6）原核生物在起始密码上游的SD序可与亚基16SrRNA′末端的序列互补，从而确定起始密码的位置生核糖体与5末端的帽子结构结合之后，通过消耗ATP的描机制向3端移动来寻找起始密码。（）原核生物的延长因子有EF-Ts、EF-Tu和EF-G。真核生物的延长因子是和eEF-2。（肽合成的终止需要有肽释放因子核生物释放因子有3种RF-1、RF-2RF-1识终止密码UAARF-2识别止密码UAA是一种与GTP形复合体的GTP结蛋白不参与终止密码的识别是促进核糖体与RF-1、RF-2的合。在真核生物中，仅1释放因子eRF，它可以识别3种止密码。5.请你谈谈的原理及应用前景。答：RNAi即RNA干，是近来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象,是由双链RNA（dsRNA介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象它转录水平转录后水平翻译水平上阻断基因的表达RNAi广存在于从真菌到高等植物无脊椎物到哺乳动物各种生物中时为一项新兴生物技术有广泛的用前景。下面谈谈RNAi的用前景。（）究因功能的新工具已有研究表明RNAi能够在哺乳物中灭活或降低特异性基因的表达多种表型而且抑制基因表达的间可以随意控制在发育的任何阶段生似基因敲除的效应与传统的基敲除技术相比一技术具有投入少周期短，操作简单等优势，是研究基因功能不可或缺的工具。（）研究信号传导通路的新途联合利用传统的缺失突变技术和RNAi术可以很容易地确定复杂的信号传导途径中不同基因的上下游关系Clemensy等应RNAi研究果蝇细胞系中胰岛素信息传导途,取得了与已知胰岛素信息传导通路完全一致的结,在此基础上分析了DSH3PX1与之间的关,证实是位于DSH3PX1磷酸化的上游激酶.RNAi技术传统的转染实验简单、快速、重复性好，克服了转染实验中重组蛋白特异性聚集和转染效率不高的缺点，因此为RNAi技术将可能成为研究细胞信号传导通路的新途径。（）展因治疗的新策略

RNAi具抵抗病毒入侵，抑制转座子活动，防止自私基因序列过量增殖等作用，因此可以利用现产生抗病毒的植物和动物，并可利用不同病毒转录序列中高度同源区段相应的抵抗多种病毒。6.核酸具有哪些物理化学特性、光谱学和热力学特性？答）核酸的理化特性稳定性核酸螺旋的稳定性是疏作用和堆积在碱基对间的偶极矩作用的共同作用结果酸效应：强酸条件下核酸可水解为碱基、糖和磷酸，中度的酸性可使嘌呤的糖苷键水解而产生脱嘌呤核酸。碱效应强碱条件下DNA和RNA其碱基的互变异构态的改变以及特异氢键被破坏而变性。强碱条件下RNA也易发生水解。化学变性：某些化学试剂，如尿素和甲酰胺，在中性条件下能够破坏堆积于碱基间的疏水作用而使和RNA变。黏性：分很细长，因此其液具有较高的粘性。浮力密度：的度约为1.7g/cm3可以通过氯化铯密度梯度离心法加以分析和纯化。（）酸的光谱学和热力学特性紫外光吸收：核酸因含有共轭的苯环而吸收紫外光，核算中的芳香族碱基在260nm处有最大光吸收。减色性：由于碱基在疏水环境中的堆积造成双链DNA相对单链DNA吸值减少的现象称为减色效应。核酸定量A260/280比可用于计双链DNA样的纯度对于纯DNA该比值为1.8，若比值大于1.8，意着有污染：若比值小于则味着有蛋白质污染。热变性：升高温度可使DNA和RNA变性。复性:降温可使DNA复性，但仅这一过程进行的足够缓慢时才能使互补链退火而形成完全的非变性双链DNA.7.真核生物mRNA前体如何加工成成熟的答：hnRNA是mRNA的体，其工成成熟的mRNA经:（）’-cap：在RNA5’端经化修饰加一个T-甲基鸟苷残基（）’剪切及加尾：许多真生物的前mRNA在多聚A点被剪切后，多聚体A聚合酶在形成的’加ployA尾巴形成成熟的’端。（）接：在真核生物前mRNA加工过程中，打断编码区的内含子序列被切除，然后两侧的外显子片段相连接。

8.克隆载体应具备哪些特性，并简述克隆过程。答：克隆载体应具备哪些特性有复制