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文档简介

实验六

PEG诱导动物细胞融合

(必做，验证性实验）了解细胞融合的基本原理,并掌握PEG诱导动物细胞融合的方法实验目的概述细胞融合细胞融合(cellfusion)是指两个或多个细胞通过质膜融合形成单个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,结果产生杂交细胞(hybrid),亲本相同的融合细胞称为同核体(homokaryon),反之称为异核体(heterokaryon).细胞融合在机体正常发育的各个时期都可以观察到.上世纪60年代首次体外人工诱导细胞融合获得成功以来,由于其应用的广泛性和广阔前景,已逐步发展成为重要的细胞工程技术.人工诱导细胞融合主要包括:病毒和化学融合剂以及电融合和激光融合等方法.PEG诱导鸡血细胞融合PEG是乙二醇的多聚物,存在不同分子量的多聚体,它可改变各类细胞的膜结构,使两细胞相互接触部位的膜脂双层中脂类分子发生疏散和重组,此时相互接触的两细胞的胞质沟通成为可能,从而造成细胞之间发生融合.PEG介导细胞融合,其融合效果受以下几种因素的影响:分子量及浓度、pH值、处理时间和温度等.以鸡血细胞为实验材料，经PEG诱导处理后，形成具有二个或多个核的细胞，可视为融合细胞.

实验原理实验材料及试剂材料：鸡静脉血试剂：生理盐水；GKN液；Alsver液；50%聚乙二醇采取鸡血1200r/min,离心三次5min,5min,10min取混合液1mL混合液取血细胞沉淀取适量稀释液滴加于载玻片镜检滴加PEG(稀释液的1/2)静置3分钟加入适量GKN稀释加入4mL生理盐水加入Alsver液混合(1:4v/v)实验操作流程细胞融合过程报告要求:

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