妇幼保健院检验科管理手册

生效日期：年生效日期：年月日依据ISO15189:2003《医学实验室—质量和能力的专用要求》编制（第一版）市妇幼保健院检验科管理手册检验科管理手册（第一版）目录页3.生物安全管理与持续改进3.1市妇幼保健院生物安全组织管理框架图市卫生和计划生育局微量元素检测室李根生物生化实验室桑宝德临床检验实验室张磊艾滋病筛查实验室宋志广检验科生物安全负责人：王立荣生物安全监督员：宋志广生物安全委员会：主任：高秀娥副主任：吕玉杰、高洁、陈卫、王林、王立荣、范学亮医务科生物安全负责人：范学亮生物安全监督员：席春霞市妇幼保健院法人、院长、书记：高秀娥市卫生和计划生育局微量元素检测室李根生物生化实验室桑宝德临床检验实验室张磊艾滋病筛查实验室宋志广检验科生物安全负责人：王立荣生物安全监督员：宋志广生物安全委员会：主任：高秀娥副主任：吕玉杰、高洁、陈卫、王林、王立荣、范学亮医务科生物安全负责人：范学亮生物安全监督员：席春霞市妇幼保健院法人、院长、书记：高秀娥院内感染科生物安全负责人：陈卫生物安全监督员：田鹏艳3.2生物安全管理制度3.2.1实验室人员生物安全培训、考核制度一、目的为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术，避免实验室感染，防止实验室事故，特制订本制度。二、范围适用于实验室所有工作人员。三、职责实验室负责人负责实验室生物安全实验室人员培训及考核的具体工作。四、制度内容1、制定年度生物安全培训、考核计划,报生物安全领导小组批准后实施。2、培训内容：生物安全相关法律、法规、办法、标准、本实验室生物安全手册、生物安全管理制度、应急预案、紧急事件的上报和处置程序、生物安全风险评估、生物安全操作规范、仪器设备的使用、保养、维护、个人防护用品的正确使用、菌（毒）株及样本的收集、运输、保藏、使用、销毁、实验室的消毒与灭菌、感染性废物的处置、急救等。3、每年组织全员（包括实验室管理人员、技术人员、样本运送人员、保洁员等）的生物安全培训、考核。4、针对不同的工作岗位，在全员培训的基础上，组织开展专项生物安全培训。5、培训应该由取得实验室生物安全师资培训合格证的人员进行。6、培训后应对参加培训的人员进行考核，考核形式可采取多样化，如笔试、口试、实操等。7、对考核合格的工作人员颁发相关岗位的上岗证。8、建立并保存生物安全工作人员的培训、考核档案。9、做好生物安全培训需求和效果的评估工作，为制定年度培训、考核计划提供依据。10、对新上岗、转岗的员工进行生物安全相关知识、生物安全手册等的培训，明确所从事工作的生物安全风险。11、进入实验室的外单位人员（包括进修、实习等工作人员）的由所在科室，根据所从事工作的生物安全风险进行必要的生物安全培训，所有工作均在带教教师指导下进行，学习期间不得从事危险性较高的工作。12、当有关部门新颁发、修订生物安全相关法律、法规、规范、标准等，实验室生物安全手册进行修改后应组织开展相关内容的培训和考核。13、按照档案资料管理制度保存与人员培训、考核相关的记录。3.2.2员工健康管理制度一、目的规范实验室人员的健康监护工作，预防、控制实验室感染。二、范围适用于实验室实验室所有工作人员。三、职责实验室负责人负责实验室人员健康监护工作的组织实施。四、制度要求1实验室人员体检制度1.1对新从事实验室技术人员必须进行的上岗前体检，体检指标除常规项目外还应包括与准备从事工作有关的特异性抗原、抗体检测。不符合岗位健康要求不得从事相关工作。1.2实验室技术人员要在身体状况良好的情况下从事相关工作，发生发热、呼吸道感染、开放性损伤、怀孕等或因工作造成疲劳状态免疫耐受及使用免疫抑制剂等情况时，需由实验室负责人同意从事相关工作，但不宜再从事高致病性病原微生物的相关工作。1.3实验室负责人在批准外来学习、工作人员进入实验室前应了解其健康状况，必要是可先行安排进行临时性体检，档案保留。2实验室人员免疫预防制度2.1实验室人员应根据岗位需要进行免疫接种和预防性服药，免疫接种时，应考虑适应症、禁忌症、过敏反映等情况并记入健康监护档案。2.2实验室应制定年度免疫接种计划，报主管领导批准后由实验室组织实施。免疫接种情况应记入健康监护档案。2.3实验室可根据工作开展情况对各类人员进行必要的临时性免疫接种和预防性服药，并记入健康监护档案。2.4对体检结果异常的人员应随时进行必要的免疫接种或采取其他预防手段，并记入健康监护档案。2.5发生实验室意外事件或生物安全事故后应根据需要进行必要的应急免疫接种或预防性服药，并记入健康监护档案。3发生事故后的人员管理3.1发生实验室意外事件或一般生物安全事故后由医务科/实验室确定相关人员救治、免疫接种和医学观察方案，发现异常，由医务科/人事科/实验室决定人员临时性或永久性调离岗位。临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检，体检结果达到岗位健康要求后由医务科/实验室批准其上岗。3.2发生重大生物安全事故后由医务科/实验室制定并上报相关人员救治、免疫接种和医学观察方案，同时采取有效措施尽量控制人员感染范围，主管领导对方案进行审批。医学观察发现异常，由医务科/人事科/实验室决定人员临时性或永久性调离岗位，临时调离岗位的人员在重新上岗前必须进行体检，体检结果达到岗位健康要求后由医务科/实验室批准其上岗。3.2.3实验室生物安全保卫制度1.目的：明确实验室安保制度，规范实验室管理，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2实验室安全员：监督各小组人员严格准守此制度,并负责实验室安全保卫工作。3.3科室负责人：负责协助及安排实验室安全员工作，不定期检查工作情况,及时更新修改相关规定，并对违背此规定的人员进行及时处理。4.具体内容：4.1.合理、科学设置和布局实验室。安全出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置和设备。安全门必须保持畅通，不得堵塞。实验室应保持通风透气，每天开窗2-4次。空气消毒机，每天两次消毒，做好使用情况记录。4.2.临床医学实验室窗户需具备钢丝网纱窗，以防外界“虫害”入侵，钢丝网纱窗的完整性，由各专业组长负责。4.3.应规范使用消毒灭菌装置：高压灭菌器、紫外消毒机、生物安全柜等。病原微生物密集、传染性强的实验室应具备上述所有设备，每种设备由各专业组长（或者组长指派人员）负责维护、使用和记录。4.4.非实验室人员进入检验科应经实验室负责人同意，采取相应防护措施才能进入实验室。实验室工作人员须脱下工作服、手套、洗手后才能出实验室。4.5.决不保存高致病菌菌种和标本，三类菌种和标本保存进行出入登记，标本存放应专柜、密封保存。如工作需要拿出实验室，必须有卫生行政部门许可，生物安全委员会同意，出具证明，才能拿出实验室。4.6.所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本，都应使用密封的离心管，并在盖紧盖的离心机中离心进行。标本运输应装入不泄漏、不破损、密闭的容器里，再放入标本箱里运输。4.7.工作人员（本科、进修、实习、临技、工人、聘用）必须遵守生物安全的规章制度，违者，根据有关条例由生物安全小组成员共同讨论处罚意见。4.88.菌种、毒株、传染强的标本、有害、有毒的化学药品，应实行专室专柜、双锁、两人管理，同时做好出入登记，违者重处。如发现被盗立即报告保卫科和实验室负责人4.9.为了保证生物安全，科室应准备足够的工作服、隔离衣、防护面罩、鞋帽、手套。尤其生物因子密集的地方。在检测工作中要做好个人防护。4.10.实验区域应有明确的污染区、半污染区、清洁区的标识，凡放有感染性物质或接触感染性物质的容器、仪器设备均贴生物危险表示和警示用语。4.11.不得自行拉接电线；实验室内不得用电热器取暖、烧水、实验室内严禁吸烟。4.12.仪器用电量大，医院供配电系统应满足仪器设备工作需要，实验室人员应经常对所有电插座的接地和极性、电缆的完整性进行检查一次，发现故障立即报告电工房和仪器维修室，请求帮助。如有火情立即关电源并报告医院保卫科和实验负责人。4.13.检验科试剂库房存放大量成品检验试剂，库房应保持通风透气，乙醚和浓硫酸属于化学危险物品应实行双人、双锁、并打封条，出入登记。4.14.下班时必须切掉不用电器电源，关好水、火源，关好门窗；切实做好安全检查，若发生事故和案情要保护好现场并及时向实验室负责人和保卫科报告。发现特殊情况立即报警：火警119，盗警110。4.15.突发事件紧急疏散，参考《检验科紧急逃生通道》示意图有序进行疏散逃生。4.16.每年对工作人员和学生进行安全教育，牢固树立预防为主的思想，落实防火防盗措施。爱护安全保卫设施，消防器材定期检修，保持良好状态。在工作人员中普及消防基本知识。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《意外事故处理条例》《消防手册》3.2.4生物安全文档管理制度1.目的：明确检验科生物安全文档管理制度，规范实验室管理，保证文档资料的连续性和完整性,方便相关部门检查。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度，保障生物安全资料完整性。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，防止先关资料丢弃及损毁。4.具体规定内容：4.1实验室生物安全管理法律法规、标准、规范4.1.1国务院《病原微生物实验室生物安全管理条例》（2004）4.1.2国务院《医疗废物管理管理条例》（2003）4.1.3卫生部《医疗卫生机构医疗废物管理办法》（2003）4.1.4《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）4.1.5《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（WS233-2002）4.1.6《医学实验室安全要求》（GB19781-2005）4.1.7《生物安全实验室建筑技术规范》(GB50346-2004)4.1.8WHO《实验室生物安全手册》第三版4.1.9卫生部《人间传染的病原微生物名录》4.1.10卫生部《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》4.1.11.卫生部《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》4.2检验科制订生物安全相关文件4.2.1生物安全手册4.2.2生物安全操作程序4.2.3生物安全管理制度4.2.4生物危险评估4.2.5生物安全事件应急预案和演练4.2.6生物安全相关记录，包括：生物安全管理记录，生物安全检查记录，实验室准入记录，菌种出入库记录，医院感染监测记录，高压灭菌器生物监测记录，员工健康体检记录，高致病性标本及毒菌种销毁记录，实验室消毒记录，事故应急处理记录，员工生物安全培训及考核记录，废弃物、废弃标本消毒灭菌运输记录等。4.3生物安全文档管理4.3.1检验科生物安全手册、生物安全标准操作程序、生物危险评估、每年修订一次，并及时更新，确保实验室现场使用最新和有效的版本。如无改动就使用前版。4.3.2生物安全实施的各项记录由生物安全分管人员和/或各专业组填写，每年年底收集、装订，专人归档管理。4.3.3生物安全相关文件的归档、保管、借阅等管理参照检验科文档管理标准操作程序执行。5.相关文件记录《检验科奖惩处罚条例》及实验室文档资料交接及处理登记表。3.2.5生物安全工作自查制度1.目的：明确实验室自查内容，规范实验室管理，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2生物安全管理员：监督各小组人员严格准守此制度。3.3科室负责人：负责协助及安排生物安全管理员工作，不定期检查执行情况,及时更新修改相关规定，并对违背此规定的人员进行处理。4.具体内容：4.1.实验室应严格按照“医学生物实验室出入管理规定”，对来访者要求科主任签字同意，作好出入登记。4.2.实验室入口是否注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名、联系电话等。4.3.实验室三区标识清楚，凡接触标本的仪器设备或装标本的容器贴生物危险标识、警示或提示用语。4.4.生物安全工作管理小组定期检查实验室生物安全设施、设备是否正常工作，个人防护用品是否储备。4.5.进入实验室是否穿工作服、戴帽子，操作时是否戴手套，细菌室、采血室、分子生物室、废弃物处理是否戴口罩等。4.6.实验室工作人员严格按照《生物安全手册》进行操作。4.7.严格按照“检验科消毒隔离办法”和“检验科废弃标本及容器的消毒处理”作好消毒隔离工作。4.8.检查菌种、标本、危险化学试剂是否按照生物安全管理制度执行。4.9.检查实验室空气和物体表面、地面的消毒记录，废弃物消毒记录4.10.发生职业暴露和生物安全事故，是否按照“实验室应急处理程序”或应急预案紧急处理，并作好相关记录。4.11.生物安全检查内容见生物安全检查记录表。4.12生物安全小组检查之后指出存在问题，提出整改意见，再次检查并记录整改情况。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《交接班登记记录》3.2.6实验室人员准入制度1.目的：明确实验室准入制度，规范实验室管理，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2室组长：监督小组人员严格准守此制度。3.3科室负责人：负责监督全科室人员准守此制度，及时更新修改相关规定，并对违背此规定的人员进行处理。4.具体规定要求：4.1实验室是进行临床医学检验和教学科研实验的场所，非实验室人员不得擅自进入实验室，实验室也不得从事高致病菌标本的检测。4.2.实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作，同时需经过生物安全知识和技能培训，并考核合格，持证上岗。4.3.实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及上岗之前必须经过实验室主任的批准。4.4.非本室人员到实验室，须经实验室主任批准，并办理有关手续，方可进入。在实验室内不得进行与实验无关的活动。4.5.实验室工作人员必须知道实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作。4.6.进入实验室时，应穿着工作服或隔离衣，戴口罩、帽子。当知道防护服已被危险材料污染应立即更换。离开实验室前应脱去防护服、手套，洗手后离开。4.7.禁止在工作区内使用化妆品和处理隐形眼镜。长发应束在脑后。在工作区内不应配带戒指、耳环、腕表、手镯、项链和其它佩饰物品。4.8.实验室内严禁吸烟、吃饭、饮水等。以上活动应在检验科工作人员休息室内进行。4.9.工作中工作人员必须戴手套，以防生物危险、化学品污染、冷和热，标本污染，刺伤等。在工作完成或中止后应摘掉手套并放入黄色垃圾袋中。摘除手套后应例行洗手。4.10.对污染的防护服应用黄色塑料袋封装好，交医院洗涤科处理。工作服不得穿着外出，更不能携带回家。4.11.实验结束后，实验室工作人员要认真检查门、窗、水、电以及室内存放的高压容器等，杜绝不安全隐患，确保实验室安全。4.12.离开实验室时，应向交接人员做好交接班工作，并填好《交接班登记记录》。4.13.实验结束后，关掉仪器设备电源开关、拉闸，将仪器设备整理好，实验现场整理干净，洗手后方可离开实验室。5.相关记录《实验室废物交接表》《检验科奖惩处罚条例》《交接班登记记录》3.2.7危险化学品安全管理制度1.目的：明确危险品安全管理制度，规范实验室管理，防止危险品外泄，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2危险化学品管理人员：负责危险品的申购、领用及保管处理。3.3科室负责人：监督危险化学品管理员工作，负责科室审批及申购工作。4.具体规定内容：4.1.危险化学品使用与管理4.1.1危险化学品的申购、领用要坚持专人审批、专人领用、专人保管并打封条。各科室将审批人、领用人、保管人名单送保卫处备案。人员变动时，须经实验室主管批准，做好交接工作，并及时通知保卫处。4.1.2建立危险化学品帐册，从购进、入库、领用、使用、处理都必须及时、准确作好记录，做到帐物、帐帐相符。4.1.3剧毒品的管理必须从严。领用剧毒品时必须有领用监督人到场。坚持五双制度——双人收发、双人记帐、双人双锁、双人运输、双人使用。用多少买多少，用多少领多少，剩余物品及时入柜并打封条。定期检查，做到帐物相符。4.1.4使用危险化学物品的实验室与个人，必须遵守各项安全生产制度和操作规程，严格落实安全防护措施。使用单位在危险化学品工作场所应建立事故应急处理方案和措施。4.1.5储存化学危险品，应当符合下列要求：化学危险品应当分类、分项存放，相互之间保持安全距离；遇火、遇潮容易燃烧、爆炸或产生有毒气体的化学危险品，不得在露天、潮湿、漏雨和低洼容易积水的地点存放；受阳光照射易燃烧、易爆炸或产生有毒气体的化学危险品和桶装、罐装等易燃液体、气体应当在阴凉通风地点存放；化学性质防护和灭火方法相互抵触的化学危险品，不得在同一仓库或同一储存室内存放；存放剧毒物品的部门必须备有保险箱，存放剧毒物品的保险箱钥匙应安全保存；化学危险品的存放区域应设置醒目的安全标志。4.1.6化学危险品发现丢失、被盗时，应当立即报告上级领导和保卫科、实验负责人。4.2.危险化学品的养护4.2.1化学危险品入库时，应严格检验物品质量、数量、包装情况、有无泄漏。4.2.2化学危险品入库后应采取适当的养护措施，在贮存期内，定期检查，发现其品质变化、包装破损、渗漏、稳定剂短缺等，应及时处理。4.2.3库房温度、湿度应严格控制、经常检查，发现变化及时调整。4.3.废弃危险化学品处置4.3.1废弃危险化学品各单位应专人负责分类收集，妥善贮存，容器外加贴废弃物品标签，容器封闭可靠。4.3.2废弃剧毒品、危险化学品的处理，应向保卫处提出书面申请，上报公安局获准后，由保卫处定期回收，送至有资质单位处理。4.3.3各实验室不得自行处置废弃危险化学品。严禁随意排入地面、地下及任何水源，防止环境污染与生态破坏。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《意外事故处理条例》《危险化学品领取使用及处理登记表》3.2.8消毒隔离制度1.目的：明确消毒隔离制度，规范实验室管理，防止交叉污染，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，保障实验室生物安全。4.具体规定内容：4.1.检验科区域（部门）消毒4.1.1清洁区消毒用250－500mg/L有效氯溶液或0.1－0.2%过氧乙酸溶液，每天擦试桌椅、地面，作用时间为30－60分钟，每天开窗通风数次。4.1.2半污染区消毒每日采用含氯剂或0.1－0.2%过氧乙酸擦拭，桌椅地面的消毒液用500mg/L有效氯擦洗。4.1.3污染区消毒污染区是标本收集、存放、处理实验室等处。消毒方法如下：桌椅等表面每天开始工作前用清水擦抹1次，下班前用250－500mg/L有效氯溶液或0.1－0.2%过氧乙酸擦洗1次。地面应在开始工作前用清洁湿拖把拖地1次，下班前用高于消毒台面浓度500mg/L有效氯进行消毒。工作台面可采用干净布铺于上面，工作完毕后，将布消毒。各种表面、台面可采用高强度便携式紫外线灯进行照射。4.1.4所有清洁器材、物品、用具不得三个区域共用，专区专用，用后及时消毒、清洁。4.2.空气消毒实验室必须有良好的通风环境，应有换气，排气设备，保证实验室的通风和空气清新。可采用多功能消毒机进行空气消毒。4.3.器材的消毒4.3.1金属器材穿刺取血针一人一份，一用一消毒，集中灭菌处置。采集血液标本，必须做到“一人一针一筒”。针头、注射器均为一次性用具。用后注射器放在黄色口袋，针头应置于锐器盒进行无害化处理，压脉带用后消毒。小的金属器材如接种环可用酒精灯烧灼灭菌。较大金属器材用2%碱性或中性戊二醛溶液浸泡2h后，清洗沥干高压灭菌。4.3.2玻璃器皿被污染的吸管、玻璃试管、玻片、滴管应置于每日配制的1500-2000mg/L有效氯消毒剂中或（0.5%肥皂液），再煮沸15－30分钟后洗刷、沥干、采用37℃－60℃烘干。接触细菌试管、琼脂板单独进行高压灭菌。实验室用的器皿，浸泡于重铬酸钾浓硫酸清洁液内24h或高压灭菌后用清水冲洗干净，烘干备用。4.3.3塑料、橡胶器械一次性使用的塑料制品，一次性手套及无纺布制品帽子、衣、口罩均应放入黄色污物袋内集中焚烧。受污染的吸液球用0.5%－1%肥皂液或洗涤剂全部浸入，煮沸15－30分钟，然后清洗，晾干。离心机内的塑料套管，采用2%戊二醛溶液擦拭30分钟，以杀灭肝炎病毒或结核杆菌。血清反应板用0.5%过氧乙酸或2000mg/L有效氯浸泡4小时或高压灭菌，进行无害化处理。4.3.4贵重仪器显微镜、自动化仪器、分光光度仪、离心机、天平、细胞计数器、冰箱等。可采用2%碱性或中性戊二醛溶液或1%洗必泰酒精溶液或75%乙醇擦拭，半小时后用清水擦净。4.3.5手消毒工作后均用洗手液和流水洗手2－3分钟（洗手6步法）。工作人员操作时应戴手套，如手被传染病菌污染立即用消毒洗手液和流动水洗手，完毕后用速消毒剂揉搓。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》及相关消毒登记表3.2.9锐器使用管理制度1.目的：明确锐器使用制度，规范实验室管理，强化实验室工作人员安全使用锐器的意识,防止意外发生，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度，加强安全意识。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，保障实验室及人员安全。4.具体规定内容：4.1.锐器的贮存与使用4.1.1刀剪、玻璃器皿应放置在坚固的容器中。4.1.2实验室使用针、注射器及其他利器要特别小心，切记针头不能回套，以防止刺伤、划伤。使用后，针头放入锐器盒里，统一进行无害化处理。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。4.1.3一次性注射器用后放双层黄色口袋理，由医院废物处理中心处理。非一次性利器（如刀剪）的消毒参照“实验室消毒、灭菌措施”。4.1.4处理破碎的玻璃器皿，污染的针头、利器时必须戴手套，脱掉手套后要洗手。4.1.5试管离心前，观察试管有无破裂，离心管套底部有无缓冲垫，以避免离心时试管破裂，造成实验室污染。4.2.事故性刺伤、划伤或擦伤的处理使用锐器进行致病微生物实验时，可能无意中刺伤或划伤皮肤，引起严重的实验室感染。一旦发生这种意外，必须立即报告实验室负责人，同时参照“医学生物实验室事故的应急措施”进行处理，并按规定报告实验室负责人和医院感染办，并做好职业暴露登记。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》及锐器使用及处理登记表3.2.10实验室意外事故应急处理与报告制度1.目的：明确意外事故应急处理及报告制度，规范实验室管理，及时快速处理意外事故，尽量降低因意外事故产生的损失，保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度。3.2科室负责人：监督全科人员严格遵守相关制度，对于意外事故进行及时处理及上报，并对相关违规人员进行处理。4.具体规定内容：4.1.少量的样本溅泼在工作台面或地面时，用卫生纸吸干，再用以0.5%次氯酸钠或过氧乙酸覆盖1小时后洗去。4.2.标本离心时试管破裂，应戴手套，用镊子将试管碎片夹出，放入专用黄色口袋里。离心机内塑料套管用2000mg/L有效氯消毒液浸泡4小时；用2%戊二醛或75%乙醇擦拭离心机，半小时后用清水擦净。4.3.手和足被样本本污染时，以0.2%过氧乙酸洗涤消毒；污染工作服应立即更换，高压灭菌。4.4.被大量烈性传染病的病原菌污染时，立即封闭现场，消毒处理，同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会及省CDC作相应处理。4.5.误服微生物悬液者，立即用含漱，洗胃，催吐等方式处理；若标本溅入或接触到皮肤上，立即用0.2%过氧乙酸浸泡消毒；溅入眼中者，以无菌生理盐水冲洗后，每隔1小时用抗生素眼药水滴眼。视具体情况作针对性的处理。同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.6.被针刺、刀割或其他形式的割伤，致伤口与标本直接接触，或者带病毒样本碰到皮肤，应在伤口旁轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压；受伤部位的伤口清洗后，应当用消毒液，如：75%乙醇或0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口，给予必要的预防和相应的抗生素处理，同时对标本进行相关的病原菌检测。对于毒性较强的病原体感染，必须立即向有关负责人报告，根据不同病原体感染采取相应的预防性治疗应急措施，并予以较详细的登记；同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.7.腐蚀物品大量溅泼于人身上、应立即用自来水冲洗；如溅泼在工作台面或地面上，应及时冲洗台面或地面，执行者应佩带个人防护用品；同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.8.易燃品引起火灾应使用CO2灭火机灭火，切断电源，除救火外，其他人员按安全线路撤离，同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.9.水银温度计断裂，用毛细管吸走水银,按《危险化学品安全管理办法》处理；4.10.化学品进入眼睛的处理必须立即紧急处理，用大量清水冲洗眼球，并送眼科医生处理；同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.11.吸入有毒物蒸气的处理在实验室中如呼吸到有毒蒸气时，可能会感觉到头昏目眩，甚至昏倒。此时应迅速离开实验室，到室外空气流通处休息。同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。对昏倒的患者其处理办法为：4.11.1将患者迅速抬到室外空气流通处；4.11.2解开患者的钮扣、领带等衣物束缚，平躺通风处；4.11.3如果呼吸微弱或已消失则要赶快进行口对口人工呼吸，并通知相关科室医生。同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。对昏倒的患者其处理办法为：4.12.化学灼伤的处理任何化学药品（不论水溶性与否），当溅落在皮肤上时应立即用大量水冲洗，并用肥皂清洗。当落在皮肤上的药品属强酸或强碱时则立刻用大量冷水清洗，如大量药品喷洒到全身，则应马上除去衣物并冲水浴。同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会作相应处理。4.13.衣服着火时紧急处理4.13.1不可奔跑4.13.2用防火毯或实验衣包裹身体灭火4.13.3可在较大空地上翻滚以便灭火4.13.4用安全淋洗设备冲洗或用灭火器灭火4.14触电时紧急处理4.14.1症状较轻者：即神智清醒，呼吸心跳均自主者可就地平卧，严密观察，暂时不要站立或走动，防止继发休克或心衰。4.14.2呼吸停止、心搏存在者：将伤者就地平卧，解松衣扣，通畅气道，立即进行口对口人工呼吸；4.14.3心搏停止、呼吸存在者：应立即作胸外心脏按压；4.14.4呼吸心跳均停止者：现场抢救最好能两人分别施行口对口人工呼吸及胸外心脏按压，以2比15的比例进行，即人工呼吸2次，心脏按压15次。如现场抢救仅有1人，也应按2比15的比例进行人工呼吸和胸外心脏按压。4.14.5处理电击伤时，应注意有无其他损伤。如触电后弹离电源或自高空跌下，常并发颅脑外伤、血气胸、内脏破裂、四肢和骨盆骨折等。4.14.6以上情况(3.14.2-3.14.5)，均需立即通知相关科室医生及时处理。同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会、保卫科作相应处理。4.15.遇火灾、地震或其他自然灾害时，视建筑物或实验室遭破坏程度，隔离污染区和污染源，有效消毒、疏散工作人员，同时报告实验室负责人、医院感染办、生物安全委员会、保卫科作相应处理。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《意外事故处理条例》《意外事故登记表》3.2.11检验科传染病检测及报告制度1.目的：明确检验科传染病管理制度，规范实验室管理，提高传染病网络直报质量，提高传染病的预警能力。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度，保障传染病上报及处理及时。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，保证传染病上报质量及速度，对违规人员进行处理。4.传染病的种类4.1甲类传染病：鼠疫、霍乱4.2乙类传染病：禽流感、甲流感、肝炎、痢疾、伤寒和副伤寒、艾滋病、HIV感染者、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流脑、猩红热、流行性出血热、狂犬病、钩端螺旋体、布鲁氏菌病、炭疽、斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热、新生儿破伤风、肺结核。4.3非典、禽流感、甲流感属乙类传染病但当甲类传染病处理及报告。5.具体规定内容：5.1按照《生物安全手册》要求，做好标本的收集、运送工作。5.2严格按照《标准操作程序》做好病原体的检测工作和复查工作，确保检验结果的准确可靠。5.3凡检出上述传染病病原体，认真做好登记记录，立即将结果报告给临床。登记项目应包括送检科室或医生、送检日期、病人姓名、性别、送检样品、化验项目、化验结果、检验人员和报告日期。5.4结核杆菌阴性涂片保存在微生物室标本储存箱中，储存一周后，将玻片煮沸消毒30分钟，清洁备用。5.5凡检出上述传染病病原体，不保存，立即进行高压灭菌、无害化处理，并做好病原体的销毁记录。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》及传染病处理及上报登记表。3.2.12强传染性样本的采集、运输、处理与保存制度1.目的：明确强传染性样本管理制度，规范实验室管理，强化实验室工作人员生物安全意识,防止强传染性样本外泄，以保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度，加强生物安全意识。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，对于出现相关意外时及时上报相关部门,保障实验室及人员安全。4.具体规定内容：4.1.标本采集4.1.1为避免交叉感染实验人员应选择二级防护水平。4.1.2详细登记有关病例的姓名、性别、年龄、家庭住址、联系电话等基本信息以及标本采集日期。4.1.3采集的标本放入带盖不破损、不泄漏、密封的容器内，（采集标本时不能污染容器外部）加注特别标识，装入标本箱运送。运送过程严防破碎和外溢。送入检验科签收。4.2.标本前处理标本接种在生物安全柜内进行。使用专用的离心机，离心时使用密闭的离心机转头或密闭样品杯，停止离心半小时后取出。4.3.标本检测标本应在专用区由专人进行检测，以便标本、仪器、环境集中消毒和处理。尽量避免标本分散到多个实验室检测。4.4.标本检测后处理检测后标本、废弃物集中放入黄色口袋里再放入带盖专用污物桶内，高压灭菌后送到特殊垃圾处进行无害化处理。所有废液都用2500mg/L有效氯消毒液浸泡4小时以上，或直接高压灭菌，再送医院污水站消毒处理。4.5.标本的保存需进一步确证是否有疑似高致病菌标本暂存，应专室专柜，两人管理，确证之后，立即销毁菌种和标本，实验室不得保存。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《意外事故处理条例》《实验室意外事故应急处理及报告制度》及强传染性样本交接及处理登记表。3.2.13菌（毒）种或样本等感染性材料安全管理与保存制度1.目的：明确菌（毒）种或样本等感染性材料管理制度，规范实验室管理，强化实验室工作人员生物安全意识,防止感染性材料外泄，以保证实验室及相关人员的安全。2.范围：适用于全检验科，包括血库。3.职责：3.1工作人员：严格遵守此制度，加强生物安全意识。3.2科室负责人：监督全科室人员严格遵守此规定，及时更新相关条款，对于出现相关意外时及时上报相关部门，保障实验室及人员安全。4.具体规定内容：4.1.菌种保存种类4.1.1标准菌株：ATCC25922大肠埃希菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌、ATCC27853铜绿假单胞菌、ATCC29212粪肠球菌、ATCC13883肺炎克雷伯菌ATCC90028白色念珠菌等，由卫生部临床检验中心提供。4.1.2保存三类菌种：如葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌等条件致病菌。4.1.3如实验室检出高致病菌（结核杆菌）等，立即高压灭菌处理，并做好记录。任何人不得私自保存鼠疫杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌、结核杆菌等传染性强的菌种。4.2.菌种或毒种的保存方式大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍漫不动杆菌、链球菌、肺炎链球菌、嗜血杆菌等保存：将对数生长期的培养物混悬于0.5-1.0ml无菌兔血小管中，置-80℃冰箱保存即可。4.3.微生物室设立菌种专管人员，实行组长负责制，菌种保存于专室专柜、双锁，两人管理，确保菌种安全。如发生被盗等意外事故，立即报告医院保卫科、生物安全委员会、实验室负责人、必要时打电话110报警。4.4.建立菌种保管及发放登记册，包括细菌名称、分离日期、鉴定日期、鉴定方法、耐药机制、签发者等并注明使用、转移、销毁情况及原因，见附表。4.5.凡科研、临床新药试验需要转移菌种，须填写使用申请，卫生行政部门领导和生物安全委员会批准，见证明，微生物室组长签字同意后，方可在菌种专管人员处签名领取。4.6.各种菌种应按规定时间转种，一般在转种三次后作一次全面的鉴定，注意菌种有无污染及变异，如发现污染及变异时，应及时更换。并做好相应记录。4.7.菌种或毒种的消毁必须有科主任、微生物工作人员在场，并注明销毁情况的原因，作好记录。4.8.菌种保存范围及向外单位转移，应按国家卫生部的规定执行。4.9.初筛HIV阳性标本不保存，及时通知预防保健科，由专人，专门的容器，专车两人运送成都市预防控制中心，并做好交接记录和签字。4.10.检测后的血液等标本需要备复查，要将标本密封放在标本储存室2-8℃冰箱里保存，放入冰箱时要登记签字，取出来进行无害处理时也要登记签字。24小时工作人员看管，晚上大门关闭，如发生被盗等意外事故，立即报告医院保卫科、生物安全委员会、实验室负责人、必要时打电话110报警。5.相关文件记录《生物安全手册》《检验科奖惩处罚条例》《意外事故处理条例》《实验室意外事故应急处理及报告制度》及菌（毒）种或样本等感染性材料交接及处理登记表。3.3实验室生物安全风险评估3.3.1一、检验职业感染的现状经血、呼吸道、粘膜传播疾病直接危害着检验工作者身体健康。我国是HBV感染的高发区,约有1.3亿人携带HBV,HBV表面抗原(HBsAg)的携带率为8%-20%;自90年代以来HCV感染也呈上升趋势,其感染率为3%。目前艾滋病感染在我国的流行已进入增长期。在无偿献血人群中检出乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等病毒感染占有一定的比例。经调查显示,针头和玻璃碎片是主要锐器致伤因子,经常接触针头者发生锐器伤的危险是不经常接触者的23倍。多种传染病是通过血液传染的,而血液检验中的职业暴露大多数来自实验室工作人员在实验操作和标本采集过程中,意外被带病原体的血液污染破损的皮肤或被病原体感染的针头、血常规采血针、采血玻璃管、吸头等锐器刺破皮肤，呼吸道吸入气溶胶也是传播方式一。因此,检验人员面临着严峻的职业暴露危险。1.传播途径检验人员感染疾病的一般传染途径有:

（1）皮肤破损:带有HIV、HBV、HCV、梅毒等病原体的血液,长时间接触小伤口、溃疡、擦伤等破损皮肤,将会造成机体的感染。

（2）穿刺:由于针头、刀片等对皮肤的意外损伤,使带有病毒的全血、血清或血浆进入皮下或循环系统,造成感染。这种针头意外损伤是职业性HBV和HIV感染最重要的原因。带有HIV的针头意外穿刺皮肤后,HIV感染的可能性在0--0.9%之间,平均为0.4%。而对于HBV,这个可能性在6%-30%之间,平均为18%。有学者进行了相应的统计推算,每1000个艾滋病病人,每年会产生1例由于针头意外造成的职业性HIV感染;而每1000个乙肝患者,每年会产生45例类似职业性HBV感染。由于HBV在人群中的感染率比HIV高得多,在一定人群中,每年产生的因针头意外造成的职业性HBV感染比HIV多得多。（3）粘膜:由于试管未封闭、离心意外等造成的血液飞溅,带有病原体的血液与口腔、鼻腔黏膜或眼结膜等接触,可以造成感染。还有被HIV、HBV、HCV、梅毒等病原体污染的电话、仪器、工作台面等接触,也可以造成感染。（4）吸入含病原体的气溶胶引起感染:在采血窗口或发放化验单时,直接与病人面对面接触交谈,易感染呼吸道疾病。此外,能引起气溶胶的操作或事故有离心、溢出或溅洒、混合、混旋、研磨、超声以及开瓶时两个界面的分离等。2.危害因素

（1）血源性危害:调查研究发现,检验人员被针刺伤占第2位。最常见危害较大的职业传染病有以下3种：

1）乙型肝炎:HBV是检验人员面临传播危险性最大的血源性疾病,HBV在血液中的浓度可以高达108-109拷贝/ml,检验人员感染率较高。HBV主要传播途径是经血液的传播,病毒携带者血液中HBV的浓度很高,针刺伤时,只需0.004ml，带有HBV的血液足以使受伤者感染HBV。

2）丙型肝炎:丙肝病毒(HCV)在血液中的浓度在102-103/ml左右,主要经血液传播,因此通过注射、针刺、含HCV血液污染的伤口和其他密切接触传播。丙型肝炎大多数患者的症状不明显,往往不容易被发现,可表现为流感样症状,有时会造成比HBV更严重的后果。

3）艾滋病(AIDS):近年来我国AIDS的流行对检验人员造成了日益严峻的职业性感染威胁。HIV在血液中的浓度通常在100-104拷贝/ml,被HIV污染的锐器刺伤而感染的比率为0.3%。美国疾病控制中心最新资料显示,截止到2000年底美国医护人员中已有57人被确诊感染了HIV,其中实验室技术人员19人。

（2）呼吸道、接触及节肢动物叮咬危害因素病原微生物感染：病原微生物实验室、特别是高致病性病原微生物实验室内操作的任何疏忽、失误都可能造成难以弥补的损失。常见感染：结核分枝杆菌、肠道致病菌等。

3．防护措施

（1）增强检验工作人员的防护意识及防护行为：为了最大限度地减少危害,检验工作人员应主动地从多方面了解关于HBV、HCV、HIV等相关的知识,了解各种病毒的传播方式,使自己知道采取什么样的防护措施。医院和检验科应高度重视,定期加强教育,让检验工作人员都意识到自我防护的重要性,自觉地养成良好的习惯。

（2）规范操作程序：各类医疗废物、垃圾必须分类放置,及时消毒后,再由卫生清洁人员取走。特别注意对损伤性医疗废物的及时处理。严格防止感染或致病因子外泄而污染环境。要严格规章制度,养成良好的工作习惯。检验科应制定一套有关卫生防护的规章制度,人人都应自觉遵守。如在实验室内禁止吸烟、吃东西、接听手机;在免疫学检验室和细菌室工作,要戴口罩和手套。防止各种液体飞溅,必需避免手或皮肤直接接触,若有意外污染应及时消毒、冲洗并擦干飞溅出的液体。在离心机停止转动前时,不要打开顶盖,以减少气溶胶的产生。更不要用手去使离心机减速,避免机械损伤的发生。

（3）避免锐器损伤,熟练掌握锐利器械的使用：感染性的各种针管、吸管、吸头、试管、玻片等用后及时放在专用容器内;用过的针头不要套回针帽,避免刺伤。锐器损伤后立即挤出伤口处的血液,用肥皂水和流水清洗伤口,2%碘伏消毒后纱布包扎,可套橡皮指套(或橡皮手套),下班前洗手再重新消毒包扎,并准确记录上报,确认损伤器械是否来自有传染性疾病的患者,以使受伤者及时得到监测和治疗。

（4）重视手部清洁：院内感染病原体传播最主要媒介是污染的手。戴医用乳胶手套可以为医务人员提供很好的保护。乳胶手套尽管不能避免针头造成的机械损伤,但可以在很大程度上减少皮肤与血液的接触。而且,当针头造成意外损伤后,乳胶手套还可以起到一种阻挡、封闭作用,减少进入伤口的血量,从而降低感染。正确的洗手方法可使手表面的暂居菌减少1000倍,用普通肥皂和清水擦揉15s以上,可清除暂居菌或降低其在皮肤上的密度,搓洗15s,手表面的金黄色葡萄球菌可下降77%,洗2分钟可降低85%;对铜绿假单胞菌效果更好,搓洗12s便可去除92%,洗2分钟可去除97.8%。

（5）职业暴露的局部处理：工作中职业暴露后现场急救处理非常重要,若黏膜暴露应用生理盐水或清水反复冲洗干净;皮肤意外接触到血液等污染物,应立即以肥皂和清水冲洗;若被血液污染的针头或仪器等锐器刺伤,对伤口进行轻轻挤压,尽可能挤出损伤处的血液,用肥皂和流水清洗伤口,用70%酒精、0.2%-0.5%过氧乙酸、0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒,并包扎伤口、带手套等,发生意外伤害暴露后要立即进行伤口局部处理,并立即报告预防保健部门,受伤者及患者进行HBV、HCV、HIV和梅毒等检测。依据检测结果尽快采取相应的补救措施,减少职业感染率的发生。3.3.2二、风险评估目的

风险评估的目的就是确定实验室防护等级，建立生物安全防护机制，配备适当的防护用品，采取相应的防护措施。评估的范围是科室所有涉及到的病原微生物，以及对化学、物理、辐射、电气、水灾、火灾、自然灾害和噪音等进行风险评估。科室管理机构要统筹安排。评估的结论要十分明确，包括危险程度极低的微生物。可以根据实验室工作特点、仪器使用，打包评估。危害性评估始于实验室设计建造之前，实施于实验活动之中，在使用之后还需进行定期的阶段性再评估。当发生实验室意外，或新发传染病，或严重疫情时，应特别注意要安排此项工作。紧急、意外事故应对方案提供以下操作规范：

1.防备火灾、洪水、地震和爆炸等自然灾害

2.意外暴露的处理和污染清除

3.意外事故发生时的继续操作、人员紧急撤离人员暴露和受伤的紧急医疗处理，如医疗监护、临床处理和流行病学调查。3.3.3三、风险评估内容（一）生物因子危害评估生物因子（biologicalagents）概念：可能引起感染、过敏或中毒的所有微小生物体，包括基因修饰的、细胞培养的和寄生于人体的。（1）危害评估内容包括生物因子已知或未知的特性，如生物因子的种类、来源、传染性、传播途径、易感性、潜伏期、剂量－效应关系、致病性、变异性、在环境中的稳定性、与其他生物和环境的交互作用、流行病学资料、预防和治疗方案等。（2）制定评估报告：各种因素的风险发生概率程度、针对这些风险采取的预防措施以及风险发生后的补救方法。依据2006年1月11日中华人民共和国卫生部颁布的《人间传染的病原微生物名录》，对医院检验科可能接触的病原体进行评估。。

实验室主要实验活动序号实验室活动涉及的病原微生物危害程度分类活动类别生物安全级别7抗酸染色结核分枝杆菌第二类样本检测BSL-211细菌培养鲁氏不动杆菌第三类大量活菌操作BSL-212细菌培养鲍氏不动杆菌第三类大量活菌操作BSL-273细菌培养大肠杆菌第三类大量活菌操作BSL-283细菌培养产酸克雷伯菌第三类大量活菌操作BSL-284细菌培养肺炎克雷伯菌第三类大量活菌操作BSL-290细菌培养摩氏摩根菌第三类大量活菌操作BSL-2107革兰染色淋病奈瑟菌第三类大量活菌操作BSL-2121细菌培养奇异变形菌第三类大量活菌操作BSL-2123细菌培养普通变形菌第三类大量活菌操作BSL-2124细菌培养产碱普罗威登斯菌第三类大量活菌操作BSL-2125细菌培养雷氏普罗威登斯菌第三类大量活菌操作BSL-2126细菌培养铜绿假单胞菌第三类大量活菌操作BSL-2130细菌培养肠沙门菌第三类大量活菌操作BSL-2132细菌培养甲乙丙型副伤寒沙门菌第三类大量活菌操作BSL-2133细菌培养伤寒沙门菌第三类大量活菌操作BSL-2137细菌培养粘质沙雷菌第三类大量活菌操作BSL-2138细菌培养志贺菌属第三类大量活菌操作BSL-2139细菌培养金黄色葡萄球菌第三类大量活菌操作BSL-2142细菌培养肺炎链球菌第三类大量活菌操作BSL-2147抗体检测梅毒螺旋体第三类样本检测BSL-245抗体检测艾滋病毒第二类样本检测BSL-2107抗体检测甲型肝炎病毒第三类样本检测BSL-2108抗体检测乙型肝炎病毒第三类样本检测BSL-.1艾滋病抗体样本检测的风险评估一般生物学特性1.起源1981年6月5日美国亚特兰大市疾病控制中心在当天出版的《发病率与死亡率周刊》中刊登了一篇只有几页的报告，简要介绍了5位病人的病史。这5个人本来很健康，但他们得了一种十分罕见的威胁生命的疾病。第一位病人是33岁的美国人。他以前很健康，1981年1月突然发烧，再加上干咳，呼吸困难。3月份，他被洛杉矾一家医院接收。医生诊断认为，这种新的流行病是典型的肺炎，是由对健康人没有危险的病原体卡氏肺囊虫引起的。此外，医生肯定，这种病是巨细胞病毒传染的，化验结果是白血球数目减少。尽管用最现代化的方法进行治疗，但这位33岁的美国人仍然于1981年5月3日死了。这5位病人的共同特点是：大约30岁左右，发烧、咳嗽，患卡氏肺囊虫肺炎，被认为是由巨细胞病毒传染的。这种病的最终定名，还得感谢法国里昂的巴斯德研究所。以蒙特尼尔为首的研究小组在过去研究的基础上设想：分离病毒最好的时机不是在病情已深人发展的时候，而是在病之初期，先兆症状刚刚出现之时。接着他们从一患者身上取出淋巴结组织进行培养，并采取有利于病毒繁殖的措施。15天后，漂浮在培养液上层的淋巴结细胞中发现了具有特征的逆转录酶。不久，又在电子显微镜下观察到了这种新病原。1983年5月，他们在《科学》杂志上报2.基因组及其编码产物HIV呈20面体立体对称球形颗粒[3]，表面有刺突状结构的糖蛋白，直径约为100nm，分为包膜与核心两部分，包膜以脂质双层结构为框架，gp41蛋白横跨脂质双层，gp41外端连接gp120，包膜下有一层基质蛋白p17，附着脂质双层膜的内层，起稳定作用。病毒的核心呈锥形，核衣壳由核心蛋白p24组成，和其它逆转录病毒基因组一样为二倍体基因，核心内有两条相同的单股RNA链，由氢键将两个RNA分子连接成70sRNA，重要的蛋白质有逆转录酶(p66/51)和整合酶(p34)(见图1)。HIV基因组又称HIVRNA，由约9200个碱基组成，其RNA中含有gag、env和pol三种结构蛋白的基因以及6种调控基因(tat，vif，vpr，vpu(在HIV-2型为vpx)，nef，rev)。gag基因先编码一个55KD的前体蛋白(p55)然后在蛋白酶作用下裂解形成衣壳蛋白(CA)p24和基质蛋白p17，p24形成病毒蛋白的锥体核。pol基因一部分与gag重叠，表达融合蛋白p160，然后水解成3个片段，从5’到3’分别是p11,p66/51和p32。p11是蛋白水解酶，从前体裂解后获得活性，是蛋白酶抑制剂的抗病毒位点，p66/51是逆转录酶，具有逆转录酶、核糖核酸酶H、DNA多聚酶活性，p32是整合酶。env基因编码包膜糖蛋白，先编码一个88KD的蛋白，经糖基化后分子量增至160KD，即包膜糖蛋白的前体gp160，该前体蛋白在蛋白酶作用下，裂解成gp120和gp41。p24、gp120、gp41及p55是HIV免疫学诊断的主要检测抗原。调控基因编码辅助蛋白，调节病毒蛋白合成和复制[3]。tat等6个基因被称为调控基因，分别表达6种蛋白质，对病毒复制起调控作用，它们分别是tat(transactivator)反式激活因子，rev(regulatorofexpressionofvirionproteins)毒粒蛋白表达调节因子，nef(negativeregulatoryfactor)负调控因子，vpr(viralproteinr)病毒r蛋白，vpu(viralproteinu)病毒u蛋白，vif(virioninfectivityfactor)病毒感染因子。3.形态特征HTLV-III的病毒粒子是直径约1000埃（长度单位，0.0000000010厘米）的圆球。粒子外包裹着由两层脂质组成的膜。这种脂质取之于清主细胞的外膜。由糖蛋白（附有糖链的蛋白质）拴住这层膜。每个糖蛋白有两种组分：覆盖着膜的GP41和伸出膜外的GP120。这种由膜和蛋白质组成的被膜包裹着一个由蛋白质P24和P18组成的核。病毒RNA被携带在核内。此外还有逆转录酶的几个挎贝，其功能是催化病毒DNA的装配。4.培养特性以经植物血凝素激活的正常人外周血T淋巴细胞为滋养细胞，与含有HIV的淋巴细胞共同培养，同时加白细胞介素—2以支持T细胞的生长，加聚宁胺胶以促使病毒的吸附，加氢化可的松以抑制细胞的免疫反应。这是，HIV便可在培养的细胞内大量繁殖，然后进行病毒检测。5.流行特性不管怎么说艾滋病是20世纪下半叶最严重的一种传染病。至今全世界已有4000多万人感染了艾滋病病毒。至1997年6月30日，全世界艾滋病患者已达1644183名，预计未来10年将超过1亿。目前全球每分钟有11人感染艾滋病病毒。截至1998年9月底，我国感染HIV者为11170人，艾滋病患者338例，死亡184例。实际上感染者已超过30万，预计两年后超过120万二、致病性和感染剂量1、致病性一定量的病毒进入体循环中的淋巴细胞、单核细胞以及周围淋巴结，病毒迅速复制和繁殖，病毒量急剧猛增，每毫升血浆中病毒RNA可达10万至100拷贝（10的5次方-10的6次方拷贝/ML血浆），因此急性期在血清中可以发现相当高水平的HIV抗原，但抗体不能被检测到。大约50%-70%的感染者会出现临床症状，主要表现为发热、皮疹、咽炎、淋巴结肿大、恶心、呕吐、腹泻等症状。这些症状一般都很轻微短暂，持续2-4周左右，经对症处理甚至不经治疗即可恢复正常。随即机体的免疫系统迅速进入战斗状态，产生相应的抗体，由于免疫系统的防卫功能，在短短几个星期内，病毒RNA会降低，降低程度与免疫能力有密切关系，免疫能力越强病毒RNA降低越多，预后越佳。末梢血检查，白细胞总数正常或减少，单核细胞增加。急性HIV感染期后，有一个较长的没有任何临床症状，能够维持正常的免疫状态的时期，即为无症状期，又称临床潜伏期，多为7-10年，平均8年。在潜伏期内，HIV在人体内一直维持着高度复制平衡状态，也就是病毒每天大量产生，但同时也大量的被清除，不断的感染和杀伤T淋巴细胞，也不断的突变来逃避免疫系统的追击，结果HIV感染者身上会整体表现出在长时间的无症状期后，病人可出现不明原因的进行性消瘦，乏力，这个时期感染者开始出现艾滋病相关综合征（ARC）和较轻微的感染，继而发生“机会性感染”，大多数表现为卡氏肺囊虫肺炎或中枢神经系统的感染，这是大多数AIDS病人死亡的直接原因。血浆病毒载量开始上升，CD4+减少速度明显加快。HIV病毒不仅进入淋巴细胞，同样也进入血液循环中的其他细胞，比如单核细胞。同时亦可进入人体各个脏器包括脑、胃肠道、肝、脾、肾及其他部位患者表现出严重的细胞免疫缺陷，发生各种致命的机会性感染和/或恶性肿瘤，CD4+细胞记数<200个/μL。2.感染剂量主要与感染的途径有关三、感染途径及潜在暴露结果人是唯一的传染源，包括AIDS患者和HIV感染者。人体受HIV病毒感染后直到发病死亡，体内一直携带病毒。感染者的血液、精液、唾液、眼泪、尿、脑脊液、羊水、乳汁、宫颈及阴道分泌物中均能分离到HIV病毒，但在自然传播中起主要作用的是血液、精液和宫颈及阴道分泌物。因此，实验室工作者应穿工作服、戴手套，防止皮肤划伤，并严格按照规程操作，做好自我保护和对污染物的消毒。性接触是主要传播途径，其中男性同性恋的性接触最易感染。美国成年AIDS有63%是同性恋男人，10%是通过异型性生活的男人和女人。在某些地区妓女在AIDS的传播中起主导作用。输注带病毒的血液或血液成分是另一种主要传播途径，使用未经消毒的注射器和针头是静脉注射毒物者中传播AIDS的主要途径。与血液有关的另一种传播方式是器官或骨髓移植。母婴传播是婴幼儿感染HIV的主要方式，可通过血液经胎盘感染、产道羊水感染和哺乳时的母乳感染。到目前为止还没有发现HIV通过空气、食物、饮水、食具或日常生活接触而传播的报道。四、环境中的稳定性HIV能耐受低温而对高温敏感，煮沸可迅速灭活，室温下液体环境中HIV可存活15天，被HIV污染的物品至少3日内有传染性，液体中的HIV加热56℃10分钟即可灭活。干燥状态下外界蛋白质对HIV有显著保护作用，真空冷冻干燥的血制品加热68℃72小时才能保证所含HIV被灭活，HIV对甲醛、戊二醛、乙醇、卤族化合物敏感。37℃时，以下消毒剂处理10分钟，可灭活HIV，常用的消毒剂如70%酒精、10%漂白粉、2%戊二醛、4%福尔马林、35%异丙醇、0.5%来苏和0.3%过氧化氢等均能灭活病毒。消毒效果受以下因素制约：温度、消毒剂浓度、作用时间、病毒数量、病毒株别、有无其它蛋白质及杂质。HIV对紫外线不敏感五、被操作微生物的浓度和剂量的影响在进行HIV抗体检测时要防止血清污染。六、自然宿主和易感人群非洲丛林中，有人患怪病死去，其症状与那5个人很相似。于是人们把过去50年冷冻保存的叨万份血样进行化验发现：在非洲绿猴的血液里存在一种病毒"猴艾滋病病毒"，这种病毒与人艾滋病病毒很相似。因而"猴艾滋病病毒"可能是人艾滋病病毒的祖先。但是绿猴只带毒，不发病。后来人们又在猫、牛体内发现了"猫艾滋病病毒"和"牛艾滋病病毒"。因此有人推测艾滋病病毒是由于人与猴在玩耍中不小心被抓伤，"猴艾滋病病毒"从小小的伤口进人人体，经过变异在人的体内繁殖、生存、传染。当然，这只是一个推测，也有人持不同意见。究竟"艾滋病病毒"来自哪里，现在还不十分清楚。都是易感人群七、实验动物研究，实验室感染和院内感染信息云南境内的北平顶猴对人类HIV－1病毒可感和易感，并不限制HIV-1在细胞内的复制。该发现表明，在现有的灵长类动物中，北平顶猴是较为理想和合适的艾滋病模型动物。八、实验活动评估1.样品采集HIV抗体检测主要采集血液样品，样品采集的工作人员应掌握相关专业知识和操作技能，能有效地防止病原微生物扩散和感染。样品采集过程中，工作人员必须清楚意识到待检样品的潜在感染性，操作时须戴手套（如果采集已知的HIV感染者或病人的样本时，应戴双层手套），提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后，不得用手摘取针头，不得给注射器重新“戴帽”，避免刺伤手。针筒内的血要小心缓慢地沿管壁注入试管内，防止血液外溅。盛有血液的试管必须及时加盖，并放置于稳妥的试管架上，防止倾侧。试管在注入血液前应认真检查试管底、管壁有否裂纹和破损。使用后的真空采血器或普通注射器及止血棉球都含有待检样本的血液，必须立即放入内含消毒液的容器内，按有关要求消毒一定期限后，作为医疗废弃物处理，或放置于生物废弃袋中，在密封的情况下送去作高压灭菌处理。如果因流行病学调查及疾病监测需要，在现场采集样本时必须注意：（1）大面积采血时，尽可能不污染采血现场，工作台面应采用一次性的台布铺垫；（2）受检人员较多时，可能出现较混乱场面，应有工作人员注意维持工作秩序，防止人群弄翻已采好的血液样本；（3）必须备足消毒液，以便对被污染的环境及时有效地进行消毒处理；（4）工作完毕，应该将所有的样本采集的残余物质用一次性台布包裹集中放置于生物废物袋（注意：针头等锐器应放置于耐扎的容器内）带回单位高压灭菌后作无害化处理；（5）离开现场前，对现场进行一次彻底的消毒处理；（6）采集的血液样本要按照有关规定运输回本单位。2、样品转移.单位内部运输一般单位的采血点与实验室都有一定的距离，可能是在同一楼，或在另一楼内，采好的样本放在规定的容器内送到实验室，不得徒手拿到实验室内。实验室间远程运输需利用车、船、飞机等交通工具运输的样品，应采用世界卫生组织（WTO）提出的三级包装系统，根据卫生部2005年第45号令《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求，高致病性病原微生物事先应进行规范合适的包装和标记，办妥必要的运输申请手续，方可实施运输。3、样品接收、开启实验室接收样本应在生物安全柜内开启包装件，并检查盛装样品的试管有无破损或渗出的情况，如发现溢漏应立即将存留的样品移出，对被污染的试管、试管架和盛器均需作严格消毒。4、样品分离离心机分离血清样品在离心前，最好在实验室自然放置1-2h。在离心时，最好使用带有密封离心桶（安全杯）或者密封转头的离心机分离血清，离心后，应在生物安全柜里开启试管盖。在生物安全柜内分离血清，操作时，尽量避免产生气溶胶，工作人员的手臂动作幅度不能太大，以免影响安全柜内的空气层流。如果是无盖的试管，应在离心完毕后，静止30min后，再开启离心机盖，如发生试管破损，要对离心机进行严格的消毒。血清分离器械的处理操作完毕后，所有的吸管、Tip吸头、含血球的试管等废弃物应置于规定的已含适当消毒液的容器内，小心的移出生物安全柜，高压和/或焚烧。如使用滤纸片作为载体收集的样本，在实验室内使用缓冲液浸泡、离心收集样本的操作，亦参照上述要求处理。要求工作人员将所有实验操作移至生物安全柜中间进行，安全柜内工作台面由左到右分别为相对清洁和污染区域。消毒应备有合适的消毒液，以随时清除溅出物及溢出物。5、样品检测HIV抗体筛查检测（1）手工操作：①加样、混匀用移液器将分离好的血清在生物安全柜内加样至酶联免疫吸附试验（ELISA）或其它试剂的反应孔中，小心混匀，尽可能避免气溶胶的产生，封盖后，用托盘平移至温箱孵育；②洗涤、溢出洗涤仪使用前应检查吸液针孔是否已阻塞，如发现阻塞应尽快疏通，在洗涤过程中要注意洗涤液不能溢出；每次洗涤完毕，用蒸馏水洗涤几次，以免洗液中的成分产生结晶而阻塞针孔，造成实验环境污染；吸入废液瓶中的液体，应按量加入适量的消毒剂，作用规定时间后处置；（2）自动化酶标仪检测:该仪器操作中存在有加样探针及洗涤的废液均应根据每次废液的量加入足够的消毒剂，作用规定的时间后处理。HIV抗体确认检测（1）手工操作：必须注意，需确认的样品阳性概率非常高。加好样品以后，小心的将反应槽放于摇床上，启动摇床，缓慢地提高转速，直至达到规定的转速，不要启动后马上达到转速，将可能导致液体急促溅出，如摇床失常，液体溢出或泄漏，应及时用消毒剂处理；对每次反应后的废液，应集中收集于容器内，加入足量的消毒剂，作用规定时间后弃之；（2）自动化蛋白印迹仪：仪器使用后收集的废液应按照上述要求处理。6.剩余样品处理如需保藏的血清或血浆样本，应设有专用冰箱、登记造册入档、专人保管。若专库保藏的，必须按照国家高致病性样本管理要求保藏。不需保藏的所有样本，按实验室废弃物处置。7.废弃物处置废弃物处置规范废弃物处置应符合《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技术规范》（2002年版）。废弃物处置从实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品（血球、血清等）、反应板、试剂阴阳性对照、ELISA标记物、试剂包装盒等，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器或生物废物袋中，经高压无害化处理后，密封容器或扎紧废物袋口，按环卫部门要求处置。所有废弃物应按照HIV污染物品处理，由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒，污染或可能造成污染的材料在带出实验室前均应严格进行消毒。记录废弃物的处理应做好记录。消毒效果监测可使用化学、生物指示带/剂法，每次高压灭菌需用化学指示带、每月用生物指示剂来监测灭菌效果。九、重组DNA操作和可能扩大的宿主范围目前，尚未见到对应的操作和文献资料十、预防和治疗措施对于艾滋病，至今尚无根治之术。但科学家经过潜心研究，利用多种技术，取得了不少喜人的成果。其中最引人注目的就是美籍华人何大一推出的"鸡尾酒"疗法。他认为：多种药物合用疗效远大于单一药物。他将两种逆转录酶抑制剂与一种病毒蛋白酶抑制剂合在一起，使被测者体内艾滋病病毒数量达到测不出来的水平。十一、人员安全状况评估制定和完善烈性传染病实验室生物安全技术操作规程；加强可能暴露于HIV病毒或潜在感染性材料的相关业务人员生物安全知识培训；预防和治疗措切实落实和项管理制度；预防和控制实验室等渠道造成HIV感染和传播，建立实验室工作人员可颖症状报告制度，并保证他们能及时被告定点专科医院收治，以防止实验室感染扩散到社会。禁忌人群：从事HIV研究的实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下才能进入HIV初筛实验室进行工作，出现下列情况之一是不宜进入：患发热性疾病；感冒，上呼吸道感染或其他到致抵抗力下降的情况；妊娠，已经在实验室控制区域内连续工作4小时以上左其他原因造成的疲劳状态。实验室工作人员必须持有上岗证进行工作十二、评估结论病原微生物分类分级依据按卫生部《可感染人间的病原微生物名录》（2006年）（简称《名录》），人类免疫缺陷病毒（HIV）列为危害程度第2类病原微生物，根据国务院2004年颁布的424号令《病原微生物实验室生物安全管理条例》，HIV属于高致病性病原微生物。实验活动、实验室级别以及人逐步形成防护要求实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。所有的操作过程应尽量细心，避免产生和溅出气溶胶。对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器等。注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体的）。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。打碎的器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前，应按照相关的规定进行消毒。所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关的法规。溅出或偶然事件中，明显暴露于传染源时，要立即向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗，保留书面记录。按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前，要按照相关的规定消毒；在离开设施转移前，要按照相关的规定打包运输。安全设备正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器、采集感染标本等。涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。当必须在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护措施（跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置），以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用，不能用于接触“洁净”的表面（键盘、电话等），也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。3.人员健康和素质要求实验人员上岗前必须接受严格的生物安全培以及该类病毒实验操作技术的全面培训.4.预防和治疗技工施要求目前尚无特效的病苗。感染后具休治疗方案说见卫生部（HIV诊疗方案）由于目前对病毒感染性疾病没有特效的治疗药物，所以对AIDS也没有有效的治疗办法。加之，HIV病毒核酸与宿主染色体DNA整合，利用宿主细胞进行复制，给药物治疗带来了困难。HIV感染的早期治疗十分重要。通过治疗可减缓免疫功能的衰退。HIV感染者患结核、细菌性肺炎和卡氏肺囊虫肺炎的危险性增加，进行早期预防十分重要。一、支持疗法、尽可能改善AIDS患者的进行性消耗。二、免疫调节剂治疗：（一）白细胞介素2（IL-2）：提高机体对HIV感染细胞的MHC限制的细胞毒性作用，亦提高非MHC限制的自然杀伤细胞（NK）及淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）的活性。（二）粒细胞集落刺激因子（G-CSF）及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）：增加循环中性粒细胞，提高机体的抗感染能力。（三）灵杆菌素：激活脑下垂体——肾上腺