放散试验专题知识专家讲座

放散试验原理红细胞上抗原与血清中抗体在适合条件下发生凝集或致敏，这种结合是可逆。如改变一些物理条件，抗体又可从结合细胞上放散，再以对应红细胞判定放散液内抗体种类并测定其强度，用以判定原来红细胞上抗原型别。这种方法惯用于ABO亚型判定、全凝集或多凝集红细胞定型、类B判定以及新生儿溶血病诊疗等放散试验专题知识专家讲座第1页放散试验专题知识专家讲座第2页放散试验专题知识专家讲座第3页放散试验方法放散试验方法很多，ABO血型IgM抗体以热放散法为惯用。Rh血型IgG抗体以乙醚放散法为惯用。放散试验专题知识专家讲座第4页加热放散法试剂操作注意事项放散试验专题知识专家讲座第5页放散试验专题知识专家讲座第6页加热放散法试剂抗A和抗B分型血清。2%A型和B型试剂红细胞盐水悬液。受检红细胞。放散试验专题知识专家讲座第7页加热放散法操作1.将受检红细胞以大量生理盐水洗涤3次，末次洗涤后，将盐水除尽，取压实红细胞l份，分别与2份抗A和抗B分型血清混合。置4℃lh，每隔10min将试管振摇1次，使充分混合。放散试验专题知识专家讲座第8页加热放散法操作2.离心去除上清液，以4℃冷盐水洗涤红细胞3-4次，倾去洗涤液，留取压实红细胞，加1/2容积生理盐水(如放散液不立刻进行检验，应以AB型血清代理生理盐水)，置56℃水浴中10min,每隔15s振摇l次，使吸附在红细胞上抗体充分放散。放散试验专题知识专家讲座第9页加热放散法操作3.立刻以3000r/min离心，离心时套管内放温水，使温度尽可能保持在56℃，分离得上清液即为放散液。4.将放散液用2%A型和B型试剂红细胞判定抗体，即可检出受检红细胞血型。放散试验专题知识专家讲座第10页加热放散法操作如试验目标判定A亚型，则可用已知A亚型红细胞同时作放散试验，按放散液抗体强度A1﹤A2﹤A3﹤Ax﹤Am，判定受检红细胞亚型型别，B亚型放散液判定方法相同。放散试验专题知识专家讲座第11页加热放散法注意事项1.为了使放散液内含有最多抗体，吸收血清量应加大。2.放散时，应严格注意温度和时间。温度过高红细胞易溶解;温度过低，抗体从红细胞上放散不完全。3.直接抗人球蛋白试验阳性红细胞，如新生儿溶血病患儿或本身免疫性溶血性贫血患者，经洗涤后即可作抗体放散试验。4.放散液中抗体易变性，故应立刻进行判定。若需保留，应将抗体放散于选定AB型血清或牛白蛋白液中。放散试验专题知识专家讲座第12页放散试验专题知识专家讲座第13页乙醚放散法试剂操作特点放散试验专题知识专家讲座第14页乙醚放散法试剂受检者血清对应抗原红细胞(抗凝血)乙醚（分析试剂）AB血清放散试验专题知识专家讲座第15页乙醚放散法操作取含有对应抗抗原抗凝血，离心后吸去血浆，加大量生理盐水，洗涤1次，离心，取压实红细胞备用。取受检者血清5ml，加压实红细胞1ml，混匀后放在适当温度中1小时，在此期间要摇匀1-2次。离心。离心后取出，将上清液吸出另放1管，判定上清液中抗体。放散试验专题知识专家讲座第16页乙醚放散法操作将红细胞用盐水洗涤3次，离心压实红细胞。取1体积压实红细胞，加1体积AB型血清或生理盐水和2体积乙醚，颠倒摇匀10min，然后以3000r/min离心5min.离心后即分成3层，最上层是乙醚，中层是细胞基质，下层是含有抗体放散液，其色深红。放散试验专题知识专家讲座第17页放散试验专题知识专家讲座第18页乙醚放散法操作用清洁吸管吸出放散液，若有混浊，可再离心1次。将放散液放置37℃水浴中30min，除尽乙醚，然后判定抗体。放散试验专题知识专家讲座第19页乙醚放散法特点本试验适合用于判定Rh抗体。最大优点