大鼠心梗模型的知识

大鼠心梗模型1沿左侧胸骨旁斜行切口，上界为两前肢后缘连线，下界为第5肋间，依次切开皮肤、浅筋膜和深筋膜，并用止血钳钝性分离胸大肌和前锯肌交界处，在靠胸骨缘处用止血钳钝性分离第3、4肋间进胸，用专用开胸器撑开3、4肋间暴露心脏，将棉纱放置在肺组织旁边，防止损伤肺组织。，潮气量约3ml/100g，频率为70次/min2待大鼠出现吞咽动作时，拔除气管插管。术毕肌肉注射青霉素10活体取出心脏，迅速取材，去除左、右心房及右心室，冲洗后4%多聚甲醛溶液固定，沿左室长轴由心尖至心底做厚切片，将左室分为6片，石蜡包埋切片3用6一OProlene线缝针在距左心耳下缘1mm处，左冠状静脉主干附近的室间沟内，将LAD连同少量心肌组织一起缝扎，进针深度控制在1~2mm，宽度为2~3mm关胸过程中于切口内放置排气管(用小儿头皮针的软管自制)，关胸毕，抽空胸腔积气后拨除。试停呼吸机，大鼠恢复自主呼吸后，拨出气管插管，充分清除气管内分泌物。4根据文献[l”一]和本实验室条件建立模型:健康成年雄性sD大鼠，体重200一2509，术前禁食12h，不禁饮。3%戊巴比妥钠30m叭g腹腔注射麻醉大鼠，起效后仰卧位固定于鼠板。用0号婴儿喉镜片经口气管插管，插入16G静脉留置针，接小动物呼吸机控制呼吸。确定插管位置深度正确后，口角挂线固定导管，根据血气结果，呼吸参数设定为潮气量4一6ml，频率60一70次/分，吸呼比1:1。备皮，消毒，铺单后，在左侧腋下和剑突连线偏上Icm做一斜切口，长度约为2.scm，以心脏搏动最强点为中心。依次钝性分离深浅筋膜、胸大肌、前锯肌，显露肋骨，可见心脏暗影。将皮肤与各层肌肉做一个荷包缝合备用。充分止血后，由第3、4肋间入胸(心搏最强点偏上一肋)，钝性分离肋间肌，分离肋间肌范围应适当，不能太接近胸骨以免造成大出血。5开胸一定要钝性分离从心跳最明显处开胸没有什么大血管，一些小的血管可以把组织先用止血钳夹一下再剪开，那样不会出血。呼吸机→浅麻醉→右侧卧位→胀肺引流管→缝合肋间→对合胸大肌与前锯肌→缝合皮肤→抽吸胸腔积气、积液→拔除引流管→碘附消毒术野，对合肌肉及皮下61.用套管针气管插管的话，消毒后剪开皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉暴露气管，插套管针，只会留下一个针眼，术后缝合皮肤就行了，不会有什么危险，你的问题可能出在大鼠自主呼吸还不平稳就拔管缝合了，这时候大鼠会窒息死亡。

2.开胸一定要钝性分离从心跳最明显处开胸没有什么大血管，一些小的血管可以把组织先用止血钳夹一下再剪开，那样不会出血。

3.心脏挤出后用棉签翻过来就看到很明显的一条血管，是冠状静脉前降支，考下还有一条旋支。前降支起始处就在肺动脉圆锥和左心耳之间，具体结扎的高低还要看你需要的心梗面积是多大，自己要摸索。左心室的壁还是很厚的，差不多有2~3毫米，你可以解剖一只大鼠看看，我用的就是普通持针器，进针深度尽可能深一点吧，〉1毫米。

4.关胸的时候捏一下胸部排气就行了，也有人说拿针管抽气，但我觉得这种方法力度不好掌握。

5.没有二次开胸过，请其他高人给你指点吧。

祝你早日成功7动物的选则：

健康雄性SD大鼠，建议使用250g左右体重的，耐受力强。而且小一点的胸壁较薄，开胸容易。

麻醉：

我用的是10%水合氯醛，感觉效果还不错，20分钟左右待大鼠呼吸平稳即可手术，2~3个小时后苏醒。剂量0.4~0.45ml/100g体重，这个也有个体差异，要大家自己摸索一下。

这里给大家一些建议：1.麻药刚发挥作用的时候大鼠状态不平稳，这时候不要急于作手术，多观察一会儿。2.麻醉程度宜浅不易深，如果麻药打浅了，只要大鼠没有过分挣扎，可适当局麻，千万不可反复补麻药，我的经验这样的情况即使手术成功大鼠也活不长。

关于呼吸：

这是关系到手术成功与否的最主要因素。麻醉药会使大鼠呼吸道产生分泌物，我一般都是在麻醉大鼠后腹腔注射阿托品0.1mg/只，但据我观察我们学校动物中心的大鼠分泌物不多，不用药也行，曾经买过河南一批大鼠，分泌物极多，必须用药。

气管插管我用的是临床上的静脉输液套管针，创伤小，目前术后没发生过呼吸道感染情况。

关于呼吸机：

我也用过江西特力公司的小动物呼吸机，但发现不太适用于大鼠这样的小动物，潮气量的调节非常粗略，不好控制。现在我用的是我们学校自己生产的呼吸机，其实就是一个简易的空气泵，我自己又改装了一下，现在是医用氧和空气的混合气，呼吸频率60/分钟，潮气量3ml/100g。这里由于条件限制，所以潮气量是比较粗略的，而且氧气含量也无法测量，但是据我的经验，给纯氧对大鼠的损伤比不上呼吸机还大，只要有呼吸肌支持，适当给些氧气辅助一下，大鼠成活不成问题。

关于手术切口：

我是在胸壁正中剪开皮肤，然后在胸骨左侧1CM左右钝性分离皮下组织和肌肉，最后用血管钳撑开胸腔，助手用自制小拉钩拉开胸壁。这样的好处是每一层的开口不在一个位置，关胸后胸腔自然就闭合，不会漏气。我是在心脏搏动最明显处打开胸腔，一般就是从剑突向上两个肋间。

关于心包膜：

有的时候不破心包膜心脏也能挤出来，但大部分时候还是要破的，打开胸腔后会看到在心脏下方有脂肪样东西随着心脏跳动而活动，用眼科弯镊夹起这层膜一拽心包膜就开了，这时候助手从胸部的左右压迫胸壁，术者从腹部轻轻一压心脏就出来了。

关于结扎：

针和线都是以前的师兄传给我的，总之是很细的那种，型号我就说不太清楚了，结扎方法也和坛子里其他人写的一样，找到冠状静脉前降支，针穿过心肌一起结扎住，这里就不再罗嗦了。

关于感染的问题：

大鼠抗感染能力还是很强的，所以术前术中的消毒问题一般注意就行，术后抗生素在天气不热的情况下不给也行，但是还是给些抗生素好，可以减少炎症造成的胸腔粘连。

以上是我想到的一些体会，如果有不明白的地方，愿意和大家交流。8用0号婴儿喉镜片经口气管插管，插入16G静脉留置针，接小动物呼吸机控制呼吸。1011Pfu/mlAd一hPPARYl自制Pfu/ml：plaqueformingunit/ml，噬斑形成单位，指每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体数当噬菌体裂解平板培养基上细菌后，就形成一个空斑，计为一个plaque9TTC染色法并行TTC染色进行心肌梗死范围的测定。TTC染色法：在体动物模型灌注结束后，结扎冠状动脉，左心室注入2-3％Evans蓝2-3ml,确定未缺血心肌（呈蓝色）和缺血心肌（无蓝色）。分离缺血区和非缺血区并以滤纸吸干，置于天平上称重，将缺血区心室肌以平行于房室沟的方向切成7-8片，每片厚1-2mm，置入1％氯化三苯基四氮唑（TTC）磷酸盐缓冲液（PH7.4）中37℃水浴10-15min。缺血危险区因脱氢酶还原TTC而呈红色，梗死区因脱氢酶流失而呈白色，将梗死区和非梗死区分离并分别称重，梗死范围以梗死心肌占缺血心