《蛋白质与酶工程实验》实验教学大纲

第页《蛋白质与酶工程实验》实验教学大纲课程名称：蛋白质与酶工程实验

课程类别：专业主干课适用专业：生物技术

所属实验室：生化与蛋白质工程实验室

实验学时、学分：

32

学时

1

学分一、实验教学目的通过系列综合实验设计与实践操作，使学生能自主综合运用所学基本理论与基本实验技术进行综合实验设计与操作，从而更加系统深入的理解蛋白质与酶工程的基础理论与相关实验技术，培养学生综合运用知识与分析、解决问题的能力，为学生进一步独立开展科研课题奠定基础。二、实验教学要求蛋白质与酶工程实验以设计性和综合性实验为主，学生分组进行，每组约20～25人。授课教师通过发放微课视频与实验题目，并结合讲解和演示，使学生明白实验目的与任务，掌握实验仪器原理和操作使用过程，提前撰写思维导图式实验方案与流程，经教师审核通过后，方可进生化与蛋白质工程实验室进行实验，并要求在规定时间内熟悉、学习仪器设备的使用与操作，并完成相关实验任务。三、对学生的指导和要求（一）实验指导要求：教师通过网络教学平台上学生的实验记录，定期检查学生的实验进度，并对学生所出现的问题进行线上与线下指导，引导学生独立分析并解决问题，鼓励学生积极创新。（二）实验报告要求：采用山西师范大学设备处统一印制的实验纸，以思维导图模式撰写实验目的、实验原理、实验内容、实验材料与方法、实验结果与分析。或以科研论文形式撰写电子版。以上两种形式均需上传到网络教学平台。教师进行线上评阅。四、实验考核方式主要包括四个方面：思维导图式实验方案与流程、实验操作规范、网络平台实验进度与过程性结果撰写、实验报告，每项各占25%。五、实验教学内容实验项目(一)：抑制条件下Km和Vmax的测定及抑制类型的判定（5学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□验证性■

设计性□

综合性■（3）项目主要目的要求：1.掌握米氏方程基本理论；2.掌握抑制条件下Km和Vmax的测定方法；3.掌握酶的抑制类型。（4）主要仪器：移液器、锥形瓶、恒温水浴锅、分光光度计。实验项目(二)：固定化酵母细胞及蔗糖酶的检测（3学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□

验证性■

设计性□

综合性□（3）项目主要目的要求：1.掌握固定化细胞的原理与方法；2.掌握蔗糖酶酶活检测原理与方法。（4）主要仪器：注射器、烧杯等。实验项目(三)：大蒜细胞SOD的提取和分离（6学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□

验证性■

设计性□

综合性□（3）项目主要目的要求：1.掌握SOD的提取原理；2.掌握酶的分离纯化方法。（4）主要仪器：离心机、分光光度计、移液器、锥形瓶等。实验项目(四)：碱性蛋白酶高产菌株的选育（6学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□

验证性□

设计性■

综合性■（3）项目主要目的要求：1.掌握高通量筛选产酶微生物的方法；2.掌握快速检测碱性蛋白酶的酶活方法。（4）主要仪器：超净工作台、高压灭菌锅、移液器等。实验项目(五)：自主设计酶分子修饰实验（6学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□

验证性□

设计性■

综合性■（3）项目主要目的要求：1.掌握酶分子修饰原理；2.掌握酶分子修饰技术。（4）主要仪器：移液器、锥形瓶、分光光度计、离心机。实验项目(六)：基于易错PCR原理自主设计酶的定向进化实验（6学时）（1）项目类别：必做■选做□（2）项目性质：演示性□

验证性□

设计性■

综合性■（3）项目主要目的要求：1.掌握易错PCR原理；2.掌握酶的定向进化基本理论与知识；3.掌握易错PCR操作方法。（4）主要仪器：PCR扩增仪、移液器、分光光度计、离心机。六、实验学时分配序号实验项目学时1抑制条件下Km和Vmax的测定及抑制类型的判定52固定化酵母细胞及蔗糖酶的检测33大蒜细胞SOD的提取和分离64碱性蛋白酶高产菌株的选育65自主设计酶分子修饰实验66基于易错PCR原理自主设计酶的定向进化实验6合计

32七、推荐教材与辅助教学资料［1］《生物工程实验指导》（第一版），王祎玲、段江燕编，科学出版社，2018年；［2］《酶工程实验指导》（第一版），王君编，化学工业出版社，2018年；［