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ICS07.140CCSC06ICS07.140CCSC06安 徽 省 地 方 标 准DB34/T4340—2022法医物证鉴定线粒体DNA种属鉴定技术规范ForensicForensicbiologyidentification SpecificationofmitochondrialDNAforspeciesidentification2022122920230129安徽省市场监督管理局发布前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。法医物证鉴定线粒体DNA种属鉴定技术规范范围本文件规定了法医物证鉴定线粒体DNA种属鉴定的基本要求、检验程序和鉴定意见书。本文件适用于安徽省法医DNA实验室通过线粒体DNA测序的方法对动物源生物检材(包括但不限于血液、肌肉、毛发、骨骼、牙齿)的种属来源进行确认,确认范围为人和高等脊椎动物。(GA/T383-2014法庭科学DNA实验室检验规范SF/ZJD0105008-2018法医物证鉴定线粒体DNA检验规范CNAS-CL08-A002:2018司法鉴定/法庭科学机构能力认可准则在法医物证DNA鉴定领域的应用说明《司法鉴定文书规范》司发通〔2016〕112号3术语和定义3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。法医物证鉴定forensicbiologyidentification鉴定人运用法医物证学的科学技术或者专门知识,对各类生物检材进行鉴别和判断并提供鉴定意见的活动。种属鉴定speciesidentification广义上的种属鉴定包括动植物的类属确定,狭义的种属鉴定指的是动物的生物检材的种属来源鉴定,即确定检材是否属于人体所有,有时还要确定检材属于何种动物。DNAmitochondrialDNA,mtDNA位于线粒体中的DNA,呈双链环状结构。序列比对alignment为确定两个或多个序列之间的相似性和同源性,将它们按照一定的规律进行排列。4缩略语下列缩略语适用于本文件。COI:细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cytochromecoxidasesubunitI)DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)12SrRNA:12S核糖体核糖核酸(12SribosomalRNA)应符合SF/ZJD0105008-2018中4.1~4.3的要求。DNA(DNA按照GA/T383-2014中附录A的方法执行。PCRPCRPCRDNAF:5′-AAACTGGGATTAGATACCCCACTAT-3′R:5′-GAGGGTGACGGGCGGTGTGT-3′示例2:COI引物对F:5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′R:5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′PCR宜采用纯化试剂盒或其他同行公认的纯化方法对PCR扩增产物进行纯化;宜采用商品化测序试剂盒进行测序PCR反应及毛细管测序电泳,获得DNA序列信息。从事DNA种属鉴定的实验室至少应该包括以下质量控制措施:(DNADNA)CNAS-CL08-A002:20187.4.4序列比对鉴定将测序获得的DNA序列在国际通用的基因数据库中进行核苷酸序列比对,宜结合序列比对结果、物种形态、地理分布、时间等综合信息出具鉴定意见。鉴定人根据6.4结果撰写鉴定意见书。鉴定意见书的格式要求参照《司法鉴定文书规范》的规定执行。参考文献
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