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文档简介

配制培育基玫瑰红钠琼脂培育基注：1.在加入药品后微温溶解，滤过后加入玫瑰红钠、葡萄糖

2.玫瑰红钠固体在加入1000ml水时加入0.0133g

玫瑰红钠液体在加入1000ml水时应加入10ml注释

蛋白胨供应碳源和氮源；葡萄糖供应能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁供应必需的微量元素；玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长；琼脂是培育基的凝固剂.同时玫瑰红钠可供霉菌和酵母菌的计数，但霉菌的生长可抑制其他菌种的生长，故在玫瑰红钠培育基中处于优势生长地位。葡萄糖琼脂养基培

注：加入药品后，微热温溶解，滤过后再加入葡萄糖清洗、烘干、制无菌水1.清洗培育皿、移液管、试管（清洗移液管要将管内的水滴甩干净，以防烘干时耗时过长）2.将培育皿、移液管放于烘箱中烘干3.在4支试管中分别加入9ml蒸馏水，塞紧，用纸包扎，一会灭菌包扎、灭菌1.烘干的移液管，在管口处塞上棉花，不能松也不能紧，然后与报纸成30度至45度包扎起来2.将烘干的8个培育皿包扎起来3.将培育基、培育皿、移液管、试管一起放入灭菌锅内灭菌30分钟(121℃、103kPa)稀释样液1.将8个培育皿分为4组，编号1、2、3、42.将移液管、试管分别编号1、2、3、43.1组，用1号移液管在1号试管中取无菌水，分别向1组培育基中加入1ml无菌水2组，用1号移液管取1ml的川贝枇杷糖浆注入2号试管，用2号移液管吹打混匀，再分别取1ml样液于2组培育皿中3组，用2号移液管在2号试管中取1ml样液注入3号试管中，用3号移液管吹打混匀，再分别取1ml样液于3组培育皿中4组，用3号移液管在3号试管中取1ml样液注入4号试管中，用4号移液管吹打混匀，再分别取1ml样液于4组培育皿中

倒平板、培育1.在无菌环境中将培育基倒入培育皿中注：培育皿要持平，到后盖上皿盖，放在试验台上正反旋转几次，以使培育皿中液体混匀2.将培育皿放于培育箱中培育72小时视察、计数一、菌落计数1.选取菌落数在30CFU-300CFU之间、无扩散菌落生长的平板计数菌落总数2.低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多可不记，每个稀释度的菌落数应接受两个平板的平均数。3.其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜接受，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很匀整，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。4.当平板上出现菌落间无明显界限的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数二、菌落总数计算方法1.只有一个稀释度平板的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再用平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或毫升）中菌落总数结果。2.若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内，按下式计算N=∑C/(n1+0.1n2)d平板菌落数之和第一平板菌落数其次平板菌落数稀释因子空白比照稀释10倍稀释100倍稀释1000倍结果1.稀释10倍菌落数大于

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