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文档简介
尿液仪器分析目前常见的临床检查模式干化学直接报告模式1干化学筛选,显微镜确认阳性标本后报告模式2干化学和沉渣流式分析仪筛选,显微镜确认阳性标本后报告模式3参考值
尿流式沉渣检查[/μL]尿红细胞数U-RBC0-25尿白细胞数U-WBC0-30尿上皮细胞数U-EC0-15尿管型数U-CAST0-0.7尿细菌数U-BACT0-6000病理管型U-Path.CAST0.0小圆上皮细胞U-SRC0.0类酵母样菌U-YLC0.0结晶U-X`TAL0.0红细胞信息U-RBCinfo非溶血红细胞数量U-Nlysed#非溶血红细胞百分比U-Nlysed%尿干化学检查pH4.6~8.0蛋白质PRO-葡萄糖GLU-酮体KET-尿胆原UBG+-胆红素BIL-亚硝酸盐NIT-红细胞ERY-白细胞LEU-比密SG1.015~1.025VitC<0.6mmol镜检结果红细胞RBC:0~3/HP白细胞WBC:0~5/HP上皮细胞EC:少结晶CRYSTAL:少管型CAST:0~偶见/LP
•尿比重
•尿酸碱度
•尿白细胞
•尿蛋白质
•尿亚硝酸盐
•尿葡萄糖•尿酮体•尿胆原•尿胆红素•尿红细胞尿液干化学分析尿液的酸度(PH)比密(SG)蛋白质(PRO)葡萄糖(GLU)酮体(KET)胆红素(BIL)尿胆原(UBG)亚硝酸盐(NIT)白细胞(LEU)红细胞/隐血(Hb)维生素C(Vitc)反应模块尼龙膜:防止大分子物质对反应的污染;绒制层:包括碘酸盐层和试剂层:碘酸盐层可以破坏维生素C等干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色变化;吸水层:可使尿液均匀快速的浸入,并能抑制尿液流到相邻的反应区;塑料底层:作支持体。
尼龙膜碘酸盐层试剂层吸水层塑料底层空白块:用于消除尿自身颜色在试剂块上产生颜色的干扰。尿液分析试纸项目缩写符号反应原理酸碱度pHpH指示剂蛋白质PROpH指示剂的蛋白质误差法葡萄糖GLU葡萄糖氧化酶法隐血BLDHb类过氧化物酶法胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法酮体KET硝基铁氰化钠法亚硝酸NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU酯酶法比密d(SG)多聚电解质离子解离法抗坏血酸ASG吲哚酚法尿干化学试纸按功能分组模块组合1:比密、蛋白质、红细胞、白细胞:与肾脏疾病相关模块组合2:白细胞、红细胞、亚硝酸盐:与泌尿系感染性疾病有关模块组合3:比密、葡萄糖、酮体:与内分泌系统疾病有关模块组合4:胆红素、尿胆原:与肝胆系统疾病有关模块组合5:pH、比密、维生素C:对干化学实验的影响监测。按检测项目分
8项:pH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、BLD、NIT9项:8项+LEU10项:9项+SG11项:10项+VitC12项:11项+颜色或透明度组合型试带肾病型四联试带:pH、蛋白、隐血、比密糖尿病型五联试带:pH、蛋白、葡萄糖、酮体、比密肝脏病型二联试带:胆红素、尿胆原浸渍试带条将多联试带完全浸入尿液1~2s,然后立即取出。沥去多余尿液沿试管壁将试带上多于尿液去尽。检测标本将试带置于仪器检测槽内,直至仪器自动打印出报告。尿干化学分析试带及结果判断各种尿干化学分析仪一、尿液分析仪仪器检测原理
仪器采用球面积分仪接受双波长反射光,测定试剂带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫,各自与尿中相应成分进行独立反应,而显示不同颜色,颜色的深浅与尿液中某种成分的含量成比例关系。试剂带中还有另一个“补偿垫”,作为尿液本底颜色,对有色尿液所产生的误差进行补偿。测定波长:是被测试剂块的敏感特征波长;参考波长:是被测试剂块的不敏感的波长,用以消除背景光和其它杂散光的影响。
照射光波长的选择由检测项目决定。亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原的测定波长为550nm;PH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm;
参考波长为720nm。计算原理
R(%):反射率Tm:试剂垫对测定波长的反射强度Ts:试剂垫对参考波长的反射强度Cs:标准垫对参考波长的反射强度Cm:标准垫对测定波长的反射强度尿液自动分析仪结构图CPU尿液分析仪由:机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。光电管球面积分仪滤光片光源
(二)光电系统结构图四、尿液分析仪结构返回本节目录尿液试纸条urinaryreagentstrip光源接收器(二)试带使用注意事项1.
严格按操作说明书要求进行操作;2.
试带要在有效期内使用;3.
试带从冷藏变成室温前不要打开瓶盖,用后盖紧瓶盖;开过盖的试带瓶不建议放在冷藏温度,可放阴凉、干燥、避光处。4.禁止用手触摸试剂区,5.
不同厂家的同类试纸,其原理、方法、结果不相同,不可混用。尿干化学方法学评价优点:操作简便、快速、同时获得多项结果。缺点:影响因素多,必须结合尿理学检查、显微镜检查,互相验证、综合分析目前国内采用方法:干化学法LEU、BLD、PRO、NIT四项皆(-),可不镜检。其中任一项出现异常时,则必须镜检。注意事项:①以尿沉渣作为诊断依据或观察疗效时,不宜用干化学过筛(肾脏病、内分泌病、免疫病等)②临床医生要求的;
(三)试纸分析的假阳性和假阴性1.尿中含高浓度VC,可使试纸法葡萄糖和隐血结果呈假(一);2.尿蛋白试纸是利用PH指示剂的蛋白质误差原理,白蛋白的反应性最强,球蛋白的反应性弱。3.某些药物(如氯丙嗪、酚噻嗪、吩嗪类药物)可使尿BIL、URO等呈假(+);4.尿PH超过8.0以上,PRO呈假(+);三、
干化学分析仪的局限性
1.
试剂条的因素2.
尿本身的因素:如标本采集不不合格等3.
操作原因:如仪器的校准、维护、环境温度。4.
皆为定性分析,只能做过筛试验。其次是不能检测尿有形成分,因而不能代替尿沉渣检查。尿液结果分析:干化学(+)镜检(-)干化学(-)镜检(+)WBC细胞破坏以淋巴细胞为主RBC为Hb、Mb尿,含热不稳定酶、菌尿大量VitC,试带失效NIT标本放置时间过久或被污染尿路感染的病原微生物种类、无硝酸盐的存在、尿液标本留取的时间、药物尿沉渣分析仪
尿沉渣分析仪
尿沉渣分析仪是用显微镜或专用设备对尿液有形成分检查的仪器,摆脱了繁琐和费时的操作程序,做到尿沉渣分析的标准化、自动化。目前使用的尿沉渣分析仪,主要有:图像识别法、流式细胞仪法,以及尿液分析工作站等几种类型。
运用流式细胞术及特殊荧光染色的原理,将尿标本染色后进入鞘液流动池时,每个有形成分单个纵列通过流动池中心轴线,每个粒子均被氩激光光束照射,并各自发出不同的荧光强度(信号)。信号表达为3类:即前向散射光、荧光和电阻抗。
(一)流式细胞式尿沉渣分析仪荧光染色9-氮杂菲(Phenanthridine)染色DNA和RNA发射荧光为:橙色对死细胞胞膜穿透性强羰花青(Carbocyanine)细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色发射荧光为:绿色March6,200034SysmexCorporation(IHQ)流式细胞检测原理、核酸染色
对尿液有形成分进行定量分析流式细胞式尿沉渣分析仪原理激光束(=488m)荧光强度fl:前向散射光强度:细胞大小RND、DNA强度前向散射光脉冲宽度:细胞长度荧光脉冲宽度(F1w):细胞染色质长度电阻抗:反映细胞体积流式细胞式尿沉渣分析仪原理前向散射光强度(Fsc):细胞大小
前向散射光脉冲宽度(Fscw):细胞长度荧光信号
荧光强度(Fl):细胞染色质(DNA/RNA)的强度荧光脉冲宽度(Flw):细胞大小电阻抗:反映细胞体积前向散射光信号
仪器将这种荧光,散射光和电阻抗的信号转变为电信号,综合分析这些电信号,得出细胞大小、长度、染色强度和染色部分长度以及细胞的体积资料,并给出每类细胞的散射图和直方图,并计算出每微升尿中各种细胞的数量进行报告。UF-100尿沉渣分析系统散点图细胞大小细胞长度荧光脉冲宽度前向散射光脉冲宽度UF-100尿沉渣分析系统散点图细胞大小染色质强度前向散射光强度荧光强度RBCBacteriaWBCS_FLHS_FscYLCX’talSperm均一型与非均一型红细胞直方图70%红细胞平均体积
129.7ch70%红细胞平均体积64.5chYLCRBCBacteriaWBCS_FLLS_Fsc白细胞散点图SpermEC急性与慢性泌尿系感染白细胞直方图白细胞数目可判定病情为急性或是慢性急性白细胞数大于60/l;慢性白细胞数大于10/l白细胞散点图可帮助判定疾病是急性还是慢性。中日友好医院检验报告单姓名:姓别:年龄:样本号:常1258病历号:病区:床号:送检医生:UF结果单位参考值UF结果单位干化学结果白细胞12.2/uL0—30
病理管型0.0/ul
PH
6.5白细胞(HPF)2.2/HPF0—5.4
SRC0.0/ul
比重
1.030红细胞8.1/uL0—25
YLC
0.0/ul
白细胞_红细胞(HPF)1.5/HPF0—4.5
NLRBC#5.5/ul
亚硝酸盐_上皮细胞1.2/uL0—15
NLRBC%66.1%
尿蛋白_上皮细胞(HPF)0.2/HPF0—2.7
红细胞信息
葡萄糖_
管型0.1/uL0—0.7
RBCP7063.1ch
酮体_管型(LPF)0.3/LPF0—2.0
结晶数量18ul
尿胆原16.0细菌2607.8/uL0—6000
粘液丝数量0.0ul
胆红素_细菌
2.6x106/ml0-6.0x106/ml
电导率29.1Ms/cm
隐血10/HPF、/LPF转换为/μL
HPF体积=0.18mL
1/HPF=1/(0.18mL) =(1/0.18)/mL
=5.56/mL
LPF体积=2.9mL 1/LPF=1/(2.9mL)=(1/2.9)/mL
=0.34/mL
干化学结果与UF-100交叉确认987654321123456789<6<17<28<55<110<275<550551
UF-1003+2+1++/--干化学流式细胞术尿沉渣分析仪检测参数红细胞(RBC)均一性红细胞(IsomorphicRBC)%非均一性红细胞(DysmorphicRBC)%非溶血性红细胞数量(Non-LysedRBC#)非溶血性红细胞百分比(Non-LysedRBC%)白细胞(WBC)上皮细胞(EC)、小圆上皮(SRC)管型(CAST),病理管型(Path.CAST)细菌(BACT)酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)结晶(X’TAL)尿液电导率(conductivity)RBCP7070%红细胞位置
提示:以未溶解的RBC为100%时,70%红细胞的平均体积。NLRBC%未溶解RBC百分比
提示:完整RBC的百分比(不包含影形RBC,RBC碎片,皱缩红细胞)。红细胞形态信息
RBCP70Fsc<80ch
RBC-P70Fsc>100chDysmorphic?(非均一型)?Isomorphic?(均一型)?RBCINF红细胞信息
提示:RBC来源。Microcytic(不均一小红细胞)?提示红细胞源于肾小球Normocytic(正常均一红细胞)?提示红细胞非来源于肾小球Nonclassified(未分类型)?提示混合型红细胞细胞
Negative提示红细胞计数正常病例1:男,29岁,尿干化学检查pH5.0蛋白质PRO-葡萄糖GLU-酮体KET-尿胆原UBG-胆红素BIL-亚硝酸盐NIT-红细胞ERY+++白细胞LEU-比密SG1.015VitC<0.6mmol尿流式沉渣检查U-RBC1440.2U-WBC5.9U-EC1.5U-CAST0.13U-BACT132.6U-Path.CAST0.0U-SRC0.0U-YLC0.0U-X`TAL171.6U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#1431.3[/μL]
U-Nlysed%99.3[%]镜检结果WBC:0~3/HPRBC:满视野/HP肾结石病例2:男,81岁,镜检结果WBC:满视野/HPRBC:10~20/HPEC:2~8/HP急性膀胱炎尿干化学检查pH7.0蛋白质PRO+-葡萄糖GLU-酮体KET-尿胆原UBG+-胆红素BIL-亚硝酸盐NIT+红细胞ERY+白细胞LEU+++比密SG1.010VitC<0.6mmol尿流式沉渣检查U-RBC195.9
U-WBC1509.8U-EC74.3
U-CAST1.15U-BACT1025.0U-Path.CAST0.2U-SRC2.0U-YLC0.0U-X`TAL7.6U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#177.9[/μL]
U-Nlysed%90.8[%]病例3.男,25岁,镜检结果WBC:5~10/HPRBC:10~20/HPEC:满视野/HP透明管型:满视野/LP颗粒管型:满视野/LP肾小球肾炎尿干化学检查pH6.5蛋白质PRO++葡萄糖GLU-酮体KET-尿胆原UBG+-胆红素BIL-亚硝酸盐NIT-红细胞ERY+白细胞LEU+比密SG1.010VitC<0.6mmol尿流式沉渣检查U-RBC141.5
U-WBC97.0U-EC602.3
U-CAST118.39U-BACT2090.7U-Path.CAST38.9U-SRC18.2U-YLC0.0U-X`TAL0.0U-RBCinfoIsomorphic?U-Nlysed#14.8[/μL]
U-Nlysed%10.4[%]治疗前治疗后急性膀胱炎慢性膀胱炎肾盂肾炎治疗前后散点图对比临床应用-糖尿病真菌性膀胱炎临床应用-急性肾盂肾炎临床应用-输尿管结石,肾盂肾炎临床应用-IgA型肾小球性肾炎临床应用-肾病综合症
病例张某,男,39岁,急性肾小球肾炎。图示该患者尿液标本UF-100分析仪测试结果。尿干化学分析结果:
SG:1.025KET:negNIT:neg
LEU:25/μlBIL:negGLU:norm
PRO:5.0g/LpH:7.0UBG:normERY:250/μl
镜检结果:
WBC:5-10/HPRBC:满视野/HPEC:0-2/HP
尿蛋白定量:2.20g/24h尿沉渣分析仪结果:红细胞位于散射图的左下方,非均一性红细胞占99.7%;经相差显微镜检查证实为多形性红细胞急性肾小球肾炎RBC:391.4WBC:96.7EC:12.1BACT:122.2WBC-MFsc:82.5[ch]RBC-MFsc:54.2[ch]DysmorphicRBC%99.7%方法学评价1.优点:①不需离心尿液,可自动进样;②所需标本量少;③检测速度快,效率高,可报告多项参数;④检测过程计数的粒子数0~40000,提高了准确性;⑤操作程序同一,易于标准化和质量控制。2.局限性:①对尿液中的某些成分不能准确辨认,仍需显微镜进行分类和确认。②应用时间短,普及面窄,临床实际应用经验欠缺;③尚未建立公认的参考范围;
仪器采用流式细胞术、高速频闪光源和电视摄相的光学系统,计算机对图像进行分析等技术。
图像识别尿沉渣分析仪图像识别尿沉渣分析仪AVE-763尿沉渣智能分析仪
尿沉渣定量计数池图像识别尿沉渣分析仪—方法学评价
国内进入较晚,尚未普及,应用经验少,试剂应用效果尚待进一步探讨。①使用光学流动计数池,体积准确恒定,视野清晰,由于是密闭的管道,标本不污染工作环境,安全性好。②由于尿液有形成分复杂,且易发生变形,有时图像识别软件难以识别。③不能识别的成分如何处理,是否删除处理。如细胞管型、细胞重叠、模糊的图像和碎片等④其误差如何评估,如何去除干扰⑤如何合理的组合尿干化学与影像学的结果
尿干化学分析仪+UF-100尿沉渣分析仪
+显微镜检查尿干化学分析仪+图像识别尿沉渣分析仪(三)尿液自动化分析工作站急性膀胱炎(治疗前)RBC:195.9[μL]WBC:1509.5[μL]EC:74.3[μL]BACT:1025.0[μL]WBC-MFsc:87.5[ch]RBC-MFsc:116.2[ch]急性膀胱炎(治疗中)RBC:33.3[μL]WBC:284.8[μL]EC:76.4[μL]BACT:544[μL]肾结石病人RBC:1440.2[μL]WBC:5.9[μL]BACT:132.6[μL]DysmorphicRBC%:8.8%透明度颜色SG1.010PH5.5NIT+
LEU++150/uLPRO++1.0g/LGLU++5.5mmol/LKETnegBILnegUBGnormERY++150/uLCONDCT21.1mS/cmPCASTF0.3/uLN-WBC50/uLBACT8
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