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文档简介
最新款的摩托车你想过吗?谁能告诉我这是WHAT?谁能告诉我这是WHAT?基因工程及其应用第2节基因工程:即。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,地改造生物的。原理:操作水平:结果:一、基因工程基因重组DNA分子水平定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。基因拼接技术或DNA重组技术定向遗传性状二、基因操作的工具1、基因工程的指“限制性核酸内切酶
”主要存在于微生物一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子已发现的有200多种种类:来源:特点:“”作用于:磷酸二酯键限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程点击播放
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思考:形成的黏性末端不同不同的限制酶呢?具有2、基因工程的指“DNA连接酶”“”作用:将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子DNA连接酶的作用过程点击播放
DNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成:磷酸二酯键。3、基因的运载体(2)条件①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存②具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接③具有标记基因,便于进行筛选(3)常用的运载体:质粒、噬菌体和动、植物病毒等(1)运载体的概念
标记基因,便于进行检测。
其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子.
(4)它们的共同特点是都有侵染或进入宿主细胞的能力第一步:获取目的基因三、基因工程基本步骤1、从基因文库中获取目的基因2、利用PCR技术扩增目的基因有两种方法:
①逆转录法:以信使RNA为模板,在逆转录酶的作用下利用脱氧核苷酸合成DNA(基因)。
②化学合成法:根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核糖核苷酸顺序,再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。3、人工合成基因法第二步:目的基因与运载体结合注意:要用同一种限制酶切取目的基因和运载体,并用DNA连接酶连接。思考:有几种连接方式?第三步:将目的基因导入受体细胞1、常用的受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等2、常用微生物作受体细胞的原因:微生物增殖快、代谢快、目的产物多1、分子检测:①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因。检测方法:DNA分子杂交。②检测目的基因是否转录出mRNA。检测方法:分子杂交③检测目的基因是否翻译成蛋白质检测方法:抗原-抗体杂交
目的基因的检测和表达第四步:2、个体生物学水平的鉴定:①确定是否有抗性以及抗性程度。鉴定方法:做抗虫或抗病的接种实验②确定转基因产品功能活性是否与天然产品相同。鉴定方法:基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较目的基因的检测和表达第四步:
大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物
四、基因工程的应用1、基因工程与作物育种抗虫转基因植物生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基因的番茄2、基因工程与药物研制我国生产的部分基因
工程疫苗和药物
许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。
微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。
胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。
将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%!
基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。
通常一种假单孢杆菌只能分解石油中的一种烃类.用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。
科学家还培育出能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质的细菌。3、环境污染治理
利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。
转基因食品
安全吗?!
转基因抗乙肝西红柿(中国),虽然不能治愈乙肝,但一年只吃几个抗乙肝西红柿,就完全能代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食品,就是将乙肝疫苗植入西红柿内,经过多代繁殖,使转入的基因稳定化。用转基因的植物生产药物转基因植物的安全性争论支持派认为:如果转基因农业生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且强调,迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。美国人食用转基因食品已多年,超级市场上有4000多种商品是含有转基因植物成分的,还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引起死亡。
加拿大、澳大利亚也是转基因食品的生产大国,均有几千万人在吃,到现在为止也没有—个案例说明它有问题。反对派的观点一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能;美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国GMO产品的进口。⒈要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是()①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶A.①②B.③④C.①④D.②③⒉实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA分子的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是利用了酶的()A.高效性B.专一性C.多样性D.催化活性易受外界影响AB随练习堂科学家将携带抗虫基因的运载体导入二倍体棉花细胞中,经培养、筛选获得一株有抗虫特性基因的植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作杂合子。得到的棉花新品种对棉铃虫毒杀效果高达80-100%。该资料中,杂合子抗虫棉个体在自交F1代中,理论上仍具有抗虫特性的植株占总数的
。原因是
。该项
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