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UDC(633.1+633.85).001.4X10中华人民共和国国家标准GB5522—85粮食、油料检验过氧化氢酶活动度测定法InspectionofgrainandoilseedsMethodsfordeterminationofhydrogenperoxidaseactivity1985-11-02发布1986-07-01实施家标唯局国批准
中华人民共和国国家标准粮食、油料检验过氧化氢酶活动度测定法GB5522-85中国标准出版社出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:63787337、637874471986年5月第一版2006年3月电子版制作书号:155066·1-23816版权专有侵权必究举报电话:010)68533533
中华人民共和国国家标准UDC(633.1+633.85.001.4粮食、油料检验GB5522-85过氧化氢酶活动度测定法lnspectionofgrainandoilseedsMethodsfordeterminationofhydrogenperoxidaseactivity本标准适用于商品粮食过氧化氢酶活动度的测定仪器和用具1.1恒温水浴锅;1.2电炉:1.3离心机或吸滤装置;1.4推形瓶:100mli1.5量筒:10、15m1g1.6移液管:5、10,20m11.7研钵:1.88滴定管、细口瓶、漏斗等。2试剂2.113%过氧化氢溶液:取30%过氧化氢溶液3ml加水稀释至30ml2.2:10%硫酸溶液;2.30.1N高锰酸钾溶液;2.4pH7.7索伦逊磷酸盐缓冲液:甲甲液,称取礁酸氢二钠11.876g溶于11水中。乙液,称取磷酸二氢钾9.078g溶于11水中。临用时,甲、乙液按9:1混合。2.5石英砂或用干净的玻璃片研制成的细砂。3操作方法3.1过氧化氢酵的提取:称取试样(能换算成无水试样1g),放入研钵中,加少量细砂,量取缓冲被50ml,先倒出5~10m1于研体中研磨试样,然后经漏斗倒入馆形瓶中,用剥余的缓冲液洗净研体和漏斗,再把洗液倒入锥形瓶内,振摇后静置2~3h,用吸滤法或离心沉淀法获得透明的提取液。3.2酶活动度的测定:摇勾提取液,吸取20ml注入锥形瓶中,加入20ml水和3ml39过氧化氢溶液,在室温下放置15~30mia,加入5m110%硫酸溶液,摇勾,用0.1N高锰酸钾溶液滴定剥余的过氧化氢,记下用去的高锰酸钾溶液廷升数(Y,)。3.3对照试验;吸取20ml提取液注入锥形瓶中,置于沸水浴中加热5mia,或用直接煮沸法破坏过氧化氢酶。加20ml水和3ml3%过氧化氢溶液于锥形瓶中,在室温下放置15~30min,再加入10%碗酸5ml
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