标准解读

《GB/T 40255-2021 对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程 PCR检测法》是一项国家标准，专门针对对虾肝胰腺细小病毒（HPV）的诊断提供了一套基于PCR技术的方法。该标准适用于对虾养殖过程中疑似感染HPV病例的确诊以及相关研究。

在本标准中，首先明确了实验所需材料与试剂，包括但不限于DNA提取试剂盒、特异性引物、Taq酶等，并且强调了这些试剂的质量要求，以保证后续操作能够顺利进行并得到准确的结果。对于样品采集方面，则详细描述了从活体或冷冻保存状态下的对虾中获取组织样本的具体步骤，推荐使用肝胰腺作为主要检测部位，因为这是病毒最易累积的地方之一。

接着，标准给出了详细的DNA提取流程，采用商业化试剂盒结合特定的操作指南来完成这一过程。之后是PCR反应体系建立部分，这里不仅列出了各种成分如模板DNA、上下游引物、dNTPs等的具体用量，还规定了扩增条件，比如预变性温度时间、循环次数及每个循环中的退火延伸参数等。通过优化这些参数设置，可以大大提高目标片段的扩增效率和特异性。

此外，《GB/T 40255-2021》还特别提到了结果分析方法，即如何根据电泳图谱判断是否存在阳性信号，以及如何处理可能出现的假阴性或假阳性情况。同时，为了确保整个检测过程的有效性和可靠性，标准还设置了内部对照实验，用以监控每批次实验的一致性和准确性。

最后，在质量控制章节里，标准提出了关于实验室环境、人员培训、仪器校准等方面的要求，这些都是保障检测结果真实可靠不可或缺的因素。通过遵循这套标准化的操作流程，科研人员和水产养殖从业者能够更加高效准确地识别出受HPV感染的对虾个体，从而采取相应措施减少疾病传播风险。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-05-21 颁布
  • 2021-12-01 实施
©正版授权
GB/T 40255-2021对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程PCR检测法_第1页
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文档简介

ICS6502030

CCSB.41.

中华人民共和国国家标准

GB/T40255—2021

对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程

PCR检测法

Codeofdiagnosisforinfectionwithhepatopancreaticparvovirusof

penaeidshrimp—PCRmethod

2021-05-21发布2021-12-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T40255—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国水产标准化技术委员会归口

(SAC/TC156)。

本文件起草单位中国水产科学研究院黄海水产研究所全国水产技术推广总站

:、。

本文件主要起草人杨冰万晓媛黄倢余卫忠史成银张锋宋晓玲李清张庆利许华李晨

:、、、、、、、、、、、

刘莉

。

Ⅰ

GB/T40255—2021

对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程

PCR检测法

1范围

本文件规定了对虾肝胰腺细小病毒病诊断规程中普遍适用的核酸检测技术的要求针对肝胰腺细

,

小病毒给出了检测法所需试剂或材料仪器设备样品试

(Hepatopancreaticparvovirus,HPV),PCR、、、

验步骤和结果判定

。

本文件适用于对虾各生活期样品中带毒情况的定性检测以进行对虾肝胰腺细小病毒病的

HPV,

流行病学调查诊断检疫和监测

、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

白斑综合征诊断规程第部分组织病理学诊断法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

碱基对

bp:(basepair)

脱氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脱氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙锭

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

盐酸

HCl:(hydrogenchloride)

肝胰腺细小病毒

HPV:(hepatopancreaticparvovirus)

氢氧化钠

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Ta水生栖热菌thermusauaticus

q:(q)

盐酸和缓冲液

TE:TrisED

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