生物制药学概述

1第一章 绪论1DNA重组技术或其他生物技术研制的蛋白质或核酸类药物。2、生物药物按其功能用途可以分为三类〔〕〔〕3〕诊断药物。3、生物技术药物的特性〔〕〕3〕〔〕5〕〕〕〔〕9〕多效性和网络效应〔1〕检的特异性4、生物技术制药的特性：高技术；高投入；长周期；高风险；高收益。其次章基因工程制药1和多肽类，包括：(1)免疫性蛋白，各种抗原和单克隆抗体。(2)细胞因子，如各种干扰素,白细胞介素，集落刺激生长因子，表皮生长因子及凝血因子〔3〕激素，如胰岛素，〔4〕酶类，如尿激酶，链激酶，葡激酶，组织型纤维蛋白溶酶原激活剂及超氧化物歧化酶等。28隆的A1BA1B干扰素。3、基因工程技术是将所要重组对象的目的基因插入载体，拼接，转入的宿主细胞，构建4工程菌—产物分别纯化—除菌过滤—半成品检定—成品检定—包装。5mRNA的纯化；CDNA第一链的合成；CDNA其次链的合成；CDNA克隆；将重组体导入宿主细胞；CDNA文库的鉴定；目的CDNA的分别和鉴定。67、基因表达的微生物宿主细胞分为两类：原核生物，目前常用的有大肠杆菌，枯草芽孢杆菌，链霉菌。真核生物，常用的有酵母，丝状真菌。89、影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素〔〕外源基因的剂量2〕率：启动子的强弱；核糖体结合位点的有效性；SD序列和起始密码的间距；密码子组〔〕〔〕〔5〕工程菌的培育条件。10短的原核多肽和真核蛋白结合在一起的。11mRNA的AUG端不含任何细菌多肽序列。12、质粒的不稳定分为分裂不稳定和构造不稳定。13性和培育条件有关；二是这两种菌比生长速率差异的大小。14、提高质粒稳定性的方法：选择适宜的宿主菌；选择适宜的载体；选择压力；分阶段掌握培育；掌握培育条件；固定化。15、接种量：是指移入的种子液体积和培育液的体积的比例。1、基因工程药物的分裂纯化特点〔1〕目的产物在初始物料中含量低〔〕〔3〕目的产物的稳定性差〔〕〕应用面广。17、分别纯化的根本过程的5个步骤：包括细胞裂开，固液分别，浓缩与初步纯化，高度纯化直至得到纯品，成品加工。1、产品的保存1〕液态保存：低温保存；在稳定PH〔2〕固态保存：干粉或结晶。19品检定—分装—冻干—成品检定—成品包装。其次章 动物细胞工程制药1细胞生物学，分子生物学等理论和技术，有目的地进展细心设计，细心操作，使细胞的某些遗传性发生转变，从而到达改进或产生品种的目的，以及使细胞增加或重获得产生某种特定产物的力量，从而在离体条件下进展大量培育，增值，并提出对人类有用的产品。2、贴壁细胞：这类细胞的生长必需有可以贴附的支持物外表，细胞依靠自身分泌的或培育〔分为两种形态，即成纤维样细胞型或上皮样细胞型。3、悬浮细胞这类细胞的生长不依靠支持物外表可在培育液中呈悬浮状态生长。 44、兼性贴壁细胞：有些细胞并不严格地依靠支持物，它们既可以贴附于支持物外表生长，但在肯定的条件下，它们还可以在培育基中呈悬浮状态良好地生长。5、动物细胞的生理和生长特点？答〔细胞的分裂周期长〔并有接触抑制现象〔〕正常二倍体细胞的生长寿命是有限的4〕动物细胞对四周环5〕动物细胞对培育基的要求高〔〕动物细胞对蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不同。6、DNA〔〕融合法：细胞融合法；脂质体介导法；原生质体融合法；微细胞介导法〔〕DNDEA—葡聚糖法；3〕物理法：电穿孔法；显微注射法；基因枪法〔〕转录病毒介导法；重组DNA病毒介导法。78、二倍体细胞系：原代细胞经过传代，筛选，克隆，从而从多种细胞成分的组织中选择并纯化出某种具有肯定特征的细胞株。9、〕〔〕质粒载体，穿梭质粒载体。1〔1〕提高了细胞培育的可重复性避开了由于血清批次之间差异的影响〕减小了由血清带来病毒，真菌和支原体等微生物污染的危急〔〕，稳定4〕细胞产品易于纯化5〕避开了血清中某些因素对有些细胞的毒性〔6〕减小了血清中蛋白对某些生物测定的干扰，便于对试验结果的分析。11细胞，也适用于兼性贴壁细胞。12适用于一切贴附依靠性细胞，也适用于兼性贴壁细胞。13、动物细胞培育的操作方式：分批式操作，流加式操作，半连续式操作连续式操作，灌流式操作。14、组织工程即通过对细胞的大量培育，并用细胞直接作为一种治疗手段用于临床或用培育的细胞进一步加工构成一种组织人造皮肤人造肝脏人造姨腺人造骨和人造血管，并用于临床治疗。 、第四章 抗体制药12B淋巴细胞克隆产生的，称为单克隆抗体。34答：免疫酶技术、免疫荧光技术和放射免疫技术。5HAT培育液配方及其筛选细胞的原理：HT,，是用次黄嘌呤H、氨基喋呤A、胸腺嘧啶T〕院子里是1〕氨基喋呤A〕能阻断DNA脾融合细胞不能合成DNA不能合成DNA而死亡。(2)骨髓瘤细胞都是次黄嘌呤磷酸核苷转移酶〔HGPRT〕缺乏株，由于不能将H转化为G，瘤-瘤融合细胞、瘤细胞由于不能合成DNA而死亡。67、基因工程抗体的目的：一是降低鼠源性单克隆抗体分子的免疫原性；二是降低抗体的相对分子质量，一增加组织的透过性。8、抗体争论领域的进展大致可分为3个阶段1以1890年Behring表，起特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体〕以1975年Kohler创立杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表〔3〕以1994年Winter以基因工程方法制备为代表。9、噬菌体抗体库技术的特点〔1〕模拟自然全套抗体库2〕〔〕可获得高亲和力的人源化抗体。10、血清学鉴定用的抗体试剂：诊断血清、分群血清、分型血清、因子血清等。11、凝集反响：在细菌、红细胞等颗粒性抗原中参加相应抗体，在有适量的电解质存在下，能形成肉眼可见的凝集块。1、抗体治疗药物分为那些〔〕放射性同位素标记的抗体治疗药物2〕3〕毒素偶联的抗体药物。第五章植物细胞工程制药1、植物的分化：高等植物的分化可以分为胚胎发生和器官发生两个阶段。前者是从精子一通过器官分化过程，形成根、茎、叶、花和果实。2、脱分化：已经分为的细胞、组织和器官在人工培育的条件下又变成未分化的细胞和组织的过程。3、再分化：通过脱分化诱导形成的愈伤组织在适宜的培育条件下再分化成为胚状体或直接分化出器官。愈伤组织形成胚状体一般有两个途径：1、由体细胞或性细胞，通过脱分化形成胚状体。2、通过愈伤组织直接形成胚状体。4、外植体：外植体是指用于植物组织〔细胞〕培育的器官或组织〔的切段，植物的各部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进展组织培育。5、无性生殖系：在植物细胞工程中是指使用母体培育物反复进展继代培育时，通过同一外植体而获得越来越多的无性生殖后代而言，如根无性系、组织无性系、悬浮培育物无性系等。6、突变体：经过确证已发生遗传变异或的培育物至少是通过一种诱变处理而发生变异所得的细胞，即为突变体。7、生理活性物质：是一类对细胞内的生化反响和生理活动起调整作用的物质的总称，包括酶、维生素、植物激素和抗生素等。8〔如细胞分裂和生殖〕产生作用，其量虽微，但作用甚大。9、抗生素和植物杀菌素：是由微生物〔如某些菌类植物〕产生的能杀死或抑制某些微生物10、简述植物组织和细胞培育成分有那些？答：无机盐、碳源、植物生长调整剂、有机氮源和维生素。11、影响植物次级代谢产物累积的因素？〔1〕生物条件，如外植体、季节、休眠、分化等〔〕物理条件，如温度、光、通pH值和渗透压等〔〕基酸、核酸、抗生素、自然物质、前体等〔〕工业培育条件，如培育罐类型、通气、搅拌和培育方法等。12、植物细胞的固定化培育有那些有点？〔1〕可以保护细胞免受剪切〔2〕细胞可长时间重复使用〕〔〕细胞间接触良好，易于分化，有利于次级代谢产物的合成5〕削减细〔6〕易于实现连续化操作。13、什么叫生物转化?与生物合成、生物降解有什么区分？答：生物转化是指生物离体培育或器官及细胞器等对外源化合物进展构造修饰而获得有价值产物的生理反响，其本质是利用生物体系本生所产生的酶对外源化合物进展酶催化反响，它具有反响选择性强、反响条件温顺、副产物少、不造成环境污染和后处理简洁等优点，并可以进展传统有机合成不能或困难进展的化学反响。生物转化与生物合成不同，后者是指利用整体细胞、器官和有机体中简洁的底物合成物的过程；与生物降解不同，在生物降解中，简单的底物被分解为简洁物质。第六章 酶工程制药12〔〕2〕微生物生长生殖快、生产周期短、产量高〕培育方法简洁，原料来源4〕微生物具有较强的适应性和应变力量，可以通过各种遗传变异的手段，培育出的高产菌株。3〔1〕生殖快、产酶量高、酶的性质应符合使用要求，而且最好是产生胞外酶的菌；〔2〕不是致病菌，在系统发育上与病原体无关，也不产生有毒物质〔〕产酶性能稳44、大肠杆菌是应用最为广泛的产酶菌；枯草杆菌是工业上应用最为广泛的产酶菌之一；啤酒酵母是工业上最为广泛的酵母。5使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂，制备固定化酶的过程称为酶的固定化。6、固定化酶的优点〔1〕可以在较长的时间内屡次使用，而且在多数状况下，酶的稳定性〔〕反响后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量〔34单位酶催化的底物增加，用酶量削减〔〕比水溶酶更适合与多酶反响。75种酶和细胞纯化的固定化的方法？答：物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法、包裸法、热处理法。8〔1〕2〕酶稳定性的变化：操作稳定性，贮藏稳定性，热稳定性，对蛋白酶的稳定性〔〕p数〔自然酶经固定后，KmKm值不会变小〔近。9、酶化学修饰的概念：通过主链的切割、剪切和侧链基团的化学修饰对蛋白酶进展分子改造，以转变其物理性质及生物活性。10的应用域，促进生物技术的进展〔〕提高生物活性对针对效应反响性能的转变〔2〕在不良环境中的稳定性3〕针对异体反响，降低生物识别力量。11、修饰酶的特性：热稳定性提高、抗各类失活因子力量提高、抗原性消退、体内半衰期延长、最适pH转变、酶学性质变化。126-APA，7-ACA只要转变pH6-〔6-APA〕或7氨基头孢烷7-AC，也可以催化6-APA或7-ACA与其他的羧酸衍生物进展反响，以合成的具有不同侧链基团的青霉素或头孢霉素。G〔V〕6-氨基青霉烷酸6-AP，是无侧链青霉素，它是生产半合成青霉素的最根本原料。以6-APA合成了近3万种衍生物。并已筛选出了几十种耐酸、低毒、广谱抗菌的半合成青霉素。136氨基青霉烷酸？练习题：1、名词解释脱分化、植物组织和细胞培育；基因表达、融合蛋白、非融合蛋白、干扰素、凝集反响、Fab片段、免2、问答题：承受动物细胞作为宿主细胞有哪些特点？动物细胞培育的操作方式有哪些？试述细胞工程制药中常用的根本方法。细胞表达产品的质量要求6-氨基青霉烷酸的技术路线。作为酶制剂的生产菌应具有哪些特定的要求？酶的催化特点利用微生物生产酶制剂有哪些突出的优点？酶分子经过化学修饰后，其特性在肯定程度上发生了转变，请写出修饰酶的特性简述植物细胞固定化培育的优点。简述植物细胞培育基的根本组成成分请举例说明影响植物次级代谢产物产生和累积的因素有哪些〔每个因素至少举出一例〕简述基因工程药物制造的主要程序。mRNA分别纯化的方法。简述提高质粒稳定性的方法。用于基因表达的宿主细胞应满足哪些要求？影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？试述干扰素的生理功能及基因工程干扰素制备的工艺流程。试述基