标准解读

《GB/T 38485-2021 微生物痕量基因残留测定 微滴数字PCR法》是一项国家标准，旨在规范使用微滴数字PCR技术进行微生物痕量基因残留检测的方法。该标准适用于食品、环境样本等中微生物DNA的定量分析，特别是当目标DNA浓度极低时的应用场景。

标准详细规定了从样品处理到结果报告整个过程的操作步骤和技术要求。首先，在样品制备阶段，强调了正确采集和保存样本的重要性，以避免外源性污染或降解导致的数据偏差。接下来是核酸提取部分，推荐采用高效且特异性强的方法来获取高质量的DNA模板。

对于微滴数字PCR反应体系构建，标准提供了具体的试剂配比建议以及温度循环参数设置指导，确保每次实验条件一致，从而提高数据重复性和准确性。此外，还特别指明了如何通过内参物质校正可能存在的抑制效应，保证定量结果的真实可靠。

在数据分析环节，《GB/T 38485-2021》明确了阳性判定标准及阴性对照的作用，并提出了基于泊松分布原理计算目标序列拷贝数的方法论框架。同时，也给出了质量控制措施，比如定期进行性能验证实验，以监控系统稳定性并及时发现潜在问题。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-12-31 颁布
  • 2022-07-01 实施
©正版授权
GB/T 38485-2021微生物痕量基因残留测定微滴数字PCR法_第1页
GB/T 38485-2021微生物痕量基因残留测定微滴数字PCR法_第2页
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文档简介

ICS07080

CCSA.21

中华人民共和国国家标准

GB/T38485—2021

微生物痕量基因残留测定

微滴数字PCR法

Determinationfortracegeneresiduesofmicroorganisms—

MicrodropletdigitalPCR

2021-12-31发布2022-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T38485—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中国标准化研究院提出并归口

。

本文件起草单位清华大学中国科学院微生物研究所河北省食品检验研究院中国标准化研

:、、、

究院

。

本文件主要起草人张翀邢新会杜文斌周巍郭永剪兴金汪海燕郑蒙蔡东洋马爱进

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38485—2021

微生物痕量基因残留测定

微滴数字PCR法

1范围

本文件规定了用微滴数字法测定微生物痕量基因残留以下的方法

PCR(100pg/mL)。

本文件适用于加工产品中酿酒酵母和植物乳杆菌痕量特征基因残留以下的测定

(100pg/mL)。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

痕量基因残留tracegeneresidue

微生物加工产品在后续分离纯化中很难去除的痕量含量在以下核酸

(100pg/mL)。

4原理

利用液滴微流控技术将待测生物样品所残留的目标核酸扩增体系分割成几十份到几万份包

,PCR

含一个拷贝的核酸分子微升级油包水微滴按照常规体系对其进行扩增通过荧光探针实现信号

。PCR,

读出所产生微滴阳性信号的数目即代表了原始样本中目标核酸分子的拷贝数从而直接数出目标核

。,

酸分子的个数对起始样品的痕量基因残留进行定量

,。

5试剂或材料

除非另有规定仅使用分析纯试剂

,。

51水为规定的一级水将一级水在下高压加热灭菌制备得到无菌水

.GB/T6682。121℃15min。

52提取试剂盒

.DNA。

53微滴数字反应试剂盒

.PCR。

54引物和探针

.

541酿酒酵母引物和探针

..:

SC-F:5'-GGACTCTGGACA

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